免疫组化联合抗体在胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测中的应用

免疫组化联合抗体在胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测中的应用

刘芳芳，陈智伟，黄丽金

莆田学院附属医院病理科 福建莆田 351100

【摘要】目的：分析在胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测中免疫组化联合抗体的应用效果。方法：取70例本院（2018年1月-2019年5月）收治的行胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测患者作为研究对象，所有研究对象均开展免疫组化联合抗体检测，对比免疫组化联合抗体检测在胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测中的价值。结果：胸腹水液基层薄层制片阳性检出率较高。在石蜡包埋病理检测技术中，可提主同细胞成分收集率，观察组织结构，同时联合免疫组化检测，可在清晰的背影下，准确定位阳性颗粒，提高检出率的同时明确肿瘤组织来源。结论：免疫组化联合抗体检测用于胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测中，可提高胸腹水检出率，提高疾病诊断符合率，为临床提供有效的参考依据，值得推广。

【关键词】胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测；免疫组化；抗体；应用效果

目前，随着人们生活与饮食习惯不断变化，使得恶性疾病发病率直线上升。特别是对于胸腹水患者来讲，有效的良恶性病情判断，对提高疾病的诊断结果、制定有效的治疗措施具有积极作用^[1]。胸腹水是肿瘤患者最常见的一种并发症，在其的临床诊断中，多以体液细胞检查为主，但此检查方法检出率较低。随着医疗技术的进步，体液细胞检测可通过镜下清晰地观察结构及形态，提高诊断符合率。且在石蜡包埋病理检测中，免疫组化联合抗体检测中，可以尽早诊断患者病情，提高诊治效果^[2]。本次针对在胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测中免疫组化联合抗体的应用效果进行分析，报告如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

取70例莆田学院附属医院（2019年1月-2019年5月）收治的行胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测患者作为研究对象。70例患者中男性、女性分别44例、26例，年龄38-70岁之间，平均年龄（64.39±10.29）岁；病程：1-3年，平均病程(2.08±0.29)年。本次研究经本院伦理会同意。且所有样本均由莆田学院附属医院病理科副主任医师确诊为恶性。

1.2方法

70例患者，均抽取新鲜的胸腹水，送往检测。胸腹水抽取后放置时间不可超过2h，置于50ml离心试管内，每管50ml，加入乙醇（95%），离心处理15min（2000r/min），将上清液弃之，吸出沉淀物，将其制成1张液基细胞涂片，剩余的沉淀物，用滤纸包埋，置入脱水盒中，对其进行编号，之后在脱水机中同时放于组织标本，做固定、脱水、透明、浸蜡流程，最后将其制成石蜡组块，并将其切成3-4um切片。

1.3分析指标

对比免疫组化联合抗体检测在胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测中的价值。

免疫组化染色与结果判断：应用Elivision法开展检测，所用的抗体有癌胚抗原、CK-H、Calretin、CKlow、CA125、D2-40、Ki-67、TTF-1、Tg等。所有试剂由福州迈新生物技术开发有限公司提供。将切片常规脱蜡至水，采用PBS洗液，加入H₂O₂(3%)，放于室温下放置10min，以此来消除内源性过氧化物酶的活性。抗原修复根据说明书进行，加入一抗，让其在4℃的冰箱过夜，加入二抗，DAB显色，复染采用苏木素，分化用盐酸乙醇，行切片脱水与封片。

结果：部分肿瘤细胞胞质（D2-40、Tg、CEA等）着色为阳性，CK-H、Calretin、CKlow、CA125等肿瘤细胞胞质着色为阳性；Ki-67、TTF-1肿瘤细胞核着色为阳性^[3]。

2. 结果

2.1检出率比较

70例患者中，经液基细胞涂片染色，在形态特点下检出癌细胞40例。阳性率57.1%。且以上检出患者，经沉渣包埋也可检出癌细胞。经液基细胞涂片检查，发现可疑癌细胞20例，在沉渣石蜡包埋、免疫组化技术检测后，检出18例癌细胞。在胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测中免疫组化联合抗体检测检出总例数58例，差异有意义，P<0.05，见表1。

表1检出率比较

58例患者经过沉渣包埋、切片、免疫组化，检出癌细胞包括间皮瘤5例、卵巢癌6例、胃腺癌12例、鳞癌10例、肺腺癌25例。即在腺癌中：CK-H（-）、Calretin（-）、CKlow（+）、CA125（+）、TTF-1（+）；鳞癌：CK-H（+）、Calretin（-）、CKlow（-）、CA125（-）、TTF-1（-）。

2. 讨论

在胸腹水检测中，脱落的细胞学检查具有易行、简单、准确、快速等特点，且还可以减轻患者痛苦，临床应用较为广泛，且胸腹水脱落细胞还是确定良恶性胸腹炎的主要方法。常规的离心法，阳性检出率较低。近年来，随着液基细胞检测技术、沉渣石蜡包埋法的进步，在胸腹水检测中被广泛应用。沉渣石蜡包埋制出的切片细胞结构完整，且数量多，图像清晰，可以极大地提高阳性检出率

^[4]。此外，在石蜡切片时，开展免疫组织染色，联合抗体检测，对肿瘤进行分类。

胸腹水脱落细胞学检测中，对于癌细胞与间皮细胞的鉴别较难，特别是对于退变的间皮细胞，因不典型易被误诊，且在沉渣石蜡包埋时，病灶细胞形态清晰、有规律性排列，异型性较为明确。因此，在一些不能明确病情的病例中，免疫组化联合抗体检查，可以对癌细胞与细胞分类为临床提供一定的指导作用。同时，在实践中，单个抗体在不同癌细胞中具有不同的敏感性与特异性，取多种抗体联合检测，并在石蜡包埋切片中检测中，具有积极作用^[5]。因此，在胸腹水沉渣石蜡包埋病理检测中，免疫组化联合抗体检测，可有效提高不同肿瘤诊断符合率，为临床提供诊治指导，值得临床推广。

参考文献：

[1]李潇,田保玲,刘娟娟,等.胸腹水细胞沉渣石蜡包埋免疫组化检测法指导晚期卵巢癌新辅助化疗研究[J].中国实用妇科与产科杂志,2016,32(09):890-895.

[2]魏霖,程焰红,李颜,等.胸腹水沉渣包埋结合免疫组化染色在细胞病理诊断中的应用[J].诊断病理学杂志,2015,22(12):825.

[3]朱林琳,罗明惠,孟亚飞,等.免疫组化抗体联合应用在胸腹水沉渣包埋病理诊断中的意义[J].中国农村卫生,2015(18):45.

[4]翟辉霞,李文灿.免疫组化联合抗体在胸腹水沉渣石蜡包埋病理诊断中的应用[J].卫生职业教育,2014,32(04):144-145.

[5]彭丽姿.免疫组化联合抗体在胸腹水沉渣石蜡包埋病理诊断中的应用观察[J].2016,29(4):50-51.