脑安片含量测定方法的改进

脑安片含量测定方法的改进

高萍李玲

哈药集团三精制药150000

【摘要】目的：探究测定脑安片成分含量方法的改进措施。方法：使用高效液相色谱技术进行成分含量的测量，对样品人参皂苷Re进行成分测定，而测定的阶段中所使用的流动相分为两种类型，一种是以乙腈作为流动相，一种是以水作为流动相，使用这两种类型的流动相来进行梯度洗脱处理，在整个过程中流动相的流速要保持在每分钟1毫升，柱温也要能保持在35摄氏度上下，检测时所使用的检测波长度确定为203纳米。结果：在对人参皂苷Re的检测中，如果这一物质处在969.84ng/μl到484.6ng/dμl之间氛围的时候，能表现出良好的线性关系，并且在实验中的回收率结果也达到了百分之99.4，能保证有良好重复性。结论：在对脑安片物质中人参皂苷Re的检测高效液相色谱技术表现良好，不仅检测结果精确度高，同时操作也较为简便、分析效率较快，能在更广的范围内进行推广。

【关键词】脑安片；含量；测定

在现代社会中，脑血栓是影响人们正常生活的常见疾病之一，脑血栓形成是脑梗死最常见的类型。是脑动脉主干或皮质支动脉粥样硬化导致血管增厚、管腔狭窄闭塞和血栓形成，引起脑局部血流减少或供血中断，脑组织缺血缺氧导致软化坏死出现局灶性神经系统症状。脑血栓形成多在安静或睡眠中发病，部分病例有短暂性脑缺血发作（TIA）前驱症状如肢体麻木无力等。

在脑血栓疾病的治疗中，脑安片是一种常用的治疗药物，这一药物在治疗中能起到活血化瘀的效果。可用于脑血栓形成急性期，恢复期气虚血瘀证候者，症见急性起病，半身不遂，口舌歪斜，舌强语蹇，偏身麻木，气短乏力，口角流涎，手足肿胀，舌暗或有瘀斑，苔薄白等。该药品能抑制大鼠体外动、静脉旁路血栓形成；有明显的抗血小板聚集作用；能抑制ADP诱导的血栓形成；能降低家兔椎动脉阻力，増加脑血流量，改善脑部的血液循环。从药品成分来看，这种药物主要是由三七药材、川芎药材、人参药材、红花药材、冰片药材所组成，在早期对于脑安片药物的测定当中，会采用薄层扫描技术，但在使用这种技术进行扫描时不仅分析结果准确度相对较低，而且还容易对药品造成污染。另外受到薄层色谱技术特点的影响，当实验人员操作不当的时候还会对实验人员的人身造成影响。因此在此次脑安片药品组成无含量测定方式探析中使用了高效液相色谱类型的处理技术，来对人参皂苷Re的含量进行测定，发现这种测量方法的效果较为突出。

1仪器以及药品

美国Aislent120型高效液相色谱仪。日本岛津Uv-2550型紫外分光光度计。HP一01溶剂过滤器（天津市恒奥科技发展有限公司）。KQ一500DE超声仪（昆山）。AG285电子分析天平（梅特勒-托利多上海有限公司）。人参皂普Re对照品（中国药品生物制品检定所，批号1604001，供含量检测用）。脑安片（哈药集团三精制药四厂，批号：1607001、1607002、1607003）。水为超纯水，乙腈为色谱纯，其它试剂为分析纯。

2溶液制备分析

2.1对照类药品分析

在对照类药品的制备阶段中，使用高精度仪器直接称取了12.12毫克的人参皂苷Re，将这一药品作为对照品进行分析，将这一药品放入到规格为25毫升的容量瓶中，同时向其中加入一定量的甲醇以配制成溶液，直至将人参皂苷Re逐渐稀释到相应的刻度线。在完成定容操作之后要充分的进行摇晃，这样就完成了对照药品的制备，对照试样的溶液浓度为484毫克每毫升。

2.2制备试验药品溶液

在药品成分探究阶段，共取用了20片脑安片药品，并将这些药品研磨为粉末状，使用精密类型的仪器称量3.5克，将这些药品放入索氏提取器中，再向其中加入一定量的乙醚，开动仪器进行回流提取，当溶液变为无色溶液的时候关闭提取器。在完成了部分的溶液提取操作之后，使用甲醇替换之前的乙醚，再次进行回流提纯，直到溶液转变为无色状态。

残渣要使用40ml的水，而后分次将溶液加入到分液漏斗中，再用正丁醇振摇分为5次进行提取，需要注意的是，正丁醇振摇必须用水进行饱和处理，提取的容量前两次为20ml，最后一次为10ml，中间两次为20ml。上述步骤完成后，再使用氨试液进行洗涤，至少三次，每次要保证氨试液为50ml，而后再将氨试液舍去。正丁醇层要使用30ml水进行清洗，而后再将水溶液舍去，提取正丁醇溶液，通过水浴的方式进行蒸干处理，残渣要加入一定量的甲醇，以便能够溶解，将溶解后的溶液放入到5ml的量瓶，直到达到既定的刻度，摇晃均匀，该溶液为供试品溶液。

2.3测定波长选择

取对照品溶液适量进行紫外扫描，人参皂苷Re在203nm处有较大吸收峰，故选择203nm为测定波长。

2.4色谱条件

测定的阶段中所使用的流动相分为两种类型，一种是以乙腈作为流动相，一种是以水作为流动相，使用这两种类型的流动相来进行梯度洗脱处理，在整个过程中流动相的流速要保持在每分钟1毫升，柱温也要能保持在35摄氏度上下，检测时所使用的检测波长度确定为203纳米。

2.5线性关系考察

精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇制成每lml含人参皂苷Re0.5mg的溶液，分别取对照品溶液2μL、4μL、6μL、8μL、10μL注人液相色谱仪，记录色谱图，测定其峰面积积分值，计算回归方程为Y=3.72651X+0735，r=0.9999。试验结果表明进样量在96.6一484.8ng/L间，与峰面积呈良好的线性关系。

2.6精密度试验

取对照品溶液10μL，连续进样6次，测得峰面积积分值的RSD=0.89%。

2.7稳定性试验

取同一供试品溶液，每隔3小时进样1次，共5次，测定结果的RSD=225%，供试品溶液在12小时内稳定性良好。

2.8重复性试验

按样品含量测定项下的方法对批号为1304002的样品（平均片重0.5321g/片）进行测定，共测定5份，平均含量为0.21mg/片，RSD=l.28%，试验结果表明该方法重现性良好。

2.9回收率试验

取已知人参皂苷Re含量的样品（批号1607002）适量，研细，精密称取3.59，共称5份，分别精密加入对照品溶液0.5ml，按供试品溶液的制备项下的方法进行提取，测定，计算回收率。试验结果表明该方法回收率良好。

3讨论

在对患者治疗的阶段，脑安片药品表现出了良好活血化瘀效果，在临床治疗方面常会使用这种药品对脑血栓病症进行治疗。而脑安片药物由于临床治疗方面使用的频率较高，因此对这一药物含量方面的测定是极其必要的，只有保证了药物中各成分含量才能保证治疗用药阶段用药的准确性。过去对脑安片进行测定的时候，其所使用的方式带有较多的缺陷，而在对脑安片物质中人参皂苷Re的检测高效液相色谱技术表现良好，在对人参皂苷Re的检测中，如果这一物质处在969.84ng/μl到484.6ng/dμl之间氛围的时候，能表现出良的线性关系，并且在实验中的回收率结果也达到了百分之99.4，能保证有良好重复性。这种分析技术不仅检测结果精确度高，同时操作也较为简便、分析效率较快。能在更广的范围内进行推广。

参考文献

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