旋光法测定硫酸新霉素注射液的含量

旋光法测定硫酸新霉素注射液的含量

何金燕

何金燕（江苏省南通市中医院药剂科226000）

【摘要】目的建立硫酸新霉素注射液的含量测定方法。方法采用旋光法测定硫酸新霉素的含量，同时考察附加剂、温度、pH值、放置时间以及光线等因素对旋光度的影响。结果硫酸新霉素在1～10mg/ml浓度范围内,旋光度与浓度呈良好线性关系,相关系数γ=0.9999,平均回收率为100.2%（n=9），RSD为0.50%，日内RSD为0.33%，日间RSD为1.20%。结论采用旋光法测定硫酸新霉素注射液中硫酸新霉素的含量，该法简便快速，结果准确，适用于医院制剂的快速分析。

【关键词】硫酸新霉素注射液旋光法含量测定

【中图分类号】R927.2【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2012）20-0276-02

1.前言

硫酸新霉素是氨基糖苷类抗生素，其抗菌谱广，对葡萄球菌属、需氧革兰氏阴性杆菌等均具有良好的抗菌活性[1]。新霉素是一种混合物，包括新霉素A、B及C三种成分。A为B和C的水解产物，B和C是同分异构体，临床上应用的是新霉素B和C混合物的硫酸盐。

我院配制的硫酸新霉素注射液，主要用于眼部感染的治疗，是眼科常用的抗感染药物之一。目前对硫酸新霉素注射液的质量控制仅限于性状、鉴别、检查PH值，未对该制剂的主药硫酸新霉素进行含量测定。《中华人民共和国药典》（2005年版二部）规定硫酸新霉素的含量测定方法为微生物检定法[2]，该法结果可靠，但操作繁琐费时，对检验环境要求高，不适用于医院制剂的质量控制和快速分析。文献曾报道硫酸新霉素的测定方法有比色法[3][4]，分光光度法[5][6]，高效液相色谱法[7][8][9]，薄层显象光密度分析法[10]等。

本文将根据硫酸新霉素具有旋光性的性质，采用旋光法[11]测定硫酸新霉素注射液的含量。此法具有简便快速，结果准确等优点，适用于医院制剂快速分析，同时考察附加剂、温度、pH值、放置时间以及光线等因素对旋光度的影响。现将结果报道如下：

2.仪器与试药

2.1仪器

WZZ-2s字式旋光仪（上海光学仪器修理厂）；pHS-3C型酸度计（上海雷磁仪器厂）；BP211D型电子天平(德国Sartorius公司)

2.2试药

硫酸新霉素（宜昌三峡制药有限公司，批号200705056，效价687u/㎎），氯化钠（南通勤奋制药厂，批号050206）

2.3样品

硫酸新霉素注射液（本院制剂室生产）

3.方法和结果

3.1标准曲线的制备

精密称取105℃干燥至恒重的硫酸新霉素10.0010g，置于100ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。精密量取此贮备液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，制成系列标准溶液。依法测定各标准溶液的旋光度，结果见表1。以旋光度α为纵坐标，浓度C为横坐标，求得其回归方程α=0.0144＋0.0565C（γ=0.9999）。结果表明，硫酸新霉素在1～10mg/ml浓度范围内，旋光度α与浓度C呈良好线性关系。

表1标准溶液旋光度测定结果

浓度(mg/ml)1.02.04.06.08.010.0

旋光度(°)+0.072+0.126+0.239+0.355+0.467+0.578

3.2回收率试验

分别精密称取105℃干燥至恒重的硫酸新霉素6.96g、5.80g、4.64g各三份，置于100ml容量瓶中，同时按处方比例分别加入附加剂氯化钠，溶解后加水稀释至刻度，摇匀，配成模拟硫酸新霉素注射液样品。精密量取模拟样品5ml，置于50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，配成低、中、高（80%、100%、120%）三种浓度的模拟样品溶液，依法测定其旋光度，并代入回归方程，计算硫酸新霉素的含量，并计算回收率，结果见表2。

表2硫酸新霉素回收率实验结果

3.3精密度测定

取3.1标准曲线的制备项下的高、中、低三种浓度的溶液，依法重复测定其旋光度6次，计算日内RSD和日间RSD，结果日内RSD分别为0.52%、0.33%、0.30%，日间RSD分别为1.67%、1.20%、0.89%。

3.4样品的含量测定

精密量取三批硫酸新霉素注射液样品各5ml，分别置于50ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。依法测定其旋光度，代入回归方程计算样品的含量。结果见表3。

表3样品含量测定结果

批号旋光度(°)测得浓度(mg/ml)相对于标示量(%)

071109+0.3395.727498.7

080218+0.3375.709798.4

080407+0.3425.8048100.1

4.影响旋光度因素的考察

4.1附加剂对旋光度的影响

按硫酸新霉素注射液处方配制仅加入附加剂的空白样品，依法测定其旋光度，旋光度为0.000。结果表明：附加剂对硫酸新霉素注射液的旋光度基本无影响。

4.2温度对旋光度的影响

取硫酸新霉素注射液，测定其温度和旋光度，然后分别在5℃、10℃、15℃、20℃、30℃、35℃温度下稳定30min后，依法测定其旋光度，结果见表4。结果表明：在温度5℃～３5℃范围内硫酸新霉素的旋光度基本无变化但随着温度的升高，其旋光度逐渐下降。

表4温度对旋光度的影响

温度(℃)2551015203035

旋光度(°)+3.510+3.441+3.426+3.364+3.438+3.390+3.435

4.3pH值对旋光度的影响

取硫酸新霉素注射液，测定其pH值和旋光度，然后分别用0.1mol/L盐酸和0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH，配成pH值为1、2、3、4、5、6、7、8、9的系列溶液，依法测定系列溶液的旋光度，结果见表5。结果表明：pH值在3～7范围内对硫酸新霉素的旋光度基本无影响，而当pH值在3以下时，其旋光度略微下降，当pH值在7以上时，其旋光度明显降低。

表5pH值对旋光度的影响

4.4放置时间对旋光度的影响

取硫酸新霉素注射液，测定其旋光度，然后分别在室温条件下避光保存1h、2h、3h、6h、12h、24h后，依法测定其旋光度，结果见表6。结果表明：硫酸新霉素注射液避光放置24h后，其旋光度基本无变化，随后对该制剂跟踪测定3个月，旋光度基本无变化，说明该制剂稳定性良好。

表6放置时间对旋光度的影响

放置时间0h1h2h3h6h12h24h3个月

旋光度(°)+3.435+3.431+3.432+3.428+3.420+3.428+3.431+3.430

4.5光线对旋光度的影响

取硫酸新霉素注射液，测定其旋光度，然后分别在室温条件下自然光照30min、60min、90min后，依法测定其旋光度，结果见表7。结果表明：自然光对硫酸新霉素的旋光度无影响。

表7光线对旋光度的影响

放置时间（min）0306090

旋光度(°)+3.435＋3.425＋3.418＋3.421

5.讨论

5.1旋光法测定硫酸新霉素注射液的含量所用仪器简单，操作简便快速，结果准确，对实验环境、仪器设备要求不高，适用于医院制剂，尤其对产品中间体的质量控制和快速分析。

5.2物质的旋光度与测定光源、测定波长、溶剂、浓度和温度等因素有关。本文实验结果表明硫酸新霉素注射液的附加剂氯化钠、温度5℃～35℃、溶液pH值3～7、放置3个月及自然光对硫酸新霉素的旋光度基本无明显影响。

5.3硫酸新霉素极易吸湿，引湿增重达29.36%，引湿后成糊状[12],因此精密称取与配制称量时速度要快，避免误差。

5.4该制剂在室温储存时可保存1天，有时室温或37°C贮存时，溶液的颜色渐变深，但也不降低效价[13]，为了避免变色，故新霉素制剂一般要避光保存。

参考文献

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[13]顾学裘,张汝华,童演生等.药物制剂注解[M].北京：人民卫生出版社,1997,931-933.