血清钙检测

血清钙检测

阚秀梅1马艳2程爱华2

阚秀梅1马艳2程爱华2（1黑龙江哈尔滨市儿童医院150010)(2黑龙江哈尔滨市传染病医院150030）

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)01-0237-02

【关键词】血清钙钙含量测定

(一)甲基百里香酚蓝比色法(MTB)

1.原理血清中的钙离子在碱性溶液中与甲基百里香酚蓝(MTB)结合，生成一种蓝色的络合物。加入适量8-羟基喹啉，可消除镁离子对测定的干扰，与同样处理的钙标准液进行比较，求得血清总钙含量。

2.试剂

(1)甲基百里香酚蓝贮存液：称取8-羟基喹啉4.0g溶于50ml去离子水中，再加浓硫酸5ml，搅拌促使其溶解，移入1L容量瓶中，加甲基麝香草酚蓝0.2g，聚乙烯吡咯烷酮(PVP)6.0g，最后用蒸馏水稀释至刻度，贮存于棕色瓶中，置冰箱保存。

(2)碱性溶液：取二乙胺溶液35ml于lL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度，在室温保存。

(3)显色应用液：临用前，根据标本量取l液1份与2液3份混合即可。

(4)钙标准液(2.5mmol／L)：精确称取经110％干燥12小时的碳酸钙250mg，置于1L容量瓶内，加稀盐酸(1份浓盐酸加9份去离子水)7ml溶解后，加去离子水约900ml，然后用500g/L醋酸铵溶液调节至pH7.0，最后加去离子水至刻度混匀。

(二)邻-甲酚酞络合铜直接比色法

1.原理邻-甲酚酞络合铜(OCPC)是金属络合染料，也是酸碱指示剂，在pH11.0溶液中与钙及镁螯合，生成紫红色螯合物。做钙测定时，在试剂中加入8-羟基喹啉以消除标本中镁离子的干扰。与同样处理的钙标准液比色，可求得血清钙含量。

2.试剂

(1)邻-甲酚酞络合铜显色剂：称取8-羟基喹啉0.5g，置烧杯中，加浓盐酸5ml，使其溶解并转入500ml容量瓶中，再加入邻甲酚酞络合铜25mg，待完全溶解后，加TritonX-1001ml，混匀，然后加去离子水至刻度，置聚乙烯瓶内保存。

(2)1mol／LAMP碱性缓冲液：称取2-氨基-2-甲基-1-丙醇(AMP)89.14g，加500ml去离子水溶解后移入lL容量瓶中，再用去离子水稀释至刻度，置聚乙烯瓶中室温保存。

(3)显色应用液：应用时根据标本的多少将上述两液等量混合。

(4)钙标准液(2.5mmol／L)：见MTB法。

(5)5g／LEGTA溶液：称取乙二醇二乙醚二胺四乙酸盐(EGTA)0.5g于100ml去离子水中，此试剂用于测定浑浊标本。

(三)乙二胺四乙酸二钠滴定法

1.原理标本中钙离子在碱性溶液中与钙红指示剂结合成为可溶性复合物，使溶液成淡红色。乙二胺四乙酸二钠盐(EDTA-2Na)对钙离子的亲和力很大，能与该复合物中的钙离子络合，指示剂重新游离而使溶液呈现蓝色。所以在滴定钙时，加入钙红为淡红色，用EDTA-Na2滴定转变为蓝色时，为滴定终点。与同样处理的钙标准液滴定，计算出标本中钙的含量。

2.试剂

(1)0.2mol／L的氢氧化钠溶液：称取氢氧化钠8g，用去离子水溶解并稀释至lL。

(2)钙红指示剂：称取钙羧酸钠[化学名2-羟基.1.(2-羟基4-磺基-1-萘基偶氮)-3-萘甲酸钠]0.1g，溶于甲醇20ml中，置棕色瓶中保存。

(3)乙二胺四乙酸二钠溶液：称取EDTA-Na20.1g，加去离子水50ml，加1mol／L氢氧化钠2ml，待完全溶解，加去离子水至100ml。

(4)钙标准液(2.5mmol／L)：配法同MTB法。

(四)离子钙测定

1.原理离子选择电极是一种化学传感器，它能将溶液中某种特定离子的活度转变成电位信号，然后通过仪器来测量。电极电位随溶液中离子活度变化的关系服从Nemst方程。

选择电极的电位(E)与溶液中被测离子活度的对数成线性美系。

2.试剂各厂家生产的仪器所需试剂都是配套供应的，其配方未完全公开。

3.操作商品的离子钙分析仪所用的钙电极都采用中性载体做钙电极的活性材料制成聚氯乙烯(PVC)电极。

参考文献

[1]徐国宾，蒋琳.临床生物化学常规定量方法的分析性能评价［J］.中华检验医学杂志，2007，30：141-143.

[2]于嘉屏.全自动生化分析仪及试剂间化学污染对测定结果的影响［J］.中华检验医学杂志，2007，30：1301-1302.

[3]蒋文英，李泽孟，樊雪英.日立7170A全自动生化分析仪防交叉污染程学序的设计［J］.现代检验医学杂志，2003，18：36-37.

[4]于雷.全自动生化分析仪项目间试剂的交叉污染及其避免方法［J］.临床检验杂志，2003，21：168.

[5]李浩，缪应业，郭昭静.生化全自动分析仪分析顺序对检测结果的影响［J］.临床检验杂志，2001，19：212.