乙型肝炎病毒与HBV-DNA定量的相关性分析

乙型肝炎病毒与HBV-DNA定量的相关性分析

于永歌佟静陈莹洁李卉

于永歌佟静陈莹洁李卉

（大连市第五人民医院检验科辽宁大连116021）

【摘要】目的探讨乙肝患者血清标志物定性与HBV-DNA定量的相关性。方法用ELISA法对300例乙型肝炎患者进行乙肝病毒血清学标志物检测盒HBV-DNA定量检测。结果不同的两对半模式HBV-DNA的平均拷贝量不通过，阳性率也不同，①③⑤模式HBV-DNA平均拷贝量是4.15×107copies∕ml，阳性率是98.44%①④⑤模式HBV-DNA平均拷贝量是3.71×106copies∕ml，阳性率是32.23%，两者有显著差异（P＜0.05）。结论HbeAg阳性的标本与其HBV-DNA的检测阳性结果呈正相关。两对半与HBV-DNA同时检测科提高结果的准确性，更好的为临床提供参考。

【关键词】乙型肝炎病毒定性HBV-DNA定量

【中图分类号】R512.6+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2014）20-0186-02

乙肝病毒感染是创建感染性疾病之一，目前，国内临床实验室检测乙肝床用的方法是酶联免疫法（enzym-linkedimmunosorbentassay，ELISA），该方法操作简单，价格低廉，在临床中得到广泛应用。

乙肝病毒感染是常见感染性疾病之一，目前，国内临床实验室检查乙肝常用的方法是酶联免疫法（enzym-linkedimmunosorbentassay，ELISA），该方法操作简单，价格低廉，在临床中得到广泛应用[1]。由于方法学本身的局限性，对HBV感染复制状况难以判断。血清HBV-DNA荧光定量PCR测定可以直接反映血液中病毒复制状态，具有很多临床应用价值[2]。本实验采用荧光定量PCR法对300例乙肝患者血清进行检测如下：

1.资料与方法

1.1标本：收集住院及门诊乙肝患者血清300例。

1.2仪器和试剂

ELISA法选用上海实业科华公司生产的乙肝五项酶标试剂盒和KHBST-360酶标仪。HBV-DNA定量检测采用荧光定量PCR（FQ-PCR）法，试剂由上海科华生物技术有限公司提供。

1.3方法

严格按照操作流程和试剂盒说明进行实验。

1.4统计学方法

检测结果的数据采用SPSS13.0统计软件，运用X2检验，P＜0.05差异有统计学意义。

2.结果

对300例乙肝患者进行ELISA定性检测有6种模式（①③⑤、①④⑤、①⑤、①④、①③、①）HBV-DNA检测结果见表1。

表1ELISA法检测HBVm和FQ-PCR法检测HBV-DNA结果

3.讨论

急慢性肝炎患者中由于乙性肝炎病毒引起的占大多数病例，是导致肝脏损伤的主要致病因子，我国约2亿人口感染乙型肝炎病毒，对人民群众身体健康造成重大的影响［3］。ELISA法是被临床广泛应用的方法检测乙型肝炎病毒，由于其检测方法学本身灵敏度较低，在疾病活动早期，乙肝血清标志物呈微量变化，更无法测得HBV复制水平。检测HBV-DNA是判断乙肝病毒有无复制的“金标准”，在技术上FQ-PCR采用荧光标记和闭管检测，克服了常规PCR扩增产物污染所致假阳性的缺点，使结果具有极高的特异性和敏感性［4］。结果显示①③⑤模式和①③模式HBV-DNA阳性率明显高于其它模式，HBeAg阳性组HBV-DNA检出率明显高于HBeAg阴性组，得出HBeAg阳性与HBV-DNA拷贝量具有正相关性。血清的HBeAg检测可以作为乙肝病毒的观察指标，而在实际工作中，也有不产生HBeAg的乙型肝炎病毒突变，或者经过抗病毒药物治疗后，影响标本HBeAg的检测。因此不能单靠HBVm来确定有无HBV复制，需要结合HBV-DNA检测结果来诊断HBV是否感染。尤其是在输血，器官移植等状况下，因为HBV特异性抗体的产生有“窗口期”，应对HBeAg阴性的血液进一步进行检测，保证无HBV感染。综上所述，HBeAg阳性HBV-DNA复制水平最高，HBVm阴性并不代表HBV未感染，HBV-DNA测定可以直接反映血清病毒复制状态，不能完全反映HBV病毒复制静息期HBV病毒的模式状态，如果HBV-DNA阴性，也不能说明HBV治愈。联合“两对半”各项指标更能客观反映体内HBV病毒状态，提高检出率，避免漏诊，同时更好的为临床对HBV感染，复制，传染性判定及治疗提供依据。

参考文献

[1]鲍俊杰，杨红玲，郭彩娇等.酶联免疫吸附测定法与化学发光微粒测广州地区儿童HbsAb结果分析[J].中西医结合肝病杂志，2009,19（1）：44-46.

[2]杨娜.乙肝两对半定量分析的临床意义[J].中国现代药物应用，2012.6（4）：52-53.

[3]刘社琴.乙肝血清标志物与HBV-DNA定量检测结果分析[J].中国医药导报，2011,8（4）：171-172.

[4]赖宏芳，付晓野，董玉林等.荧光探针定量PCR检测HBV-DNA[J].上海医学检验杂志.2000,15（1）：18-19.