张双元1梅士娟1刘震1张晨如2措羊1米晓琳1董显花1孔令达1
(1青海大学附属医院肿瘤外科二科青海西宁810001)
(2青海大学医学院基础部青海西宁810001)
【摘要】目的:研究青海地区乳腺癌患者外周静脉血中异黏蛋白(metadherin,MTDH)的表达水平。方法:以青海大学附属医院肿瘤外科二科收治的乳腺癌患者41例和47例体检健康人群为研究对象,采取乳腺癌患者和健康人群的清晨、空腹外周静脉血各1.5ml,采用聚合酶链式反应(PolymeraseChainReactio,PCR)法进行外周血MTDH的检测。结果:乳腺癌患者MTDH基因mRNA表达(0.81±0.66),健康组MTDH基因mRNA表达(0.64±0.55),P=0.019,统计学具有差异性。结论:在青海地区,乳腺癌患者外周血中MTDHmRNA表达显著高于健康组,可能在乳腺癌的发生和疾病进展中产生重要的作用。
【关键词】MTDH;乳腺癌;外周血;健康者
【中图分类号】R737.9【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2018)14-0367-02
乳腺癌是严重影响中国女性健康的疾病之一,出现复发、转移是最主要的死亡原因,因此,控制复发和转移对降低乳腺癌患者的死亡率具有决定性作用[1]。异黏蛋白(metadherin,MTDH)最早是在感染了人免疫缺陷病毒(HIV-1)的人原始胚胎星形细胞中被克隆出来的,在多种肿瘤组织中高度表达。体内外研究也发现,MTDH基因的表达可以调控肿瘤细胞的生长、增殖等,进而影响肿瘤的进展与转移[2]。为了明确青海地区乳腺癌患者外周静脉血液中MTDH的表达状况,本文采用聚合酶链式反应(PolymeraseChainReactio,PCR)法进行了初步研究。
1.实验材料
1.1材料来源
收集2015年1月至2016年12月,青海大学附属医院肿瘤外科二科收治的41例乳腺癌患者和47例健康对照组人群的新鲜外周静脉血液各1.5ml,提取RNA。
1.2试剂
外周静脉血检测MTDH的表达用PCR法检测。TRIReagent®BD试剂、红细胞裂解液、TIANScriptRTKitcDNA第一链合成试剂盒、2×PCRMasterMix、D2000Marker、DNase/RNase-Free去离子水及其它分子生物学试剂均购自北京天根生物化学试剂公司。
1.3试验方法
外周静脉血检测MTDH的表达用PCR法检测。
1.3.1总RNA完整度的检测采用Trizol一步法提取的血液总RNA经电泳检测可见清晰的28S和18S两条rRNA条带,其中28S条带亮度两倍于18S带(图1),表明组织总RNA完整性良好。
1.3.2检测基因循环数确定
(1)GAPDH内参基因
GAPDH内参基因扩增循环数从20次增至29次,每个循环取出1管,进行电泳分析发现,当循环数进入24时,已经达到指数扩增的初中期,因此,确定24为后期实验检测循环数。
3.讨论
近年来,乳腺癌已成为威胁女性健康的主要原因之一。乳腺癌是全身性疾病,早期就有可能发生全身微转移,因此,即使一开始就对患者实行手术、放疗、化疗的综合性治疗,仍有一部分患者会发生复发和转移。分子生物学研究表明,抑癌基因的灭活、细胞信号转导通路的异常、癌基因的激活等因素,对乳腺癌发生和发展起关键作用。因此迫切需要继续在分子水平研究乳腺癌的发生、发展,寻找其他的治疗途径,进一步提高乳腺癌的治疗效果[3]。
异黏蛋白(metadherin,MTDH),又被命名为星状细胞上调基因-1(astroycyteelevatedgen-1,AEG-1)。MDTH是原癌基因,定位于染色体8q22.1,是存在于核膜、内质网及核仁内的跨膜蛋白,其功能是调节与肿瘤发生、发展相关的分子信号途径。MDTH参与恶性肿瘤的进展的主要过程,包括肿瘤侵袭和转移、抑制细胞转化、促进肿瘤血管生成、抵抗化疗药物、促进肿瘤细胞增殖和生长。MTDH在多种肿瘤细胞中过表达,且与恶性程度的增高呈正相关,如肝癌、黑色素瘤、前列腺癌等,而在良性组织或正常组织中则不表达或低表达。有研究认为,敲除MTDH基因可以提高乳腺癌细胞对多种化疗药物的敏感性,如顺铂、阿霉素和紫杉醇。因此我们可以初步判断MTDH有可能为庞大的、繁杂的肿瘤信号网络通路中的一个关键位点,是调节恶性肿瘤发生、发展的重要分子。
有关青海地区乳腺癌患者外周静脉血MTDH基因的表达状况尚未见报道。本研究采用PCR技术发现,在青海地区乳腺癌患者外周血中MTDHmRNA为0.81±0.66,健康组外周血MTDH基因mRNA表达为0.64±0.55,提示MTDH基因在青海乳腺癌患者中处于高表达状态。
综上所述,我们初步断定,MTDH在青海地区对乳腺癌的发生和疾病进展或有着重要的作用,需要进一步进行深入研究。
【参考文献】
[1]张思维,陈万青,孔灵芝,等.中国部分市县2003年恶性肿瘤发病年度报告[J].中国肿瘤,2007,16(7):503.
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[3]YooBK,EmdadL,SuZZ,etal.Astrocyteelevatedgene-1regulateshepatocellularcarcinomadevelopmenlandprogression[J].JClinIn.vest2009.119:465-469.
青海大学附属医院中青年科研基金资助项目,项目编号:ASRF-2013-07