化学发光法与放射免疫法检测血清甲状腺自身抗体的临床比较

(整期优先)网络出版时间:2011-12-22
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化学发光法与放射免疫法检测血清甲状腺自身抗体的临床比较

蔡新梁鑫魏源华

蔡新梁鑫魏源华(江苏省中医院检验科210029)

【中图分类号】R881【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2011)19-0034-02

【摘要】目的用微粒子化学发光法检测甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)和用放射免疫法检测甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)、甲状腺微粒体抗体(TM-Ab),探讨这两种方法检测甲状腺自身抗体的临床差异,为临床提供参考。方法取正常人和桥本氏甲状腺炎患者各32例,分别用化学发光法和放射免疫法测定正常人组和患者组的血清TPO-Ab,TG-Ab和TM-Ab,分析其统计学差异。结果无论是微粒子化学发光法还是放射免疫法,桥本氏甲状腺炎的患者的阳性率均明显高于健康体检的正常人,化学发光法的特异性优于放射免疫法,但是敏感性不及放射免疫法。结论化学发光法检测甲状腺自身抗体的综合性能优于放射免疫法。

【关键词】桥本氏甲状腺炎TPO-AbTG-AbTM-Ab化学发光法放射免疫法

甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)是主要的甲状腺组织的自身抗体,在桥本甲状腺炎(HT)等甲状腺疾病中有较高的表达。甲状腺微粒体抗体(TM-Ab)亦属抗甲状腺细胞内多种组织成分的抗体,属IgG,能与补体结合,由微粒体刺激产生。已证实TPO是甲状腺微粒体抗原的主要成分,TM-Ab的主要成分就是TPO-Ab。有文献报道,血清TPO-Ab的测定较TM-Ab和TG-Ab的敏感性高[1]。TPO-Ab与桥本甲状腺炎的发生和发展密切相关。目前检测这些自身抗体的实验室常用方法主要是化学发光法和放射免疫法。为了解这两种方法在检测自身抗体对临床作用上的差异,本实验收集了64例标本,分为桥本氏甲状腺炎病组和健康成人组,分别用此两种方法检测了两组标本的甲状腺自身抗体。因化学发光法无TM-Ab的检测,故改用TPO替代TM-Ab的检测。

1材料和方法

1.1标本来源32例HT患者为来我院就诊,并确诊的患者,其中男性7例,女性25例,年龄21~58岁。正常对照组为健康体检且排除甲状腺疾病的人群,男性16例,女性16例,年龄24~62岁。

1.2仪器与试剂全自动化学发光仪(ARCHITECTi2000,美国雅培公司),智能放免γ-测量仪(SN_695B型,上海核所日环光电仪器有限公司)。试剂分别为雅培公司配套TG-Ab和TPO-Ab试剂盒和北京科美生物技术有限公司生产的TM-Ab、TG-Ab放射免疫分析试剂盒。

1.3实验方法准备正常人和桥本氏甲状腺炎病人血清标本各32例,分别用化学发光法检测两组的TPO-Ab与TG-Ab,用放射免疫法检测两组TG-Ab、TM-Ab。

1.4阳性结果判断按照试剂说明书的标准判断,即化学发光法TG-Ab的结果≥34IU/ml为阳性,TPO-Ab≥35IU/ml为阳性。放射免疫法TG结合率≥30%为阳性,TM结合率≥15%为阳性。TG/TM结合率=(样品管CPM-零血清管CPM)/(T-本底CPM)。以正常人的TPO-Ab,TG-Ab和TM-Ab均为正常值,而HT患者的TPO-Ab,TG-Ab和TM-Ab均异常为金标准。

2结果

2.1微粒子化学发光法和放射免疫法的检测数据

化学发光法检测两组TG-Ab的敏感性为75.00%(24/32),特异性为93.75%(29/32);放免法检测两组TG-Ab的敏感性为84.38%(27/32),特异性为81.25%(26/32);化学发光法检测两组TPO-Ab的敏感性为84.38%(26/32),特异性为96.88%(31/32);放免法检测两组TM-Ab的敏感性为93.75%(31/32),特异性为84.38%(27/32)。

2.2两种检测方法的统计学分析

表1化学发光法检测TG-Ab、TPO-Ab与放免法检测TG-Ab、TM-Ab的分析表

约登指数(Youdenindex):是评价筛查试验真实性的方法,它表示筛检方法发现真正的患者与非患者的总能力。其值为灵敏度与特异度之和减去1。指数越大说明筛查实验的效果越好,真实性越大。

化学发光法检测TPO-Ab的约登指数最高,为0.82,即其临床检测价值最高。对于HT的诊断,TG-Ab检测的价值不如TPO-Ab和TM-Ab。放射免疫法检测TM-Ab的敏感性最高,达到93.75%;化学发光法检测TPO-Ab的特异性最高,达到96.88%。化学发光法的敏感性均低于放射免疫法(75.00%<84.38%,84.38%<93.75%),而特异性均高于放射免疫法(93.75%>81.25%,96.88%>84.38%),约登指数提示化学发光法的综合性能优于放射免疫法。

3讨论

TG-Ab是甲状腺滤泡内的甲状腺球蛋白进入血液后产生的抗体,主要对甲状腺滤泡上皮产生破坏作用,TPO-Ab由细胞向外周泄漏而产生抗体,与靶细胞甲状腺发生作用使甲状腺组织受到破坏[2]。甲状腺过氧化物酶(TPO)是甲状腺激素合成过程的关键酶,参与碘氨化,酪氨酸残基碘化及碘化酪氨酸的耦联。近年来通过免疫学、生物化学及基因重组研究,TPO-Ab属IgG类的免疫球蛋白,其肽链为590~675的氨基酸残基,完整的TPO-Ab分子上可与自身抗体作用的抗原性区域约有6个。一般认为,本病的发病机制是抗原特异性T淋巴细胞减少使细胞毒性T细胞攻击破坏滤泡细胞,而且Th细胞亦参与B细胞形成自身抗体,更加破坏滤泡细胞[3]。桥本氏甲状腺炎为慢性淋巴细胞性甲状腺炎两种类型中的其中一型,为自身免疫性甲状腺疾病,起病缓慢,甲状腺肿大质地较硬,桥本氏甲状腺炎的典型病理表现为甲状腺体内有弥漫性淋巴细胞浸润,浆细胞浸润和纤维化,大多数病例有淋巴滤泡形成。有研究证明自身抗体在桥本氏甲状腺炎发病中起重要作用,血清TG-Ab和TPO-Ab呈双阳性反应,尤其是TPO-Ab高于50%时诊断价值较大。

放射免疫分析技术是一较为传统的检测技术,但其存在检测过程中容易产生放射性污染、检测结果受放射性元素的衰减影响、检测过程多以及手工操作精确度相对较低等诸多缺点。化学发光法是新兴的免疫检测技术,是目前最先进的标记免疫测定技术之一,因为其采用高度特异性的抗体结合抗原,因而具有高灵敏度、高精确度的特点。

本实验的研究发现对于HT的诊断意义在于:第一,TPO-Ab检测的价值最高,这与李清茹[1]的报道一致。第二,TG-Ab的诊断HT的价值不如TPO-Ab或者TM-Ab。第三,放射免疫法的敏感性高于化学发光法,但是其特异性却低于化学发光法,而且综合性能低于化学发光法。化学发光法的综合性能高于放射免疫法,可重复性好,操作流程相对简便,无放射性元素污染,因而更适合临床检测甲状腺自身抗体的检测应用。放射免疫法则由于其检测成本较低,因而更适合于基层实验室或体检时采用。

参考文献

[1]李清茹,吴翼伟等.42例甲状腺良性疾病患者的TG-AB,TM-AB和TPO-AB血清比较分析,中国血液流变学杂志,2004;14(4)534-536.

[2]许毓霞.青海大学附属医院核医学科,810001桥本氏甲状腺炎诊断中血清TG-Ab、TM-Ab测定的临床意义现代预防医学2008年第35卷第11期2192页

[3]陈洁华,苏允荣,徐韶珍.桥本甲状腺炎64例早期核医学检测分析[J].白求恩军医学报,2004,6(2):89-90.

[4]范旭.血标本采集方法对放射免疫分析甲状腺激素的影响[J].中国医药导报,2010,7(30):68-70.

[5]方光辉.放射免疫分析与电化学发光法检测血清HCG效果分析[J].中国现代医生,2010,48(27):74-85.