STAT3表达水平与晚期非小细胞肺癌患者化疗疗效的相关性研究

STAT3表达水平与晚期非小细胞肺癌患者化疗疗效的相关性研究

孙绍娟唐凤鸣舒运兵

孙绍娟唐凤鸣舒运兵（四川省宜宾市第一人民医院呼吸内科四川宜宾644000）

【中图分类号】R734【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）19-0011-03

【摘要】目的研究Ⅲb、1V期非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织中STAT3基因蛋白表达水平与非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂辅助化疗之间的相关性及与铂类药物在NSCLC辅助化疗中发生耐药的关系。方法符合入选条件的患者104例，均为Ⅲb、IV期患者,所有患者经皮肺穿刺或经纤支镜活检病理证实为NSCLC，其中52例患者分别给予4～6个周期的含铂类方案化疗(吉西他滨／顺铂方案)，52例未化疗患者作为对照组，应用免疫组化方法对104例NSCLC患者手术切除标本石蜡包埋组织切片STAT3基因蛋白表达进行了测定，分析STAT3基因蛋白表达与NSCLC患者铂类药物辅助化疗之间的生存情况的关系。结果STAT3基因蛋白表达阳性NSCLC患者，应用顺铂辅助化疗，其生存时间明显低于未用顺铂辅助化疗者，差异有统计学意义(P<0.01)；STAT3基因蛋白表达阴性NSCLC患者，应用顺铂辅助化疗其生存时间与未用顺铂辅助化疗者的生存时间无统计学意义(P>0.05)，但前者有优于后者的趋势。结论①STAT3基因蛋白表达水平是评估晚期NSCLC患者应用铂类药物化疗疗效的一个重要因素；②STAT3基因蛋白表达可能参与铂类药物耐药机制。

【关键词】非小细胞肺癌信号转导与转录激活因子3抗肿瘤联合化疗方案

原发性支气管肺癌中75%～80%为非小细胞肺癌。目前临床上对于NSCLC化疗方案的选择主观性较多，因此迫切需要一些可靠的技术手段客观性地选择NSCLC化疗方案，以提高化疗药物的敏感性，延长患者生存时间。根据不同药物的分子标记物表达水平来选取不同的化疗药物组合制定的个体化疗方案，将提高化疗敏感性和生存期。

为此，为进一步明确STAT3基因蛋白表达与NSCLC顺铂辅助化疗之间的关系,本研究利用免疫组化法检测了Ⅲ、Ⅳ期NSCLC肿瘤活检组织的STAT3蛋白表达，并对患者生存状况进行了分析，从而为NSCLC辅助化疗的用药选择提供有意义的指导。为临床上NSCLC患者化疗选择铂类方案提供理论依据，为肺癌的个体化化疗提供一分子靶向指标。

1资料与方法

1.1病例选择回访性收集：所有病例来自于宜宾市第一人民医院呼吸内科和胸外科及肿瘤科2006年1月至2008年12月符合入选条件的患者104例，所有患者经皮肺穿刺或经纤支镜活检病理证实为NSCLC。并行胸部CT检查，根据NSCLC分期标准(TNM)对患者进行临床分期。入选的病例患者均为Ⅲb、1V期，并记录性别、年龄、吸烟指数、KPS评分、病理类型及临床分期等项目。所有的化疗患者均行同一化疗方案，给予4～6个周期的化疗。收集患者化疗前的病理切片。标本组织均经10％福尔马林固定，常规石蜡包埋。并取22例正常肺组织作对照。未化疗组作为对照组，进行病案追踪。

1.2化疗方法入选患者化疗前签署化疗同意书，给予吉西他滨/顺铂(GP)方案治疗。GP：吉西他滨1000mg/m2，静脉滴注，d1，d8。顺铂80mg/m2，d1，每3周1次。一般给予4～6个周期的化疗。对不能耐受或不愿配合继续治疗的患者(其化疗周期<4周)给予剔除。

1.3疗效评价标准以患者化疗开始的日期进行统计治疗结束后复查胸部CT，对疗效进行评估。具体评价为中位生存时间，对患者进行定期(每月1次)电话或来院随访，直到患者死亡及失访。或由病案室查找患者病历获知。

1.4免疫组化染色

1.4.1试剂鼠抗人单克隆抗体ERCC1购于SantaCruz公司。PV9000检测试剂盒和DAB显色试剂盒、PBS、EDTA、枸橼酸，购于北京中山金桥生物技术有限公司。

1.4.2染色方法取存档蜡块4μm连续切片，常规Envision免疫组化染色。组织抗原进行热修复，STAT3用枸橼酸修复，并用内源性过氧化物酶阻断剂(试剂A)阻断内源性过氧化物酶。一抗鼠抗人STAT3单克隆抗体的稀释度为1∶100，在湿盒中室温下(20～25℃)孵育150min。二抗辣根酶标记羊抗鼠IgG多聚合体，室温下孵育30min。DAB显色液，显微镜下观察3-5min，阳性结果为棕黄色。以试剂盒中提供的阳性标本作为阳性对照，以1×PBS替代一抗作为阴性对照。

1.5统计学分析采用SPSS13.0软件进行统计分析，2个和3个样本率的比较采用x2检验，生存分析采用Kaplan．Meier方法。以P<0．05为差异有统计学意义。

2结果

2.1患者特征共104例患者参加本实验，其中男80例，女24例，平均年龄64岁。TNM分期：Ⅲb期为44例，Ⅳ期为60例。组织学类型：腺癌64例，鳞癌40例。KPS评分：≥90分22例，80～89分62例，70～79分20例。

2.2以胞质或胞核内出现棕黄色颗粒为阳性细胞，按每张切片的阳性细胞比例及着色深浅划分－、+、++、+++四级。

①阴性（－）：基本不着色或着色细胞少于5％。

②弱阳性（+）：着色浅淡或着色细胞占5％～25％。

③中度阳性（++）：着色适中或着色细胞占26％～50％。

④强阳性（+++）：着色深或着色细胞大于50％。

将阴性与弱阳性归为低表达组，将中度阳性与强阳性归为高表达组。

两组间性别、年龄、组织学类型、KPS评分差异均无显著性。

2.3NSCLC患者顺铂辅助化疗与生存时间的相关性Log-ranktest时序检验结果表明，STAT3基因蛋白表达阴性的NSCLC患者，应用顺铂辅助化疗组与未行辅助化疗组之间生存时间差异无统计学意义。STAT3基因蛋白表达阳性的NSCLC患者，应用顺铂辅助化疗组的生存时间明显短于未行辅助化疗组，两组间差异有统计学意义，化疗组中，STAT3基因蛋白表达阴性组与STAT3基因蛋白表达阳性组之间生存时间差异有统计学意义。

3讨论

本研究从蛋白质水平分析了STAT3基因蛋白表达以及是否接受顺铂化疗条件下NSCLC患者的生存情况，生存分析显示，STAT3阴性NSCLC患者，应用顺铂辅助化疗中位生存期与未行顺铂辅助化疗中位生存期无统计学意义。但由生存时间数据可以看出，已经出现了STAT3阴性NSCLC患者应用顺铂辅助化疗的生存时间要长于未用顺铂化疗的趋势，而未达明显统计学意义的原因可能与病例数较少有关；而STAT3基因蛋白表达阳性NSCLC患者应用顺铂辅助化疗，中位生存期仅25个月，其生存时间明显低于未用顺铂辅助化疗者，差异有统计学意义。据上述结果，本研究认为，STAT3基因蛋白表达阴性NSCLC患者应用顺铂辅助化疗可能获得生存受益,STAT3基因蛋白表达阳性可能提示存在着铂类药物耐药，STAT3基因蛋白表达可能成为NSCLC患者是否应用顺铂辅助化疗的指标之一。

本研究结果显示，对于以顺铂为基础方案的Ⅲb、IV期NSCLC患者，STAT3表达增高者与表达降低者其化疗敏感性指标中位生存时间差异存在着显著性,表明STAT3高水平表达与顺铂耐药相关，而低水平表达与化疗疗效增加、生存时间延长相关。本研究结果也初步表明NSCLC个体化治疗分子预测指标的可行性，本研究结果为临床上制定晚期NSCLC个体化化疗方案，尤其是避免不必要的含铂类方案的化疗提供了理论依据。

参考文献

[1]BowmanT，GarciaR，TurksonJ．STATsinoncogenesis[J]．Oncogene，2000，19(21)：2474-2488．

[2]NiuG，BowmanT，HuangM，eta1．RolesofactivatedSrcandSTAT3signalinginmelanomatumorcellgrowth[J]．Oncogene，2002，21(46)：7001-7010．