结肠癌中Bmi-1、p21和p27阳性表达水平及临床意义

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结肠癌中Bmi-1、p21和p27阳性表达水平及临床意义

石峰王亚东梁廷明

石峰王亚东梁廷明阜宁县人民医院妇产科江苏阜宁224400【中图分类号】R6【文献标识码】B【文章编号】1008-6315(2015)12-0102-01

结肠癌位居消化恶性肿瘤发病率第3位[1],好发于直肠和乙状结肠交界处,男性多发,其病因尚未定论,但是肿瘤相关因子表达水平的异常可能与结肠癌的发生、发展关系密切[2].其中Bmi-1是多疏基因家族的成员之一,其在白血病、肝癌等组织中发现表达水平异常[3].而p21和p27均为周期素依赖激酶抑制因子(Cyclin-dependentkinasesinhibitor,CDKI)成员,其功能抑制周期素依赖性激酶(Cyclin-dependentkinases,CDK)的活性,抑制细胞的增殖[4,5].本研究通过联合检测结肠癌中Bmi-1、p21和p27表达水平并检测其相关性,探讨上述3种基因在结肠癌的发生和发展中的作用.

1资料和方法

1.1病例资料2010年1月至2014年12月,在我院进行结肠癌手术治疗的患者80例,其中男56例,女24例,均经病理检查确诊,并均在术中留取瘤旁(距肿瘤2cm以上)结肠上皮组织作为对照.

1.2免疫组化方法均采用4%多聚甲醛固定,常规脱水包埋,切片厚度为5mm,常规脱蜡水化,3%过氧化氢孵育去除内源性过氧化物酶,微波修复抗原,一抗孵育过夜(一抗分别为鼠抗人Bmi-1单克隆抗体、鼠抗人p21单克隆抗体和鼠抗人p27单克隆抗体购自美国Abcam公司),PBS清洗后使用二抗(二抗均为羊抗兔抗体,均购自美国SantaCurz公司)孵育1h,PBS清洗后使用Elite-ABC(英国Vector公司生产)孵育30min,清洗后使用DAB染色,清洗后苏木素复染30sec,常规脱水、透明,中性树胶封片.1.3结果判断光镜下观察标本的着色程度.Bmi-1、p21和p27蛋白阳性表现均为细胞核和胞浆内出现棕黄色颗粒.随机选择5个高倍视野(400×)计数肿瘤细胞总数和阳性细胞数,先按按阳性细胞百分比将0%、1-25%、26-50%、51-75%、76-100%分别计为0、1、2、3、4分;然后同时根据染色程度的不同进行打分,0分为无色,,1分为浅黄色.2分为棕黄色,3分为棕褐色.将上述两种计分方法得分相乘,≤4分为-,5-8分为+;9-12分为++,13-16分为+++.以++和+++计为阳性表达.

1.4统计学分析采用SPSS18.0统计学软件进行统计分析处理,率的比较采用c2检验,相关性采用Spearman相关分析,P<0.05为差异有统计学意义.

2结果

2.1Bmi-1、p21和p27在结肠癌组织和正常组织中的表达水平比较在结肠癌组织中,Bmi-1阳性率为81.25%,明显高于正常组织,差异具有统计学意义(c2=44.55,P<0.05);p21阳性表达率为28.75%,明显低于正常组织(c2=30.63,P<0.05);p23讨论肿瘤发生、发展时,与恶性肿瘤相关细胞因子的表达水平较正常组织发生明显改变,导致其相关的细胞周期发生明显的异常,引起细胞增殖的异常,导致肿瘤的发生[6].本次研究结果发现,Bmi-1在结肠癌组织中的阳性表达率明显升高,而p21和p27蛋白在结肠癌组织的阳性表达率明显降低,Bmi-1在Ducks分期较晚的C、D期和临床分期为III期的患者的阳性表达率明显的高于Ducks分期为A,B期和临床分期为I,II期的患者.而p21和p27的阳性表达率情况则正好和Bmi-1相反.研究结果表明,Bmi-1、p21和p27蛋白的阳性表达水平可以作为判断结肠癌预后的重要标志.我们的研究结果还发现,Bmi-1在结肠癌的阳性表达和p21以及p27呈负相关.动物实验表明,Bmi-1敲除小鼠的p21、p27在皮肤、骨骼等多个器官中的蛋白表达水平均明显上调[11-13],表明Bmi-1基因对p21、p27的蛋白表达水平具有一定的调控作用,和我们的研究结构基本一致.我们的研究结果表明,Bmi-1蛋白在结肠癌组织的阳性表达水平明显增加,p21和p27蛋白在结肠癌组织的阳性表达水平明显降低,并且Bmi-1的表达水平和p21以及p27呈负相关,表明Bmi-1蛋白在结肠癌组织过度表达,其可能对p21以及p27蛋白的负向调控在结肠癌的发生及发展中发挥重要作用,可以作为结肠癌预后判断的参考.

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