健肾通络活血胶囊质量标准研究

健肾通络活血胶囊质量标准研究

夏德豪汤芳萍马灵丽

（湖南省邵阳市药品不良反应监测中心422000）

摘要：目的建立健肾通络活血胶囊的质量标准。方法对黄芪、三七应用TLC法进行定性分析；应用HPLC法测定芍药中芍药苷的含量。结果TLC图谱斑点清晰，阴性样品无干扰；芍药苷在0.1676～3.520μg范围内线性关系良好（r=1.0000，n=6），平均回收率为99.85%，RSD为1.29%（n=9）。结论该方法专属强，灵敏度高，重现性好，可用于健肾通络活血胶囊的质量控制。

关键词：健肾通络活血胶囊：芍药苷；薄层色谱法；高效液相色谱法

健肾通络活血胶囊为邵东县中医院配制的制剂，处方由三七、黄芪、芍药等多味药材组成，具有健肾通络、活血化瘀、止痛的功效。主要用于各损跌打损伤所致的血瘀气滞终胀，疼痛，促进骨折愈合等症。方中芍药为君药，用量较大，为了有效地控制制剂质量，本实验采用TLC法对制剂中的三七、黄芪行定性分析，对芍药苷含量应用高效液相色谱测定，该方法准确、简单重现性好，操作简捷，适用于该产品质量控制。

1仪器与试药

本次研究采用仪器为高效液相色谱仪检测，试药包括三七对照药材、芍药苷对照品、黄芪甲苷对照品、健肾通络活血胶囊、硅胶G、甲醇以及其他分析纯试剂。

2方法与结果

2.1三七与黄芪薄层色谱鉴别法检测方法与结果

2.1.1三七鉴别

选取10g本品分别加入30ml甲醇、2次加入乙醚进行超声处理，提取3次正丁醇水饱和溶液，合并为正丁醇溶液洗涤后，加入甲醇制的本次研究所用的试验品溶液。在健肾通络活血胶囊中获取10g三七阴性样品，并制的三七阴性样品溶液，同法获取三七对照溶液。应用照薄层色谱法试验。

2.1.2黄芪鉴别

选择鉴别过的三七供试品溶液、去黄芪的健肾通络活血胶囊10g，与三七同法制取黄芪阴性样品溶液，同时选取黄芪甲苷加入甲醇制成对照品溶液，应用照薄层色谱法试验。

2.1.3薄层色谱鉴别法

将所选取的对照药材溶液、阴性样品溶液、供试品溶液各10μL，分别点在同一硅胶G薄板上方，应用三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸作为三七样品的展开剂，放置于10℃以下12h三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液，并取出晾干后，在上方喷10%的乙醇溶液，并在105℃条件下加热，可清晰显示斑点后，在365nm紫外光灯下进行检视。三七与黄芪鉴别结果显示，供试品色谱与对照药材色谱显示相同颜色斑点在相应位置，缺少三七与黄芪阴性样品对色谱显示无干扰，如图1B显示。

2.2含量测定

2.2.1色谱条件

色谱柱选择条件为KromasilC18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相测定条件为乙腈-0.1%磷酸溶液，检测波长选择230nm，流速为1.0ml/min，柱温选择35℃，进样量为10μl。

2.2.2溶液制备

在50ml量瓶中精密放置8.38mg芍药苷对照品，加入甲醇溶解稀释后取得0.1676mg.ml-1的对照品溶液。在具塞锥形瓶中置入经研磨的20粒供试品粉末1.2g，精密加入50ml甲醇，密塞后称重，在250w，40kHz条件下超声处理30min，称重后将所减失的重量应用甲醇补足，摇匀滤过后作为供试品溶液。按照相应制备工艺方法其余处方量药材制备为缺芍药的阴性样品溶液，

2.2.3方法学考察方法

紧密量取10μL的阴性对照溶液、对照品溶液、供试品溶液，将三种溶液注入液相色谱仪中根据拟定的色谱条件开展阴性干扰试验与系统适应试验。试验结果芍药苷与其他溶液分色谱峰可达基线分离，与相邻色谱峰分离度大于1.5，根据理论塔板数计算得出芍药苷峰值均在4000以上，色谱行为良好。对照品与供试品溶液色谱相应位置上的溶液色谱峰中可检出色谱峰，在对照品溶液色谱峰相应位置，则无阴性对照品溶液的色谱峰，表明，阴性样品对本次试验测定无干扰。见图1。

3讨论

本文采用薄层色谱法鉴别三七、黄芪药材，方中芍药为君药，其主要有效成分为芍药苷，而测定芍药苷含量的HPLC法较成熟，故采用HPLC法对处方中君药芍药的主要成分芍药苷进行含量测定，有效地控制产品质量。

在芍药苷的含量测定中，本实验对供试品（20161201）溶液的提取方法采用了乙醇、70%乙醇和甲醇加热回流提取1小时，测定芍药苷含量（mg.g-1）分别为5.19、5.22、5.30；另采用乙醇、70%乙醇和甲醇超声提取（功率250W，频率50kHz）30分钟；测定芍药苷含量（mg.g-1）分别为5.20、5.25、5.30；另用甲醇分别超声提取15分钟、30分钟、60分钟；测定芍药苷含量（mg.g-1）分别为5.18、5.30、5.29；结果以甲醇为溶剂，超声提取30分钟效果较好。

该质量标准方法简便，重现性好，可作为制剂的质量控制标准。

参考文献

[1]苗明三，李振国．现代实用中药质量控制技术[M].北京：人民卫生出版社，2000：97

[2]国家药典委员会．中华人民共和国药典（一部）[M].北京：化学工业出版社，2010：97

[3]彭波，刘春龙.构建限量检查医院制剂姜红活血止痛酊中乌头碱的薄层色谱法研究[J].科技创新与应用，2017（18）：60.

[4]苏健.薄层色谱法检测抗风湿类中成药中解热镇痛非甾体抗炎药的非法添加[J].云南中医中药杂志，2014，35（5）：74.

[5]赵伟峰，车晓平，钱珊等.薄层色谱法鉴定芙蓉散中的主要成分[J].世界中医药，2014（6）：792-795.

[6]黄雄风，刘绿叶，许群等.高效液相色谱法同时测定化妆品中的11种紫外吸收剂[J].分析化学，2014（12）：1846-1850.