应用EP9-A文件对不同生化分析仪测定二氧化碳的比对试验

应用EP9-A文件对不同生化分析仪测定二氧化碳的比对试验

李林

岳阳市一人民医院检验科湖南岳阳414000

摘要：目的通过对生化室内三台全自动生化分析仪进行比对试验，探讨不同仪器间二氧化碳（CO2）检测结果是否相当。方法按照EP9-A文件[1]要求，把每一台仪器当成一个独立的检测系统，以雅培Aeroser全自动生化分析仪2机作比较仪器，雅培Aeroser全自动生化分析仪1机和雅培C16000全自动生化分析仪分别作为试验仪器，每天选取新鲜血清，分别在三台仪器上测定，并记录结果。用Excel2003软件对三台仪器的结果采取回归和相关分析，求其相关系数，及回归方程Y-bX+a，以美国雅培二氧化碳原装试剂盒说明书提供的总误差范围[2]作为可接受偏倚，判断两台仪器测定结果是否相当。结果每两台比对仪器的预期偏倚都小于可接受偏倚。结论雅培Aeroser2机分别与雅培Aeroser2机和雅培C16000的二氧化碳检测结果都相当，其偏倚都可以接受。

关键词：EP9-A文件；生化分析仪；比较试验；血清；二氧化碳

现在许多医院检验科标本量大，需要配备多台全自动生化分析仪同时检测，这些仪器的校准品、质控品、试剂也不尽相同。同一标本在不同仪器上测定其结果存在一定的差异，相同的仪器用久了，检查结果也有一定的差异。但是各个系统对同一份标本的相同检测项目检测结果应有相关性，这就要求我们对这些仪器测得的结果进行比较评价，以纠正其偏差。中山大学附属第一医院检验医学部先后购买了两台雅培Aeroser全自动生化分析仪和一台雅培16000全自动全化分析仪，依据美国国家临床检验标准化委员会（NCCLS）批准的《用患者样本进行方法学对比及偏差评估EP9-A指南文件》要求，把每一台仪器当成一个独立的检测系统，用雅培Aeroser全自动生化分析仪2机、1机和雅培C16000全自动生化分析仪检测同一标本的二氧化碳，系统地对三台仪器进行比较及偏倚评估。

1材料与方法

l.l标本

采自中山大学附属第一医院住院及门诊患者的新鲜血清40份，基本按EP9-A文件数据分布建议，<15mmol/L的标本占10%，15-20mmol/L占30%，20-30mmol/L占40%，30-40mmol/L占10%，>40mmol/L占10%。

1.2仪器和试剂

1.2.1仪器：雅培Aeroser全自动生化分析仪2机做比较仪器，雅培Aeroser全自动生化分析仪1机和雅培C16000全自动生化分析仪分布做试验仪器。

1.2.2试剂：美国雅培原装二氧化碳浓缩试剂，批号42162UQ01；校准品：德国罗氏二氧化碳校准品，批号166061-01；质控品：美国BIORAD提供的中值（批号45622）和高值质控品（批号45623）。

1.2.3参数：原厂提供的检测参数。

1.3试验条件

按照实验室制订的SOP文件对三台仪器进行每日、每周、每月维护保养，每日质控结果必须在控。

1.4试验数据

收集中山大学附属一医院住院及门诊患者当天血清，至少选取8个高、中、低浓度的标本，随机与当天待检标本同等条件下进行检测。测定采用酶法。每天随机选取8份样本（其中应包括高、中、低值），同时用3台仪器按常规样本测定的方法，测定其各项参数，每台仪器每份样本测定2次，样本排列的顺序为第1次测定1、2、3、4、5、6、7、8；第2次测定：8、7、6、5、4、3、2、l。高低组各占25%，正常组占50%。两次测定间隔2h以上，取均值为比对结果，连续测试5d。试验过程中每次用高值、正常值质控品对试验数据进行监控。

1.5做图

以雅培Aeroser2机（A2机）测定结果为X轴，以Aeroser1机（A1机）测定结果为Y轴，用MicrosoftExcel2003作XY散点图（图一）如下，并求出线性回归方程Y=0.999X-1.6521，和相关系数r=0.998，r2=0.995。

1.6试验数据离群值和X值合适范围的判断

按NCCLS的EP9-A文件要求，对比对仪器内双份测定结果的离群值、仪器间测定结果的离群值、X值取值合适范围检查。按EP9-A提供的计算方法和检查界限，用Excel进行分析，如发现有离群点，则按照EP9-A的要求处理数据。X值范围的检验，X的分布范围是否合适，可用相关系数（r）做粗略估计，如r>0.975或r>0.95，则认为X取值范围合适，直线回归统计的斜率和截距可靠；如r<0.975则说明试验方法的精密度较差或X取值范围不合适，必须分析更多的样品以扩大数据浓度分布范围。

1.7计算预期偏倚及其可信区间

按NCCLS的EP9-A文件要求和其提供的计算方法，计算出医学决定水平（Xc）处的预期偏倚及其95%可信区间。将预期偏倚的可信区间与Xc处的开接受偏倚比较，来判断每两台仪器二氧化碳检测结果的相关性。

2结果

2.1试验数据离群值和X值合适范围的判断

雅培Aeroser2机与Aeroser1机的结果都没有离群值，其r=0.998>0.975，说明X取值范围合适，直线回归统计的斜率和截距可靠。雅培Aeroser2机与C16000的结果都没有离群值，其r=0.995>0.975，说明X取值范围合适，直线回归统计的斜率和截距可靠。

2.2相关性的判断

取二氧化碳的医学决定水平值为20mmol/L，根据试验数据计算出的Xc处的预期偏倚及其95%可信区间如下，由于二氧化碳没有权威机构提供的允许误差的限值，我以雅培二氧化碳原装试剂盒提供总误差范围（15.3%），计算出Xc处的总误差范围作为可接受偏倚（见表1）。由表1可知，雅培Aeroser2机结果与Aeroser1机结果比较，在Xc处预期偏倚的可信区间包含在CO2可接受偏倚范围内，说明Aeroser1机的偏倚小于可接受偏倚，两台仪器测试二氧化碳结果相当，偏倚可以接受。雅培Aeroser2机结果与C16000结果比较，在Xc处预期偏倚的可信区间包含在CO2可接受偏倚范围内，说明C16000机的偏倚小于可接受偏倚，两台仪器测试二氧化碳结果相当，偏倚可以接受。。

3讨论

大部分的比较试验，在评价试验方法间或不同仪器间的相关性时，都以相关系数（r）作为评价标准。但是有学者认为不应使用相关系数，严重不准确的X和Y数据仍将产生高（好）的相关系数，在方法学评价上，相关系数只能评价样本数据是否在适当范围[3]。而NCCLS的EP9-A文件的重点是独立地建立偏倚的应用特点，在方法（仪器）比较试验中标准化的试验和统计方法会促使评估更能重复并反映真正的性能，评价结果的报告更可靠[1]。

根据NCCLS的EP9-A文件要求，对雅培Aeroser全自动生化分析仪2机与雅培Aeroser2机，以及雅培Aeroser全自动生化分析仪2机与雅培C16000，进行方法对比及偏倚评估，测定表明每两台仪器比较得出的相关系数均大于0.975，标本的测定范围合适。每两台仪器在所检测的二氧化碳的各个浓度对比过程中，预期偏倚范围均在可接受偏倚的范围内，说明每两台比较仪器的结果都相当，偏倚都可以接受。随着检验医学的发展，医学科技水平的不断进步，检验仪器的不断更新，检验仪器的种类也日趋增多。一个科室往往同时拥有多台仪器来对同一项目进行检测，如何了解其间的相关性，是否存在偏差，已成为检验医学重要的问题，而NCCLS文件《用患者样本进行方法学对比及偏倚评估EP9-A指导文件》给了我们一种好的工具，让检验仪器有更高的准确性和可对比性，也使检验结果报告更具科学性和临床

参考文献：

[1]KennedyJW，TholenDW，GarberCC，etal.MethodComparisonandBiasEstimationUsingPatientSamples；ApprovedGuideline-SecondEdition（EP9-A2）.Wayne，PA：TheNationalCommiteeforClinicalLaboratoryStandards，2002.

[2]AbbottClinicalChemistryCarbonDioxide，AbbottLaboratories.

[3]王治国编.临床检验质量控制技术[M].北京：人民卫生出版社.2008.P107.