胎盘生长因子在胎儿生长受限发病中的作用研究

胎盘生长因子在胎儿生长受限发病中的作用研究

刘贝贝

刘贝贝

河南省郑州人民医院妇产科郑州450000

摘要：目的：研究胎盘生长因子（PLGF）在胎儿生长受限（FGR）发病中的作用。方法：选取我院收治的50例剖宫产分娩的产妇，依据产妇情况将这些产妇分为胎儿生长受限组和正常妊娠组两组，每组25例。运用免疫组织化学及分子原位杂交方法检测，然后运用计算机软件定量分析组织中的表达情况。结果：FGR组产妇胎盘及蜕膜组织中的平均灰度值均明显比对照组高，说明其PLGF、PLGFmRNA表达量均明显比对照组低（P<0.05）。结论：在胎儿生长受限时，胎盘及蜕膜中的PLGF、PLGFmRNA表达量显著减少，胎儿生长受限的发病机制可能受到其一定程度的影响。

关键词：胎盘生长因子；胎儿生长受限发病；作用

本研究对我院近两年来收治的50例剖宫产分娩的产妇的临床资料进行了回顾性分析，研究了胎盘生长因子（PLGF）在胎儿生长受限发病中的作用，现报告如下。

1.资料和方法

1.1一般资料

2011年5月至2013年1月我院共收治剖宫产分娩的产妇50例，所有产妇均没有其他妊娠合并症及并发症。依据产妇情况将这些产妇分为胎儿生长受限组和正常妊娠组两组，每组25例。胎儿生长受限组（FGR组）中产妇的年龄在20~35岁之间，平均年龄为（28.5±4.1）岁；孕周在36~42周之间，平均孕周为（37.7±1.9）周，，所有产妇均符合胎儿生长受限相关诊断标准[1]。正常妊娠组中产妇的年龄在21~36岁之间，平均年龄为（29.4±4.3）岁；孕周在37~41周之间，平均孕周为（37.8±1.6）周。两组产妇各基线资料之间的差异均不显著（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

1.2.1标本采集

无菌条件下在产妇将胎盘娩出后立即从胎盘母面取下两块立方形组织块，该组织块的大小约为0.8cm×0.8cm×0.2cm，然后立即将其放置在生理盐水中，漂洗2次或3次。之后将其放置在4%的多聚甲醛中，其中一块放置环境的配置主体为蒸馏水，另一块放置环境的配置主体是1‰DEPC水，将其固定起来。同时取下两块蜕膜组织，该组织的的大小约为0.8cm×0.8cm×0.2cm，将其分别固定下来，方法同上。1h后在30%的蔗糖脱水液中放置组织，其中一块放置环境的配置主体为蒸馏水，一块放置环境的配置主体是1‰DEPC水，将其保存起来。过1夜后次日制备8μm的冰冻切片，然后将其保存起来待测，保存地点为冰箱，保存温度为-80℃[2]。

1.2.2胎盘和蜕膜组织胎盘生长因子的免疫组织化学检测

从武汉博士德生物工程有限公司购买土抗人PLGF抗体和SABC二抗试剂盒，检测过程中首先按1：100比例稀释一抗，然后严格依据试剂盒说明书[3]。

1.2.3胎盘和蜕膜组织PLGFmRNA的分子原位杂交检测

针对人PLGF靶基因的mRNA的探针序列为：

1）5’-GAGGTGGAGCACATGTTCAGCCCATCCTGTGTCTC-3’；

2）5’-TCAGAGGTGGAAGTGGATCCCTTCCAGGAAGTGTG-3’；

3）5’-AGAGAAGCAGAGACCCACAGACTGCCACCTGTGCG-3’。运用PLGFmRNA原位杂交试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司），操作过程中严格依据试剂盒说明书[4]。

1.3结果判定

在对免疫组化和原位杂交切片进行观察的过程中保证在光学显微镜下，如果镜下细胞的细胞质内沉着有棕黄色颗粒，染色明显比背景高，且具有清晰的结构，则评定为阳性细胞[5]。

1.4计算机扫描分析

在测定和定量分析200倍镜下视野中着色细胞的平均灰度值时运用MIG20002.0图像分析测量软件，依据软件设置，着色随着数值的增大而变浅，减小而变深[6]。

1.5统计学处理

用（x±s）表示数据，用t检验，运用统计学软件包SPSS21.0及Excel2000分析处理上述数据，检验水准为α=0.05。

2.结果

2.1胎盘组织中PLGF免疫组化检测结果

FGR组产妇胎盘及蜕膜组织中的平均灰度值均明显比对照组高，说明其PLGF表达量明显比对照组低（P<0.05）。具体见表1。

2.2胎盘组织中PLGFmRNA的原位杂交检测结果

FGR组产妇胎盘及蜕膜组织中的平均灰度值均明显比对照组高，说明其PLGFmRNA表达量明显比对照组低（P<0.05）。具体见表2。

3.讨论

胎儿生长受限（FGR）术围生期的一种重要并发症，极易造成围产儿死亡，比正常儿具有显著较高的死亡率，一方面会造成胎儿发育异常，另一方面也会远期对儿童期及青春期体能和智能发育造成严重的不良影响。PLGF属于血管内皮生长因子（VEGF）家族，发挥作用的机制为与其受体结合。VEGFR-1是PLGF分子的特异性受体，其溶解于液相或结合细胞表面的途径为通过膜结合状态。主要局部表达于胎盘VEGF，散在的细胞表达也在母体蜕膜组织及甲状腺上皮、黑色素瘤细胞等中存在。在胎盘滋养细胞和内皮细胞、肿瘤组织的生长及生物学功能方面，VEGF发挥着极为重要的调节作用。本研究结果表明，FGR组产妇的胎盘组织中缺乏良好的绒毛发育和绒毛血管扩张、滋养细胞层具有较少的合体细胞结节和桥，间质细胞增生。蜕膜组织中滋养细胞和螺旋小动脉的扩张并不明显，且数量很少；FGR组产妇胎盘组织中具有明显较少的PLGFmRNA表达，表达部位基本相同。蜕膜组织中具有明显较少的PLGFmRNA表达。FGR组产妇胎盘及蜕膜组织中的平均灰度值均明显比对照组高，说明其PLGF、PLGFmRNA表达量均明显比对照组低（P<0.05），充分说明了和胎儿正常生长时比，滋养细胞对PLGF合成和分泌的功能在胎儿生长受限时显著减弱，进而极大降低了PLGF水平，造成胎盘血管网络形成在绒毛内血管发育障碍的作用下不容乐观，从而对胎盘对氧及其他营养物质的转运功能造成严重的不良影响，最终引发胎儿生长受限。同时，滋养细胞浸润及增殖能力的调节及胎儿血管网络的发育也会在PLGF不良分泌的作用下受到极为不利的影响，进而严重阻碍绒毛及胎儿的正常发育，因此说胎儿生长受限发病机制中的一个重要环节就是妊娠胎盘PLGF的分泌异常，值得临床给予其广泛的关注和充分的重视[7]。

综上所述，在胎儿生长受限时，胎盘及蜕膜中的PLGF、PLGFmRNA表达量显著减少，胎儿生长受限的发病机制可能受到其一定程度的影响。

参考文献：

[1]乐杰.妇产科学[M].第6版.北京：人民卫生出版社，2008：137-139.

[2]颜耀华，李力.胎盘生长因子于胎儿生长受限时在胎盘及蜕膜组织中的表达[J].第三军医大学学报，2011，29（3）：203-205

[3]张艳萍，叶卫莲，郑巧莎，等.胎儿宫内发育迟缓患者胎盘血管内皮生长因子的变化及其意义[J].中国妇幼保健，2010，20：66

[4]张延丽，张建华，江朵.胎盘中HGF和IGF-1的表达及与妊娠期高血压疾病发病的关系[J].中国优生与遗传杂志，2012，16：25-27

[5]沈婷，张庆年．子痫前期患者胎盘组织中IGF-Ⅱ及MMP－9表达的变化[J].中国计划生育和妇产科，2011，27（6）：1012-1014．

[6]杨娟，宋雁.肿瘤坏死因子-A对胎儿生长受限胎盘Bc-l2、Bax基因表达调节的探讨[J].中国妇幼保健，2011，22：4603-4606

[7]TordjmanR，DelaireS，PlouetJ，eta1.Erythroblastsareasourceofan?giogenicfactors[J].Blood，2011，97（7）：1968-1974.