Bax、Bcl-2在局部晚期宫颈癌中的表达及意义

Bax、Bcl-2在局部晚期宫颈癌中的表达及意义

夏红1易建华2杨丽1褚桂芬1

夏红1易建华2杨丽1褚桂芬1

(1广州市番禺区中心医院妇科广东广州511400)

(2中山大学附属第一医院黄埔院区广东广州510700)

【摘要】目的探讨Bax、Bcl-2蛋白在局部晚期宫颈癌（LACC）中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化检测47例LACC组织中化疗前Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果①47例LACC中，NACT有效率为72.3%，CR为14.9%。②化疗前，Bax及Bcl-2蛋白阳性表达率分别为:55.3%、36.2%。临床有效及无效病例中，Bax阳性表达率分别为64.7%、38.5%，差异有统计学意义（P<0.05）；Bcl-2阳性表达率分别为32.4%、46.2%，差异无统计学意义（P>0.05）。③肿瘤低分化患者中Bax阳性表达率明显低于高中分化患者，有淋巴结转移者明显低于无淋巴结转移者（P<0.05）；而在年龄、病灶大小、病理类型、临床分期方面均无明显差异（P>0.05）。Bcl-2表达在各临床病理参数方面均无明显差异（P>0.05）。结论紫杉醇+顺铂静脉化疗对LACC有效，Bax蛋白异常表达与宫颈癌的生物学行为有关，可作为预测和判定NACT疗效的指标。

【关键词】宫颈肿瘤化疗细胞凋亡Bcl-2蛋白Bax蛋白

【中图分类号】R730.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）12-0026-02

StudiesontheExpressionandClinicalSignificanceofBaxandBcl-2beforeneoadjuvantchemotherapyinLocallyadvancedcervicalcancer

XiaHong1,YiJian-hua2,YangLi1,ChuGui-Fen1,

DepartmentofObstetricsandGynecology,PanYucentralhospital,Guangzhou,511400

【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheexpressionandclinicalsignificanceofBaxandBcl-2beforeneo-adjuvantchemotherapy(NACT)inlocallyadvancedcervicalcancer(LACC).Methods47patientswithstageⅠB2-ⅡBofLACCtreatedwithneoadjuvantchemotherapy(NACT)betweenJanuary2010andDecember2013inourhospitalwereretrospectivelyanalyzed.TheexpressionsofBaxandBcl-2weredeterminedbymeansofimmunohistochemistrybeforeNACT.Results:ThetotaleffectiverateofNACTwas72.3%,includingCR14.9%.TheBaxandBcl-2expressionwas55.3%and36.2%beforeNACT.InpatientswhoreactandreactpoorlytoNACT,theexpressionofBaxwas64.7%and38.5%(p<0.05),theexpressionofBcl-2was32.4%and46.2%(p>0.05).ThestainingintensityforBaxwasrelatedtohistopathologicalgradeandlymphaticmetastasis(p<0.05),butwasnotrelatedtoage,pathologicaltypeandclinicalstage(P>0.05).ThestainingintensityforBcl-2wasnotrelatedtotheaboveclinicalandpathologicalfactor(P>0.05).ConclusionsTheNACTofpaclitaxelandcisplatinwaseffectivetoLACC.TheexpressionofBaxcouldberelatedwithbiologicalbehaviorofthetumorandconsideredastheindextopredictefficacyinNACT.

【Keywords】cervicalcarcinomachemotherapyapoptosisBcl-2Bax

局部晚期宫颈癌（Locallyadvancedcervicalcancer，LACC）是一组具有高危因素的宫颈癌，长期存活率不超过40%。研究表明[1]，细胞凋亡异常不仅和肿瘤的发生发展有密切关系，而且与肿瘤治疗直接关联。Bax、Bcl-2基因与细胞凋亡的关系最为密切，二者基因异常表达与肿瘤的增殖、凋亡、转移及化疗药物敏感性有密切的关系。本文通过检测LACC新辅助化疗(neoadjuvantchemotherapy，NACT)前Bax、Bcl-2蛋白表达情况，探讨二者表达与NACT的敏感性及临床病理因素等的相关性。

1材料与方法

1.1病例选择2010年1月至2013年12月在我院住院治疗的47例LACC的存档蜡块作为研究对象，均经手术与病理检查证实。其中年龄25-56岁，平均40.44岁。肿块最大直径：(4.0~9.0)cm，平均4.97cm；根据FIGO临床分期，Ⅰb2期26例，Ⅱa期12例，Ⅱb期9例。病理类型：鳞癌37例，腺癌10例；病理分级：高分化3例，中分化22例，低分化22例；有淋巴结转移16例，无淋巴结转移31例。

1.2治疗方案采用免疫组化S-P法。所有标本均在同一条件下进行。Bcl-2及Bax蛋白抗体试剂盒购自福州迈新有限公司，检测步骤按照说明书进行。采用双盲法阅片。Bax、bcl-2阳性定位于癌细胞胞膜和/或胞浆，呈棕黄色颗粒。按每张切片肿瘤细胞中阳性细胞的比例和着色深浅记分，行半定量分析。染色强度：无着色0分，浅黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分。阳性细胞所占比例判断：≤10%为0分、11%~30%为1分、31%~60%为2分、>61%为3分。二者相乘分为4个等级：0~1为(-)，2~4为(+)，5~8为(++)，9分以上为(+++)。(+)、(++)和(+++)的病例为阳性表达。

所有患者术前均采用1~3个周期的紫杉醇+铂类方案全身化疗。紫杉醇135mg/m2，d1，顺铂75mg/m2，d1，每三周一疗程。化疗后2~3周行广泛性子宫切除+盆腔淋巴结清扫术，全部患者均具备完整的临床病理资料。

1.3疗效评定按实体瘤疗效评价标准(RECIST1.0)进行评定。完全缓解(CR)指肿瘤完全消退，部分缓解(PR)指肿瘤体积缩小≥50%，稳定(SD)指肿瘤体积缩小<50%；进展(PD)指肿瘤增大或有新病灶出现。CR+PR为化疗有效，SD+PD为无效。

1.4统计分析采用SPSS13.0进行统计分析，蛋白表达、化疗有效率与临床病理指标关系等采用卡方检验及Spearman等级相关分析；以P＜0.05为有统计学意义。

2结果

2.1NACT疗效观察47例LACC中，CR7例(14.9%)，PR27例（57.4%)，SD13例(27.7%)，PD0例。总有效率为(CR+PR）72.3%（34/47)。

2.2宫颈癌化疗前Bax、Bcl-2蛋白表达的情况化疗前，47例LACC组织中Bax蛋白表达（-）率为44.7%（21/47)。阳性表达率为55.3%。（26/47），其中表达（+）率29.8%（14/47)，(++）率14.9%（7/47)，(+++)率10.6%（5/47)；化疗前Bcl-2蛋白表达（-）率为63.8%（30/47）。阳性表达率为36.2%（17/47），其中表达（+）率41.2%（7/17),(++)率29.4%（5/17),(+++）率29.4%（5/17）。见图1－图8。

2.3宫颈癌Bax、Bcl-2蛋白表达与NACT疗效的关系

化疗前，临床有效及无效病例中Bax阳性表达率分别为64.7%(22/34)、38.5%(4/13)，差异有统计学意义（P<0.05)。Bcl-2在临床有效及无效病例中阳性表达率分别为32.4%（11/34）、46.2%（6/13），差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

表1宫颈化疗前Bax、Bcl-2蛋白表达与NACT临床疗效关系

3讨论

新辅助化疗(NACT)是指先行化疗再行手术或放疗，其作用可以缩小肿瘤体积，杀灭亚临床病灶，减少转移和局部复发。目前国内外已进行了大量关于NACT的研究，一致认为对LACC患者先行新辅助化疗后再行根治性手术，己成为目前优先考虑的治疗模式[2]。目前宫颈癌术前化疗的常用方案是紫杉类和铂类药物的静脉联合化疗，诸多学者[3,4]报道该方案全身化的有效率在54%-83%之间，CR率在9%~18%之间，最高可达26.7%。本文47例LACC患者NACT总有效率为72.3%（34/47），其中CR占14.9%（7/47）。与上述文献符合。

但并非对所有的患者均对NACT有效，若对化疗无效的患者实施NACT，将会延误治疗时机。所以，如何预测NACT的敏感性至关重要。研究发现肿瘤化疗实际上是一种细胞介导下的抗肿瘤效应，即不同作用机理的抗癌药物作用的最终结果是凋亡。检测细胞凋亡和肿瘤耐药的表达水平，可能有助于预测NACT的疗效和判断其预后。

Bax、Bcl-2基因是最受关注的细胞凋亡调控基因。研究表明[5-7]，Bcl-2和Bax基因异常表达与肿瘤的增殖、凋亡、转移有关，与化疗药物敏感性也有密切的关系。Jung-Min等[8]报道子宫颈癌动脉灌注化疗前Bax高表达者化疗效果优于低表达者，Bcl-2差异无统计学意义。王颖新Marx等[9]发现卵巢癌组织中Bax蛋白阳性率为47%，Bax阳性者的预后差于Bax阴性者；Bcl-2蛋白阳性率为30%，Bcl-2阳性表达者的预后优于Bcl-2阴性者。本文结果表明，化疗前，47例LACC组织中Bax及Bcl-2蛋白阳性表达率分别为:55.3%、36.2%。临床有效及无效病例中，Bax阳性表达率分别为64.7%、38.5%，差异有统计学意义（P<0.05）。显然，Bax蛋白阳性表达水平在有效组中明显高于无效组，提示NACT的抗癌效应和上调Bax蛋白表达有关，NACT前检测Bax蛋白可作为预测和判定化疗疗效的指标。而临床有效及无效病例中Bcl-2阳性表达率分别为32.4%、46.2%，差异无统计学意义（P>0.05）。推测宫颈癌组织中Bcl-2蛋白表达水平不能预测患者对化疗的反应性，不宜作为预测NACT疗效的指标。

研究发现[10-12]在乳腺癌、肺癌、胃癌、直肠癌等多种肿瘤中，Bcl-2与肿瘤的分级、分期有关。本组LACC组织中Bcl-2表达情况在年龄、肿瘤大小、病理类型、病理分级、临床分期及淋巴结转移方面均无明显差异（P>0.05）。提示Bcl-2蛋白异常表达可能与宫颈癌的生物学行为无关，不能作为宫颈癌预后判断的一项生物学指标。关于Bax与肿瘤生物学行为关系的报道，则是不同组织来源的肿瘤结论不同[3]。邹磊等[14]显示食管癌中Bax蛋白高表达，其表达强度随着肿瘤分化程度的下降而减低。杨莉等[15]认为Bax蛋白表达在不同的大肠癌组织学类型、分化程度、Dukes’分期及淋巴结是否转移中均无差异。本文47例LACC组织中，化疗前Bax蛋白阳性表达率为:55.3%。肿瘤低分化的LACC患者Bax阳性表达率明显低于高中分化患者（P<0.05），淋巴结转移患者Bax阳性表达率明显低于无淋巴结转移患者（P<0.05），而在年龄、病灶大小、病理类型、临床分期方面均无明显差异（P>0.05）。该结果提示宫颈癌Bax蛋白阳性表达随组织分化程度降低而降低，Bax蛋白阴性表达肺癌患者较Bax蛋白阳性表达的宫颈癌患者更易发生淋巴结转移。推测Bax蛋白异常表达与宫颈癌的生物学行为有关，有可能是宫颈癌预后判断的一项生物学指标。

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