脊髓背角SPARCL1在瑞芬太尼诱发切口痛小鼠痛觉过敏形成中的作用

(整期优先)网络出版时间:2020-08-10
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摘要目的评价脊髓背角富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白类似蛋白1(SPARCL1)在瑞芬太尼诱发切口痛小鼠痛觉过敏形成中的作用。方法健康雄性C57BL/6J小鼠48只,8~10周龄,体重18~22 g,采用随机数字表法分为6组(n=8):对照组(C组)、切口痛组(I组)、瑞芬太尼组(R组)、切口痛+瑞芬太尼组(I+R组) 、切口痛+瑞芬太尼组+阴性对照siRNA组(I+R+N组)和切口痛+瑞芬太尼+ SPARCL1-siRNA组(I+R+S组)。I+R+N组和I+R+S组分别鞘内注射1×108 IFU/ml阴性对照siRNA和SPARCL1-siRNA 10 μl,C组、I组、R组、I+R组鞘内注射生理盐水10 μl,6组均注射1次/d,连续3 d。待稳定转染后,C组和I组尾静脉注射生理盐水0.1 ml,R组、I+R组、I+R+N组和I+R+S组尾静脉注射瑞芬太尼10 μg/kg(用生理盐水稀释至0.1 ml),6组均连续注射4次,间隔15 min。I组、I+R组、I+R+N组和I+R+S组于第1次尾静脉给药后制备切口痛模型。分别于输注生理盐水或瑞芬太尼前24 h(T0)、 输注停止后3、6、24和48 h(T1-4)时测定机械缩足反应阈(MWT)和热甩尾潜伏期(TWL)。于T4时测定痛阈后处死小鼠,取L4-6节段脊髓背角组织,分别采用Western blot法和qRT-PCR法检测SPARCL1及其mRNA的表达水平。结果与C组比较,I+R组和I+R+N组T1-4时MWT降低,TWL缩短,I组、R组和I+R+S组T2-4时MWT降低,TWL缩短,R组、I+R组、I+R+C组脊髓背角SPARCL1及其mRNA表达上调(P<0.05或0.01);与I组或R组比较,I+R组MWT降低,TWL缩短,脊髓背角SPARCL1及其mRNA表达上调(P<0.01);与I+R组比较,I+R+S组T1-4时MWT增加,TWL延长,脊髓背角SPARCL1及其mRNA表达下调(P<0.05或0.01),I+R+C组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论SPARCL1活性增强参与了瑞芬太尼诱发切口痛小鼠痛觉过敏的形成。