不同产地、不同采收时期大青叶中吲哚苷含量的比较

【摘要】 目的 对比不同产地及不同采收时期大青叶中吲哚苷含量。方法 采用HPLC法对不同产地、不同采收时期的大青叶中的吲哚苷进行了测定。结果 以吲哚苷的含量为考察指标，不同产地吲哚苷含量差异显著；同一产地不同采收时期， 6、7、8三个月中7月份采收的大青叶吲哚苷含量最高；早、中、晚不同时间，晚上采摘的大青叶吲哚苷含量最高。结论 不同产地、采收期、时间、干燥方法等均对大青叶吲哚苷含量有影响。

【关键词】 大青叶；吲哚苷；高效液相色谱法

［Abstract］ Objective To compare the indican content of folium isatidis in different origin and different harvesting period.Methods By HPLC on different areas, different harvesting times,determined indican.Results As indican for the inspection targets, different areas indican was very different.In 6,7,8 three months,July was highest;In morning,noon and evening of a day,the evening was highest.Conclusion Different areas,period and dry methods have effects on indican content.

［Key words］ folium isatidis；indican；HPLC

大青叶Folium Isatidis为常用中药，为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥叶，味苦，性寒。有清热解毒、凉血消斑的功能。用于温邪入营，高热神昏，发斑发疹，黄疸，热痢，痄腮，喉痹，丹毒，痈肿。大青叶主要成分为吲哚苷(Indican)［1］。经证实吲哚苷有抗病毒活性［2］。青黛色素作为一种单一的植物性色素［3］在大青叶中绝大部分是以吲哚苷的形式存在［4］。在维吾尔族中有用大青叶的汁液涂抹眉毛的传统，也是维吾尔民间传统生眉产品奥斯曼生眉液中的主要药材。笔者对不同产地和不同采收时期的药材中吲哚苷的含量进行了测定［5］，为客观评价药材质量提供可靠的依据。本文首次用HPLC法对大青叶药材中吲哚苷的含量进行测定。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 LC-2010CHPLC色谱仪，色谱柱 YMC-Pack-ODS A(150 mm×6.0 mm)，BP211D十万分之一天平；吲哚苷对照品（天津一方科技有限公司），色谱甲醇水（ Fisher Chem Alert Guide）为市售乐百氏纯净水。药材来源：为不同产地的药店购买，奥斯曼公司种植基地及其不同采收时期的药材均经自治区药品检验所刘勇民主任药师鉴定。

色谱条件：流动相为甲醇∶水（20∶80，V/V）；进样量:10 μl；流速：1.0 ml/min；柱温:35 ℃；检测波长:230 nm。

1.2 实验方法

1.2.1 对照品溶液的配制 精密称取吲哚苷对照品10.0 mg于25 ml容量瓶中，加水稀释至刻度。精密量取10 ml于50 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，即得80 μg/ml的标准溶液。

1.2.2 供试品溶液制备 精密称取大青叶(通过1号筛且不能通过3号筛的颗粒)5.0 g各3份，置于洁净100 ml磨口锥形瓶中，加8倍的水回流提取3遍，每遍30 min，分别合并提取液，放置过夜，离心（3000转/min，10 min），上清液定容至100 ml，即为供试品溶液。 2 结果

2.1 不同产地大青叶中吲哚苷的含量 实验结果见表1。表1 不同产地吲哚苷含量测定结果从表1中可以看出，不同产地大青叶中吲哚苷的含量有比较明显的差异。新疆喀什及奥斯曼公司种植基地的大青叶好于新疆其他产地的，新疆产地的总体好于内地的。

2.2 不同采收时期大青叶中吲哚苷的含量 结果见表2。表2 不同采收时期大青叶中吲哚苷含量测定结果从表2中可以看出，采收期7月比其他月份吲哚苷的含量要高，而一天当中从上午到下午吲哚苷的含量在增加，下午达到最高。

2.3 线性关系考察 分别精密量取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0 ml的对照品溶液于10 ml容量瓶中，加水稀释至刻度，即为8、16、24、32、40、48、56 μg/ml一系列标准溶液。按上述色谱条件测定，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线，计算得回归方程y=34654x-8724.1,R2=0.9999。

2.4 精密度考察 准确吸取标准品溶液10 μl，重复进样7次，测定其峰面积平均为980217 mm2，相对标准偏差(RSD)为0.74%。表明仪器精密度良好。

2.5 稳定性试验 精确吸取10 μl供试品溶液，于上述色谱条件下2、4、6、8、10 h进样一次，共5次，峰面积平均值为980196 mm2，RSD为0.32％。表明供试品溶液在10 h内是稳定的。

2.6 重现性试验 以奥斯曼公司种植基地的为例，精密称取大青叶粉末5份，每份约5.0 g，按照“1.2.2”项下供试品溶液的制备方法操作，测得吲哚苷含量平均为2.30 mg/g，RSD=1.31％(n=5)，表明本方法重现性良好。

2.7 加样回收试验 精密量取已知同一浓度的提取液溶液50 ml 6份,加入相当于50 ml供试品溶液中所含吲哚苷的对照品的量，加水稀释定容至100 ml,按供试品溶液的测定方法进行测定，结果见表3。平均回收率104.37%，RSD为0.51%。表3 加样回收率试验结果

3 小结

不同产地大青叶中吲哚苷含量差异明显，这可能和采收时期、采收的为头刀还是二刀［6］叶有关。也可能和大青叶的品种有关。从测定结果可以看出，不同采收期、时间，大青叶中吲哚苷的含量有明显的差异，在药材采收时应需注意。另外采收的大青叶最好阴干，否则，吲哚苷的含量会下降。

【参考文献】
1 江苏新医学院.中药大辞典.上海:上海科学技术出版社,1986，126-128.

2 李清华，何绍雄， 王士贤.吲哚甙的代谢研究.药学学报， 1963，10(10)：581-586.

3 刘新民.青黛色素（有待于化妆品界利用的植物性色素）.北京日化，2001，63（2）：8.

4 刘新民.青黛色素（有待于化妆品界利用的植物性色素续）.北京日化， 2001，64（3）： 4.

5 李玲，乔传卓.高效液相色谱法直接测定马蓝中吲哚甙含量. 药物分析杂志， 1992，12（5）：302.

6 孙波，贾小斌.不同产地、采收期大青叶中靛玉红的含量测定. 基层中药杂志， 2000，14（2）：18.