全自动生化分析仪交叉污染解析

全自动生化分析仪交叉污染解析

车汝萍方芳

车汝萍方芳（辽宁省大连市第七人民医院检验科辽宁大连116023）

【中图分类号】R443+.8【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）12-0142-01

随着科学技术的不断发展，各种全自动生化分析仪相继出现并广泛应用于临床实验室。由于共用吸样针、试剂针、搅拌棒以及比色杯，当生化仪长期使用致其清洗能力下降、比色杯老化后引起吸附力增加、生化仪内污垢的积聚、测试顺序安排不当，且常规清洗不能有效消除交叉污染时，就会增加试剂间化学污染的可能性，引起测定结果不准确。通过对交叉污染原因的解析，为有效排除交叉污染奠定了基础。

1试剂间化学污染的类型

1.1试剂成分的直接污染上一测定试剂中含有下一测定所需要测定的物质，直接干扰下一检测的测定结果。如：AMY试剂中含有较高浓度的Ca2+；ALP（IFCC法）、CK（NAC法）、CK-MB（NAC法）、CO2（PEPC法）、AMY（EPS法）、TG等试剂中含有Mg2+；GLU（氧化酶法）、TP、ACP试剂中含有较高浓度的K+；以上试剂的交叉污染就会分别对Ca2+、Mg2+、K+（紫外酶法）的测定结果造成干扰。

1.2试剂成分参与反映上一个试剂中含有的某种试剂成分与下一反应所要测定的底物有作用，因而干扰下一反应的测定结果。如：镁测定试剂的络合剂亦能与铁结合，影响铁有铁络合剂的结合。

1.3反应进程相同上一试剂所引导的反应对下一个项目的反应进程带来间接的干扰，下一项目所测定的是前后两个项目反应的综合作用结果。如：当上一个反应产物为H2O2时则对以Trinders反应产生颜色的测定结果引起干扰。如UA对CHOL结果的影响；CHOL对CREA（酶法）测定结果的影响；GLU（氧化酶法）对CREA测定结果的影响。

1.4影响反应条件影响下一项目的反应条件如pH等，从而改变反应速率。如：直接胆红素（钒酸盐氧化法）试剂中含有表面活性剂的酒石酸盐缓冲液会影响ALT活性，对测定结果有负干扰。

2试剂间化学污染的判别

由于试剂中化学成分非常复杂，因此需要通过试验才能发现试剂交叉污染可能带来的干扰。一般可以用以下试验来加以判别：

2.1将某一试剂作为样本进行全套项目测定，观察各项生化结果的情况，进而确定发生试剂交叉污染时造成直接干扰的项目。

2.2一份样本分成两份，一份加生理盐水或其他适当的稀释液，另一份加等量的某试剂，同时测定，观察结果的变化，进而确定发生试剂交叉污染时造成直接干扰的项目。

2.3试剂交叉污染试验方法（1）交叉污染初试：假设有3个项目A，B，C，以一混合血清作为标本，按以下顺序测试：A，A，A，A，A，B，A，C，A，B，B，B，B，B，C，B，C，C，C，C，C。得到的结果分别为：A1，A2，A3，A4，A5，BA-B，AB-A，CA-C，AC-A，B1，B2，B3，B4，B5，CB-C，BC-B，C1，C2，C3，C4，C5（AB-A：表示B项目对A项目污染时A项目的测定值，其余表示类同）。以A2～A5、B2～B5、C2～C5的4次测定平均值分别作为A、B、C项目无污染时的测定值。若（AB-A/A×100%）<95%或>105%则强烈支持B试剂对A有交叉污染。(2)疑似污染确认：若上述初试验结果B对A有污染，则可进行以下试验进行确认，测定顺序为：B,A,A,A,结果为：B，A1，A2，A3。若（A1/A3×100%）<95%或>105%，则强烈支持B对A有交叉污染。A1→A3的结果可观察受B污染的程度是否逐渐减轻。

3消除试剂间化学污染的方法

3.1要求检验人员对仪器工作流程、试剂组成、测定原理要了如指掌，对试剂交叉污染的各种可能性加以考虑，合理设计程序。更换试剂时应仔细研究说明书，发现和避免可能存在的试剂交叉污染。

3.2当发现有交叉污染时，应对仪器进行保养，如更换比色杯、管道，用无水乙醇擦洗试剂针和搅拌棒，检查清洗装置及效果等。

3.3合理安排检测项目的顺序，在有交叉污染的检测项目中间插入一个或两个非污染项目。最彻底的做法则是将被干扰项目置于干扰项目之前，以消除干扰发生的可能。由于各个感厂商试剂盒原理不同，内含成分不同，故无固定的测定顺序格式，需要自己摸索。一般检测顺序有以下原则：（1）不受上一试剂的干扰；（2）不影响下一试剂测定；（3）不影响测试速度；（4）充分运用剩余试剂位开展新项目；（5）利用好仪器的功能。

3.4当合理设置测试顺序无法消除交叉污染时，可使用生化仪的试剂针、比色杯清晰程序，对试剂针、比色杯进行2次或多次清洗。用碱性清洗液及酸性清洗液冲洗试剂针可以有效地避免携带污染。

3.5选用具有抗交叉污染的试剂盒实际工作中，用全自动生化分析仪进行连续的多个项目的测定，每个反应的详细过程难以探知，特别是比色杯的交叉污染无明显的特征，因此应理论分析结合实际应用摸索出一套符合本单位的方法。

在日常工作中，我们要把各方面因素考虑比较周全，采取有效的办法,减少交叉污染，更要重视仪器的使用、维护、保养，及时发现问题、及时解决，从而从根本上保证结果的准确，为临床提供可靠的检验医学数据。