分析阴道细菌检验应用PCR检验法和细菌培养法的临床应用价值侯红娟

分析阴道细菌检验应用PCR检验法和细菌培养法的临床应用价值侯红娟

侯红娟

侯红娟

（安岳县人民医院；四川资阳642350）

【摘要】目的探讨阴道细菌检验应用PCR检验法和细菌培养法的临床应用价值。方法选取本院收治的98例阴道炎患者，采集其阴道分泌物，分别用PCR检查法与细菌培养法开展阴道细菌学检查。结果运用细菌培养法检出阳性64例（65.31%），PCR检验法检出阳性80例（81.63%），两方法比较差异显著（P＜0.05）。结论在阴道细菌检测中，运用PCR检验法，准确率高，且快速、简便。

【关键词】阴道炎；PCR检验法；细菌培养法

阴道炎作为一种发病缓慢的常见型妇科疾病，因而难以引起重视，其发病主因为阴道细菌感染，当发病之后，会引发腹部、盆腔部位感染，严重者还会诱发移位妊娠或失去生育能力。及时诊治乃是此病症的关键所在[1]。阴道分泌物检查即为白带常规检查，乃是用于诊断阴道炎的重要辅助方法，准确率高。本文针对本院收治的阴道炎患者，分别采用PCR检验法与细菌培养法检验，比较两种方法检出率，现报道如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

选取本院于2016年7月-2017年7月收治的98例细菌性阴道炎患者，全部患者均存在异味、外阴瘙痒、白带分泌物增多等症状。且均与《妇产科学》中相关诊断标准相符[2]：（1）阴道分泌物呈面糊状、黏稠，且为灰白色；（2）分泌物有鱼腥味，活动后或者是性交时加重；（3）经分泌物湿涂片，可从中测出经线索细胞；（4）阴道分泌物pH值持续高位，即5.0~5.5。在上述项中，若符合其中3项，即可确诊。排除妊娠期孕妇者。年龄区间23~45岁，平均（34.1±3.1）岁。

1.2仪器与试剂

VITEK2compact全自动微生物鉴定与药敏分析仪，平板使用巧克力平板，哥伦比亚血平板，麦康凯平板，沙保氏葡萄糖琼脂平板（含氯霉素），均来自法国梅尼埃生物。

1.3方法

（1）细菌培养法。取阴道分泌物，于半固体琼脂培养基、斜面培养基、固体琼脂平板上，分别进行穿刺法、连续蛇形划线法及连续平行分区划线法接种，后将其置入二氧化碳培养箱中，进行培养，时间为48h，当菌落长出后，用全自动微生物鉴定仪完成细菌种类的测定。（2）PCR法。取生理盐水1000µl，与阴道分泌物混合，后离心操作，1200r/min，时间为15min。然后弃上清液，将组织裂解液加于沉淀中，放置在水浴锅中（60℃），孵育，时间为10~15min，然后将其取出，以1200r/min速度实施离心操作，时间为10min，取上清液，将其作为模板，实施PCR扩增。后加入反应体系，放置在PCR仪上，反应条件：72℃120s、37℃60s、：94℃60s，共循环25~30次，结束后，用琼脂糖凝胶电泳对结果进行观察。阴性对照与阳性对照不加模板DNA，其与均同于检测组。

1.3观察指标

（1）细菌培养阳性标准。当培养基上已经有菌落长出后，经生化鉴定，如果是目的菌落，即阳性。（2）PCR阳性标准。条带宽度＜1mm，有整齐的边缘，条带处于预期碱基范围内，在背景上未出现引物二聚体，也没有药斑，即为假阳性。

1.4统计学方法

SPSS22.0处理数据，计量资料由（±s）表示，t检验，百分比表示计数资料，X2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2.结果

运用细菌培养法检出阳性64例，阳性率为65.31%，其中，戛纳杆菌39例，棒状杆菌13例，肠球菌12例，阴性34例。PCR检验法检出阳性80例，阳性率为81.63%，其中，戛纳杆菌42例，棒状杆菌21例，肠球菌17例，阴性18例。PCR检出阳性率较细菌培养法，明显高于后者（P＜0.05）。见表1、2。

3.讨论

针对处于健康生育期的女性而言，在其阴道中通常会寄生有诸多细菌，包含条件致病菌与共生菌。有报道指出[3]，诱发女性阴道炎的主要致病菌群为肠杆菌科菌、肠球菌及阴道加德纳菌及葡萄球菌等。一般情况下，正常菌群不会直接致病，当处于妊娠期时，在内分泌的影响下，会造成女性阴道pH值的异常性升高，容易导致菌群失调，正常菌群便会转变为致病菌，并且伴随孕周的延长，阴道的整体抵抗力会持续下降，因而容易诱发各种感染。早期进行致病菌检测，对于细菌性阴道炎的治疗及预后等，均有重要的积极意义[4]。现阶段，临床中多运用的辅助诊断方法为：PCR检测法、细菌培养法等。其中，细菌培养法是最常用的一种检测方法，常被作为阴道炎检测的金标准。临床医师结合患者主诉，另进行详细的妇科查体与实验室辅助检查，对引导细菌性感染进行系统化诊断。其中，阴道分泌物检测对于诸如阴道炎等妇科疾病，具有重要的诊断意义与价值。其中，针对阴道分泌物法而言，其在诊断阴道炎等妇科疾病患者有着突出作用，检查结果的准确性与治疗与诊断密切相关。PCR技术乃是一种以DNA为基础的半保留复制的基因工程技术，对样本量有着较低要求，而且还具有很好的特异性，较高的灵敏度，可在检测当日获得结果，因而有力辅助了早期诊断、早期治疗的开展。本次研究针对本院收治的阴道炎患者，分别采用细菌培养法与PCR法检测对阴道炎中细菌分布情况进行系统化检测，最终结果得知，PCR法阳性率较细菌培养法，明显高于后者；PCR细菌分布多为阴道加德纳菌，棒状杆菌、肠球菌为其次，而细菌培养法也多为阴道加德纳菌，其次为淋球菌、肠球菌。两种法法在细菌分布检测结果方面较相似，除主菌外，其余菌分布有些许差异。

综上所述，在阴道细菌检测中，运用PCR检验法，准确率高，且快速、简便。

参考文献：

[1]宁咏梅.细菌培养法、PCR检验法及革兰染色法检验阴道细菌的对比研究[J].医学检验与临床,2016,27(1):35-37.

[2]陈瑞轩.革兰染色检验法、PCR检验法与细菌培养法在阴道细菌检查中的应用比较[J].中医临床研究,2016,8(34):126-127.

[3]刘学勇.比较PCR检验法与细菌培养法用于阴道细菌检验的效果[J].中国实用医药,2016,11(11):37-38.

[4]黄燕文,张意钗.细菌培养法、PCR检验法及革兰氏染色法进行阴道细菌检验的临床效果对比[J].现代诊断与治疗,2017,28(9):1722-1724.