MMP-9在胎盘早剥患者中的表达及其临床意义

MMP-9在胎盘早剥患者中的表达及其临床意义

冯桂芝

哈尔滨市呼兰区妇幼保健院150500

摘要：目的探讨MMP-9（基质金属蛋白酶-9）在胎盘早剥患者中的表达及临床意义。方法选择胎盘早剥者82例作为观察组，根据胎盘早剥程度分为典型组（41例）和非典型组（41例），选择同期胎盘正常者40例作为对照组，用免疫组化法检测胎盘组织中MMP-9表达部位，采用蛋白免疫印迹法检测MMP-9水平。结果阳性染色细胞在所有产妇胎盘组织中均呈现，在胎盘合体滋养细胞的细胞质及细胞核中为主要表达，观察组阳性程度弱于对照组；对照组MMP-9水平显著高于其他两组，同时不典型组MMP-9水平显著高于典型组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论MMP-9通过对滋养细胞的侵袭力产生影响，参与胎盘早剥的发生、发展，可以作为胎盘早剥的临床预测指标。

关键词：MMP-9；胎盘早剥；临床意义

所谓胎盘早剥，即妊娠中晚期最常见的阴道出血原因，该病起病急，进展迅速，诊断及治疗不及时，引起的孕期并发症较严重。由于该病无法预料，及早发现孕妇胎盘早剥是产科一直以来面临的难题[1]，笔者通过对该院收治的82例胎盘早剥者的胎盘组织进行MMP-9（基质金属蛋白酶）检测，并与同期健康胎盘进行比较分析，以期为临床早期诊断胎盘早剥提供可靠依据。

1资料与方法

1.1一般资料选择我院2013年1月至2013年12月经阴道分娩及剖宫产术后确诊为胎盘早剥者82例，作为观察组，年龄23-34岁，平均年龄29.3±2.1；平均孕龄38.6±1.2周；根据胎盘早剥程度，分为非典型组（不典型胎盘早剥）和典型组（典型胎盘早剥），每组41例；同时选择我院同期经阴道或剖宫产术分娩的正常胎盘者40例作为对照组，年龄22-35岁，平均年龄28.9±2.2岁；平均孕龄38.3±1.1周；所有产妇均为初产妇，无原发性心脏病、高血压、胎盘早剥、糖尿病史；3组在年龄、孕龄等一般资料比较，差异均无统计学意义，（P>0.05）。

1.2方法

1.2.1标本采集所有受试者均于胎盘娩出30min内，于远离脐带附着部位，避开坏死及钙化区域，取胎盘母体组织2块；1块PBS漂洗并固定；另1块放入灭酶冻存管后快速置入液氮中，过夜后，放入冰箱保存（-80℃）。

1.2.2MMP-9表达部位检测运用免疫组化（SP）法检测，试剂盒由北京中杉金桥公司提供，严格按照说明书操作；阳性判断：胎盘组织细胞的细胞质和（或）细胞核呈现棕褐色。

1.2.3MMP-9表达水平检测运用蛋白免疫印迹法检测：取胎盘组织适量于液氮中研末，加入细胞裂解液1mL离心后取上清液。MMP-9浓度采用二辛可宁酸法检测，上清液煮沸后置于-80℃冰箱。5%浓缩胶电泳，40ug总蛋白上样量并转移至聚偏二氟乙烯膜上，放入5%脱脂牛奶枸橼酸盐缓冲液中，37℃密封1.5h，加入羊抗人MMP-9抗体、兔抗人β-actin单克隆抗体，4℃孵育并过夜，TBST洗膜3次；加入兔抗羊免疫球蛋白G二抗并37℃孵育60min，TBST洗膜3次，加入显色液，暗室显影3次；运用发光成像仪检测蛋白印迹条带灰度，MMP-9水平以MMP-9与β-actin灰度值的比值为参考。

1.3统计学处理应用SPSS19.0统计软件分析，计数资料的比较采用x2检验，计量资料采用ｘ±ｓ表示，组间比较采用ｔ检验，（P<0.05）为差异有统计学意义。

2结果

2.1MMP-9表达部位阳性染色细胞在所有产妇胎盘组织均呈现，在胎盘合体滋养细胞的细胞质及细胞核中为主要表达，少量间质细胞及胎盘血管内皮细胞的细胞核内也可表达；观察组阳性程度弱于对照组。

2.2MMP-9表达水平如下表所示，对照组MMP-9表达水平为（0.93±0.06），显著高于其他两组，差异有统计学意义（P<0.05）；同时不典型组为（0.69±0.03）显著高于典型组（0.33±0.05），差异有统计学意义（P<0.05）。

3讨论胎盘早剥治疗不及时对母婴生命带来严重威胁，而处理不及时的原因是没有早期诊断造成的，由此可见早期诊断胎盘早剥的意义重大。目前临床上往往依靠B超进行诊断，漏诊误治较高，特别是胎盘附着于子宫后壁，早期症状不明显，处理的最好时机容易被错过，对母婴的伤害不可估量[2]。基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在着床及胎盘的发育中，起着非常关键的作用[3]。巨噬细胞、恶性肿瘤细胞、毛细血管内皮细胞、中性粒细胞、滋养层细胞、正常细胞均可分泌MMP-9。子宫内膜受到滋养细胞侵袭时，必须穿透母体的细胞基底膜（BM）并对细胞外基质（ECM）发生降解。妊娠时母体的绒毛组织通过分泌MMP-9对子宫内膜BM进行分解，达到植入胚泡、形成胎盘的目的。本研究显示，MMP-9在所有产妇胎盘组织均呈现，在胎盘合体滋养细胞的细胞质及细胞核中为主要表达，少量间质细胞及胎盘血管内皮细胞的细胞核内也可表达；观察组阳性程度弱于对照组，提示MMP-9与滋养细胞侵袭力有关，因此与胎盘早剥相关。对照组MMP-9水平显著高于其他两组，同时不典型组MMP-9水平显著高于典型组，差异均有统计学意义（P<0.05），提示MMP-9降低，滋养细胞的侵袭力下降，发生胎盘早剥。赵晓娟等[4]通过对60例胎盘早剥者及30例健康者的胎盘进行MMP-9检测，发现，MMP-9参与胎盘早剥的过程，典型胎盘早剥组MMP-9显著低于不典型组和健康组，其结果与本结果相似。

综上所述，MMP-9对滋养细胞的侵袭产生影响，参与胎盘早剥的发生和发展，可以作为胎盘早剥的临床预测指标。

参考文献：

[1]余美佳，李俊男，王琳，等.119例胎盘早剥的I15床分析[J].实用妇产科杂志，2011，27（2）：146-148.

[2]李亚珍.71例胎盘早剥诊治体会[J].山东医药，2009，49（4）：84-85.

[3]武军，姬明杰，孙丽君.基质金属蛋白酶-9与妊娠期高血压疾病及胎盘早剥的关系[J].河北医药，2011，33（3）：380-381.

[4]赵晓娟，宫志华，曹伟雁.基质金属蛋白酶-9在胎盘早剥中的表达及其意义[J].中华妇幼临床医学杂志，525-528.