简介：摘要目的观察长链抗分化非编码RNA(lncRNA ANCR)在胆管癌中的表达及其对胆管癌侵袭转移的影响。方法利用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测2018年6月至2019年9月于武汉同济医院治疗的18例胆管癌患者手术切除标本及癌旁组织中lncRNA ANCR表达水平进行检测；利用慢病毒载体转染构建稳定上下调ANCR胆管癌细胞株TFK-1；利用Transwell和划痕实验验证ANCR对胆管癌侵袭迁移能力的影响；利用裸鼠转移模型验证ANCR对胆管癌远处转移能力的影响。统计学分析均应用SPSS 20.0软件进行，两组间统计学差异通过双侧t检验进行分析。结果胆管癌组织中ANCR表达水平相对于癌症组织呈明显高表达，差异具有统计学意义[(6.78±5.06)倍，t＝2.702，P<0.05]。上调ANCR可显著增加TFK-1细胞侵袭细胞数[(2 180.00±124.83)个比(952.00±74.47)个，t＝16.255，P<0.05]、迁移率[(86.00±3.06)%比(49.00±3.87)%，t＝8.416，P<0.01]，下调ANCR可显著降低TFK-1细胞侵袭细胞数[(256.00±20.53)个比(952.00±74.47)个，t＝－16.789，P<0.05]、迁移率[(29.00±2.58)%比49.00±3.87)%，t＝－12.766，P<0.01]。上调ANCR可显著增加TFK-1在裸鼠体内转移灶的形成，下调ANCR可显著降低TFK-1在裸鼠体内转移灶的形成，第5、6周期裸鼠体重[第5周(14.56±0.61) g比(17.33±0.84) g，t＝－2.724，P<0.05和(20.62±1.68) g比(17.33±0.84) g，t＝3.759，P<0.05；第6周(14.21±0.40) g比(17.98±0.43) g，t＝－4.795，P<0.05和(21.48±1.33) g比(17.98±0.43) g，t＝8.154，P<0.05]及转移瘤平均直径[第5周(21.00±2.76) mm比(14.80±0.75) mm，t＝13.426，P<0.05和(4.40±1.36) mm比(14.80±0.75) mm，t＝－7.589，P<0.05；第6周(23.80±3.54) mm比(16.60±1.74) mm，t＝7.561，P<0.05和(6.40±2.06) mm比(16.60±1.74) mm，t＝－4.491，P<0.05]较对照组差异有统计学意义。结论lncRNA ANCR在人胆管癌组织中呈现显著高表达，其可促进胆管癌细胞侵袭、迁移和远处转移能力。

简介：摘要目的观察长链非编码RNA RP11-38P22在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中表达水平的变化、对细胞生长和转移的影响以及调控的途径，探讨RP11-38P22在NSCLC的作用机制。方法2019年1月至2019年6月深圳市人民医院胸外科获取56对成对的NSCLC组织和相邻癌旁组织。通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测RP11-38P22在56例肺癌组织以及多个肺癌细胞株中的表达变化，并分析其表达水平的变化与NSCLC临床病理特征的相关性。将RP11-38P22过表达和敲低表达的A549和H1299细胞均设为实验组，将转染空载体病毒(即未干扰RP11-38P22表达的)的A549和H1299细胞设为对照组。改变RP11-38P22在细胞株A549和H1299的表达，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验评估RP11-38P22对细胞生长的影响。通过流式细胞术、划痕实验及Transwell实验评估RP11-38P22对细胞凋亡、迁移和侵袭的影响。此外，通过免疫印迹技术探讨RP11-38P22发挥作用是否与p53通路相关。采用t检验比较两组的平均值，两组以上比较使用方差分析，使用Kaplan-Meier分析和对数秩检验比较生存数据。结果与癌旁组织相比较，RP11-38P22在肺癌组织中的表达明显降低(正常组织比腺癌组织为t＝2.266，P<0.05；正常组织比鳞癌组织为t＝2.313，P<0.05)，且其表达的高低与肿瘤大小显著相关(χ2＝4.758，P<0.05)。与正常细胞(HBE)相比，5种NSCLC细胞系中，RP11-38P22表达也显著性下降，差异有统计学意义(A549细胞为F＝45.674，P<0.01；H1299细胞为F＝38.568，P<0.01；PC9细胞为F＝23.337，P<0.05；H460细胞为F＝18.459，P<0.05；Calu3细胞为F＝22.102，P<0.05)。RP11-38P22过表达能够显著抑制A549和H1299细胞系的增殖能力[72 h A549细胞增殖率为对照组(110.275±5.663)%，实验组(65.735±3.706)%，F＝16.342，P<0.05；72 h H1299细胞增殖率为对照组(125.357±6.733)%，实验组(76.857±3.935)%，F＝11.360，P<0.05]，并促进细胞的凋亡[A549细胞凋亡率为对照组(2.031±0.032)%，实验组(35.078±2.512)%，F＝50.231，P<0.01；H1299细胞凋亡率为对照组(1.872±0.022)%，实验组(31.265±1.206)%，F＝41.232，P<0.01]。RP11-38P22敲低表达可增加A549和H1299细胞的迁移[A549细胞划痕面积为对照组(571.235±17.006) μm2，实验组(705.150±32.238) μm2，F＝19.258，P<0.05；H1299细胞划痕面积为对照组(430.786±12.135) μm2，实验组(681.547±30.246) μm2，F＝16.345，P<0.05]和A549细胞侵袭能力(对照组231.235±7.206，实验组345.121±16.201，F＝11.331，P<0.05)；而过表达使得A549细胞的迁移[A549细胞划痕面积为对照组(572.585±19.125) μm2，实验组(278.870±12.215) μm2，F＝15.873，P<0.05]和侵袭能力显著降低，差异有统计学意义[对照组226.772±10.268，实验组125.323±5.819，F＝14.548，P<0.05]。此外，在RP11-38P22敲低表达的细胞中p53的表达显著降低，差异有统计学意义(对照组1.000±0.056，实验组0.377±0.036，t＝3.209，P<0.05)。结论长链非编码RNA RP11-38P22通过调控p53途径影响NSCLC细胞的生长和转移。

简介：摘要目的探讨乳腺癌中长链非编码RNA（LncRNA）牛磺酸调节基因（TUG）1和miR-132表达情况及两者表达水平与患者预后的关系。方法收集2014年1月至2017年11月如皋市人民医院90例手术切除的乳腺癌组织和相应癌旁组织，采用qRT-PCR法检测TUG1和miR-132表达水平，使用Kaplan-Meier法计算TUG1和miR-132表达对乳腺癌患者生存率的影响，采用Cox回归模型分析乳腺癌预后的影响因素。结果与癌旁组织相比，乳腺癌组织中TUG1表达水平明显升高（t=65.781，P<0.001），miR-132表达水平显著下降（t=33.089，P<0.001），均与雌激素受体（ER）、人表皮生长因子受体2（HER-2）、FIGO分期、分化程度和淋巴结转移相关（均P<0.05）。乳腺癌组织中TUG1和miR-132表达之间呈负相关关系（r=-0.767，P=0.025）。TUG1高表达者3年生存率为80.77%（42/52），显著低于低表达者97.37%（37/38）（χ2=5.639，P=0.018）；miR-132低表达者3年生存率为81.25%（39/48），显著低于高表达者95.24%（40/42）（χ2=4.085，P=0.043）。Cox回归分析发现，ER、HER-2、FIGO分期、分化程度、淋巴结转移、TUG1和miR-132均是乳腺癌患者预后的影响因素（均P<0.05）。结论在乳腺癌组织中，TUG1表达水平显著上调，miR-132表达水平显著下调，且两者呈负相关，都是影响预后的独立因素。TUG1可能通过调控miR-132的表达发挥促癌基因的作用，有望成为乳腺癌独立预后标志物和治疗新靶点。

简介：摘要目的观察长链非编码RNA(lncRNA)H19靶向微小RNA(miRNA，miR)-675/EHZ2对结肠癌细胞增殖的影响。方法收集2013年7月到2018年7月郑州大学附属肿瘤医院结肠癌组织及其对应的癌旁组织各150例，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析LINC00052和miR-330-3p表达水平。待细胞完全贴壁后，采用lncRNAH19 shRNA、lncRNA control shRNA、miRNA Control和miR-675慢病毒感染SW480细胞，感染12 h更换含嘌呤霉素(1 mg/L)的杜尔伯科改良伊格尔(DMEM)培养基处理24 h，存活的细胞即为稳定细胞株，分别命名为Lnc Control组、lncRNAH19 KD组、miR-Control组和miR-675组。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析lncRNAH19和miR-675关系以及miR-675的靶基因。在结肠癌细胞株SW480建立lncRNAH19沉默细胞株和miR-765过表达细胞株，采用5-乙炔基-2’-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)法和细胞计数试剂盒(CCK-8)法测定不同处理结肠癌细胞的增殖能力。体内异体移植瘤实验分析不同处理对成瘤的影响。采用t检验分析两组数据的统计学意义。结果与癌旁组织lncRNAH19和miR-675[(1.12±0.18)、(1.09±0.17)]比较，结肠癌组织中lncRNAH19表达水平(3.49±0.27)显著增加，miR-675表达水平(0.32±0.11)显著下调，差异均有统计学意义(t＝3.109、2.981，P<0.05)。与Lnc-Contrtol组和miR-Control组结肠癌细胞EdU阳性率[(89.44±10.25)%、(85.41±12.33)%]比较，lncRNAH19 KD组和miR-675组结肠癌细胞EdU阳性率[(30.14±6.89)%、(41.72±8.32)%]显著下调，差异有统计学意义(t＝2.981、2.981，P<0.05)。CCK-8实验显示，与Lnc-Contrtol组和miR-Control组结肠癌细胞增殖能力比较，lncRNAH19 KD组和miR-675组结肠癌细胞能力显著下调，差异有统计学意义(F＝2.441、2.592，P<0.05)。与Lnc-Contrtol组和miR-Control组结肠癌细胞体内增殖能力比较，lncRNAH19 KD组和miR-675组结肠癌细胞能力显著下调，差异有统计学意义(F＝1.980、2.019，P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶分析显示lncRNAH19能与miR-675互补结合，EHZ2是miR-675的靶蛋白。与Lnc-Contrtol组和miR-Control组结肠癌细胞EHZ2蛋白表达水平[(1.19±0.13)、(1.04±0.14)]比较，lncRNAH19 KD组和miR-675组结肠癌细胞EHZ2蛋白表达水平[(0.32±0.13)、(0.47±0.13)]显著下调，差异有统计学意义(t＝3.109、3.011，P<0.05)。结论lncRNAH19通过靶向miR-675/EHZ2调控结肠癌细胞的增殖。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)X染色体失活特异转录本(XIST)对胰腺癌PANC1细胞增殖和迁移能力的影响，明确lncRNA XIST与miR-101/zeste基因增强子同源物2(EZH2)的靶向关系。方法收集2010年7月至2018年9月间浙江省嘉兴市第一医院行手术切除并经病理学确诊的90例胰腺癌及其对应的癌旁正常组织；选取PANC1细胞将其分为sh-XIST组、sh-control组、miR-control组和miR-101组。采用荧光定量PCR法检测胰腺癌组织和各组PANC1细胞lncRNA XIST、miR-101的表达，分析lncRNA XIST和miR-101的表达与肿瘤临床病理参数的关系。采用CCK-8法和Transwell小室检测各组PANC1细胞的增殖和迁移能力，蛋白质免疫印迹法检测各组PANC1细胞的EZH2表达水平。将各组PANC1细胞以3×106个/100 μl密度分别接种于Balb/c裸鼠，检测种植瘤体积。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析lncRNA XIST与miR-101及其下游靶基因EZH2的关系。结果与癌旁组织比，胰腺癌组织lncRNA XIST表达量显著上调(2.89±0.42比1.12±0.22，P<0.05)，miR-101水平显著下调(0.32±0.12比1.25±0.22)，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。胰腺癌的分化程度越高、TNM分期越高、淋巴结转移的癌组织lncRNA XIST水平显著升高，miR-101水平显著降低。sh-XIST组PANC1细胞lncRNA XIST表达水平较sh-control组显著下调(0.34±0.18比1.21±0.27)，miR-101组PANC1细胞miR-101表达水平较miR-control组显著上调(2.94±0.31比1.54±0.29)，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。培养72 h的sh-control组、sh-XIST组、miR-control组和miR-101组450 nm处吸光度值(A450值)分别为1.98±0.24、1.21±0.20、1.87±0.21、1.11±0.17，穿膜细胞数分别为(74.25±6.79)、(29.11±5.17)、(61.27±5.19)、(20.47±4.58)个细胞/200倍视野，sh-XIST组较sh-control组、miR-101组较miR-control组细胞增殖活力和迁移能力均显著下降，种植瘤生长明显缓慢，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论lncRNA XIST可靶向结合miR-101/EZH2调节胰腺癌PANC1细胞的增殖和迁移能力，促进胰腺癌的发生和发展。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)DLG1反义RNA 1(DLG1-AS1)对结直肠癌细胞增殖、凋亡的影响和潜在分子机制。方法2019年7月至2020年3月，结直肠癌细胞(SW620、Caco-2、SW480)和正常结肠上皮细胞(NCM460)购自美国模式培养物保藏中心。实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测DLG1-AS1和微小RNA(miRNA，miR)-1305表达在结直肠癌细胞(SW620、Caco-2、SW480)和正常结肠上皮细胞(NCM460)中的表达。将DLG1-AS1小干扰RNA、miR-1305模拟物分别转染SW620细胞，细胞计数试剂盒、流式细胞术分别检测干扰DLG1-AS1或过表达miR-1305对SW620细胞活力、凋亡的影响。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR确定DLG1-AS1对miR-1305的靶向调控作用。采用t检验评估两组之间的差异，采用单因素方差分析和LSD-t检验比较多组间的差异。结果与NCM460细胞比较，SW620、Caco-2、SW480细胞中DLG1-AS1表达显著升高(3.68±0.24比1.00±0.05，1.93±0.18比1.00±0.05，2.62±0.21比1.00±0.05，t＝32.796、14.935、22.514，P<0.05)，miR-1305表达显著降低(0.42±0.04比1.00±0.07，0.57±0.05比1.00±0.07，0.36±0.03比1.00±0.07，t＝21.582、14.996、25.211，P<0.05)。干扰DLG1-AS1表达后SW620细胞活力显著降低(0.51±0.04比0.99±0.06，t＝19.969，P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(23.11±2.33比7.49±0.69，t＝19.284，P<0.05)。过表达miR-1305后SW620细胞活力显著降低(0.63±0.06比0.97±0.05，t＝13.060，P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(17.99±1.60比7.78±0.72，t＝17.458，P<0.05)。miR-1305是DLG1-AS1的靶基因，DLG1-AS1负调控miR-1305表达。抑制miR-1305表达能够逆转干扰DLG1-AS1对SW620细胞活力(0.87±0.07比0.49±0.03，t＝14.969，P<0.05)、凋亡(13.63±1.22比24.16±2.49，t＝11.393，P<0.05)的影响。结论干扰DLG1-AS1通过上调miR-1305可抑制结直肠癌细胞增殖、诱导细胞凋亡。

简介：摘要结直肠癌(CRC)在世界范围内的发病率和死亡率分别位于恶性肿瘤的第三位和第二位。而抗表皮生长因子受体(EGFR)靶向药物(西妥昔单抗和帕尼单抗等)的应用，仅可以改善部分RAS原癌基因(RAS)野生型/鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)野生型CRC患者的预后。并且几乎所有开始对抗EGFR治疗敏感的CRC患者，也会在用药后的3～12个月内发展为继发性耐药。非编码RNA(ncRNA)主要包括微小RNA(miRNA)和长链非编码RNA(lncRNA)。既往研究表明，ncRNA可影响多种生物学进程，参与肿瘤的发生发展，并与多种药物的耐药密切相关。除此之外，研究结果显示ncRNA在对抗EGFR治疗耐药的CRC细胞中和CRC患者体内存在表达异常的现象。本文将针对miRNA和lncRNA在CRC抗EGFR治疗耐药中的作用机制进行综述，并探讨miRNA的表达量在预测CRC患者对抗EGFR治疗敏感性中的潜在作用。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA LINC－PINT对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响机制。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应检测正常成骨细胞hFOB和人骨肉瘤细胞HOS、MG63和SAOS2中LINC－PINT和miR－524－5p的表达。应用脂质体法转染至pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA－LINC－PINT组(转染pcDNA－LINC－PINT)、si－NC组(转染si－NC)、si－LINC－PINT组(转染si－LINC－PINT)、miR－NC组(转染miR－NC)、miR－524－5p组(转染miR－524－5p mimics)、pcDNA－LINC－PINT＋miR－NC组(共转染pcDNA－LINC－PINT和miR－NC)和pcDNA－LINC－PINT＋miR－524－5p组(共转染pcDNA－LINC－PINT和miR－524－5p)HOS细胞，Western blot检测细胞中PCNA和cleaved－caspase－3蛋白的表达，四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖情况，流式细胞术检测细胞的凋亡情况，双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果人骨肉瘤细胞HOS、MG63和SAOS2中LINC－PINT的表达水平分别为0.18±0.01、0.33±0.01和0.42±0.01，miR－524－5p的表达水平分别为2.65±0.23、1.68±0.14和1.51±0.13，与正常成骨细胞hFOB(分别为1.00±0.08和1.00±0.06)比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。培养48、72 h时，pcDNA－LINC－PINT组HOS细胞的吸光度(A)值分别为0.41±0.05和0.57±0.05，pcDNA组细胞的A值分别为0.62±0.05和1.06±0.09，差异均有统计学意义(均P<0.01)。pcDNA－LINC－PINT组和pcDNA组细胞的凋亡率分别为(25.28±2.15)%和(9.01±0.17)%，差异有统计学意义(P<0.01)。与miR－NC组(1.00±0.03)比较，miR－524－5p组WT－LINC－PINT细胞的荧光活性(0.31±0.03)降低，差异有统计学意义(均P<0.01)。过表达miR－524－5p可逆转LINC－PINT对HOS细胞的增殖抑制和凋亡促进作用。结论长链非编码RNA LINC－PINT可抑制骨肉瘤细胞的增殖，促进凋亡，其作用机制与靶向miR－524－5p有关，可为骨肉瘤的治疗提供新的作用靶点。

简介：摘要肝细胞癌（HCC）早期症状不明显，异质性强且恶性程度极高，目前缺乏有效的诊断和治疗方法，患者预后差，临床病死率高。近年来发现长链非编码RNA（lncRNA）可作为一种新的肿瘤标志物用于HCC的诊断。存在于血浆、血清、外泌体、唾液等体液中的lncRNAs包括SNHG1、HEIH、HULC、Linc00152、ZFAS1、Uc001ncr、Ax800134、LRB1、UCA1、D16366、ENSG00000258332.1、LINC00635、LncRNA-ATB、LINC00161、LncRNA-PCDH9-13:1等。lncRNA与AFP联合应用、lncRNA相关风险评分系统和外泌体竞争性内源RNA（ceRNA）生物标志物面板可有效提高lncRNAs对HCC诊断和预测效能。

简介：摘要目的研究长链非编码RNA(lncRNA) FOXD2-AS1在骨肉瘤组织及细胞株中的表达及对细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的作用与机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测36例骨肉瘤组织与癌旁组织中FOXD2-AS1的表达量并分析其表达与临床特征的关系。检测FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞株(MG63，Saos-2，U2-OS，143B)和人成骨细胞株(hFOB1.19)的表达，并选取两种高表达的细胞株敲降其表达，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)实验、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)流式细胞术、Transwell实验检测增殖、凋亡、侵袭和迁移，并通过RNA结合蛋白免疫沉淀(RNA-IP)、蛋白质印迹法(Western blot)和ChIP检测FOXD2-AS1对EZH2和p21的影响。结果FOXD2-AS1在骨肉瘤组织中的表达高于癌旁组织(t＝17.900，P<0.01)；并且在体积大、TNM分期高的骨肉瘤组织中表达量更显著(χ2＝4.208、9.257，P<0.01)。FOXD2-AS1在骨肉瘤细胞株中的表达量均高于人成骨细胞株(t＝14.540、9.970、5.890，P<0.01)，尤其是在MG63和Saos-2细胞株中，敲降FOXD2-AS1的表达能够抑制增殖(P<0.05)、促进凋亡(P<0.01)和抑制侵袭和迁移(P<0.01)。RNA-IP、Western blot和ChIP结果显示FOXD2-AS1与EZH2互作，敲降FOXD2-AS1降低了EZH2和H3K27me3与p21启动子区的分子结合。结论FOXD2-AS1能够提示临床预后不良，促进骨肉瘤细胞的恶性生物学行为，其机制可能是通过与EZH2互作，从而抑制p21的表达实现的。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)Sox2OT过表达对Aβ1-42诱导PC12细胞损伤及PI3K/Akt通路的影响。方法选取大鼠嗜铬神经瘤细胞株(PC12)，利用Aβ1-42对PC12细胞进行处理，建立AD的细胞模型。将Aβ1-42诱导前的PC12细胞设为空白组；将Aβ1-42诱导后的PC12细胞分为control组、Sox2OT过表达(p-Sox2OT)组、p-Sox2OT空载体(p-NC)组、抑制Sox2OT表达(si-Sox2OT)组和si-Sox2OT空载体(si-NC)组。使用噻唑蓝(MTT)方法对细胞的增殖活性进行检测；采用流式细胞术对转染后的细胞周期和凋亡率进行检测；采用Western blot检测PI3K/Akt通路蛋白的表达。结果MTT结果显示，与空白组(99.67±10.50 )相比，control组(29.33±5.51 )的细胞增殖率显著降低(t＝10.27，P<0.05)。RT-qPCR结果显示，与control组(0.52±0.06)相比，p-Sox2OT组(2.19±0.16)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著升高(t＝16.93，P<0.05)，si-Sox2OT组(0.22±0.02)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著下降(t＝15.28，P<0.05)；与p-NC组(0.53±0.12)相比，p-Sox2OT组(2.19±0.16)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著升高(t＝16.25，P<0.05)；与si-NC组(0.51±0.09)相比，si-Sox2OT组(0.22±0.02)中的Sox2OT的mRNA表达水平显著下降(t＝16.93，P<0.05)；control组与p-NC组以及si-NC组间的差异无统计学意义(P>0.05)。此外，p-Sox2OT组细胞的增殖能力(145.00±5.12)显著高于si-Sox2OT组(23.33±4.93)、control组(55.00±5.00)、si-NC组(57.33±8.51)以及p-NC组(56.00±5.57)(t＝29.65，21.78，27.55，21.35，均P<0.05)。Control组与p-NC组以及si-NC组间细胞增殖率的差异不具有统计学意义(P>0.05)。细胞周期检测实验显示，p-Sox2OT组G1期的细胞数量显著低于control组和p-NC(t＝9.80，8.57；均P<0.05)，而p-Sox2OT组G2期的细胞数量与control组和p-NC组相比却显著升高(t＝11.02，10.25；均P<0.05)；si-Sox2OT组G1期的细胞数量显著高于control组和si-NC组(t＝8.22，3.11，均P<0.05)，而G2期的细胞数量与control组和si-NC组相比却显著下降(t＝6.32，5.33；均P<0.05)；control组与p-NC组以及si-NC组间的细胞周期差异无统计学意义(均P>0.05)。在S期中，只有p-Sox2OT组与control组之间的差异有统计学意义(t＝1.84，P<0.05)。p-Sox2OT组细胞凋亡率[(3.66±0.26)%]低于si-Sox2OT组[(14.25±0.80)%]、control组[(8.46±0.44)%]、si-NC组[(8.78±0.44)%]以及p-NC组[(8.40±0.21)%](t＝21.81，16.27，20.32，21.35，均P<0.05)。Control组与p-NC组以及si-NC组间的细胞凋亡率差异不具有统计学意义(P>0.05)。Western blot结果显示，p-Sox2OT组中p-PI3K和p-Akt蛋白的表达明显高于p-NC(P<0.05)；与si-NC组相比，si-Sox2OT组PC12细胞中p-PI3K和p-Akt蛋白的表达显著下降(P<0.05)。结论lncRNA Sox2OT可以通过调控PI3K/Akt通路促进Aβ1-42诱导的PC12细胞的增殖，抑制细胞的凋亡。

简介：摘要目的探究鼻咽癌来源外泌体中含有的长链非编码RNA（lncRNA）结肠癌相关转录本（CCAT2）对鼻咽癌血管生成的影响。方法将人脐静脉内皮细胞（HUVEC）分为鼻咽癌细胞（CNE2）上清共培组与正常鼻咽上皮细胞（NP69）上清共培组，CCK8法检测两组HUVEC增殖能力。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测CNE2上清与HUVEC共培后lncRNA CCAT2的表达。将HUVEC分为鼻咽癌患者血清共培组、健康人血清共培组，CCK8法检测两组HUVEC增殖能力，qRT-PCR检测两组HUVEC中lncRNA CCAT2的表达。超速离心法提取CNE2、NP69细胞上清外泌体。将HUVEC分为CNE2上清外泌体共培组与NP69细胞上清外泌体共培组，CCK8等血管生成实验比较两组HUVEC功能差异。在HUVEC中转染短发夹RNA（shRNA）抑制lncRNA CCAT2表达，CCK8等血管生成实验比较不同表达lncRNA CCAT2的HUVEC功能差异。通过shRNA转染CNE2，提取上清外泌体RNA，qRT-PCR检测不同表达lncRNA CCAT2的CNE2上清外泌体中lncRNA CCAT2的差异，将上述两组外泌体分别与HUVEC共培，qRT-PCR检测共培后HUVEC中lncRNA CCAT2的表达差异，同时迁移实验检测HUVEC的功能差异。用GraphPad Prism 8作图及统计分析。结果与NP69上清共培组相比，CNE2上清共培组HUVEC增殖能力较高。CNE2上清与HUVEC共培48 h与0 h相比，lncRNA CCAT2表达较高（1比1.40±0.01，t=42.43，P=0.000）。与健康人血清共培组相比，鼻咽癌患者血清共培组HUVEC增殖能力较高，48 h lncRNA CCAT2表达较高（1比1.25±0.03，t=14.43，P=0.001）。与NP69细胞上清外泌体共培组相比，CNE2上清外泌体共培组HUVEC增殖能力较高，迁移实验中穿过小室的细胞数较多（53.12±2.13比154.74±4.17，t=37.73，P=0.000），小管生成实验中结点数较多（10.72±1.02比53.65±3.21，t=22.63，P=0.000）。与sh-NC组相比，sh-CCAT2组HUVEC增殖能力较低，迁移实验中穿过小室的细胞数较少（401.34±22.15比138.25±6.85，t=23.19，P=0.000），裸鼠皮下基质胶栓塞实验中微血管计数较少（41.00±0.32比27.15±0.23，t=61.53，P=0.000）。与正常表达lncRNA CCAT2的CNE2上清外泌体（sh-NC外泌体组）相比，低表达lncRNA CCAT2的CNE2上清外泌体（sh-CCAT2外泌体组）中lncRNA CCAT2表达较少（1比0.65±0.02，t=30.31，P=0.000）。与sh-NC外泌体组相比，sh-CCAT2外泌体组HUVEC中lncRNA CCAT2的表达较低（1比0.73±0.01，t=46.77，P=0.000），sh-CCAT2外泌体组迁移实验中穿过小室的细胞数较少（389.73±26.34比190.54±8.36，t=12.47，P=0.001）。结论鼻咽癌来源外泌体中含有的lncRNA CCAT2促进鼻咽癌血管生成。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA((lncRNA)LBX2-AS1靶向调控微小RNA(miRNA，miR)-491-5p影响骨肉瘤细胞增殖及凋亡的分子机制。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2017年10月至2018年12月郑州大学第一附属医院收集的骨肉瘤组织与瘤旁组织中LBX2-AS1、miR-491-5p的表达量。选取人骨肉瘤细胞U2OS为研究对象，按照数字表法随机分为4组：si-NC组(转染si-NC)、si-LBX2-AS1组(转染si-LBX2-AS1)、si-LBX2-AS1＋anti-miR-NC组(共转染si-LBX2-AS1与anti-miR-NC)、si-LBX2-AS1＋anti-miR-491-5p组(共转染si-LBX2-AS1与anti-miR-491-5p)，分别将si-NC、si-LBX2-AS1、si-LBX2-AS1与anti-miR-NC、si-LBX2-AS1与anti-miR-491-5p转染至U2OS细胞。噻唑蓝(MTT)检测细胞存活率；应用流式细胞仪检测细胞周期；流式细胞术检测细胞凋亡率；双荧光素酶报告实验验证LBX2-AS1与miR-491-5p的靶向关系；蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞周期蛋白1(Cyclin D1)、p21、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达量。两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果瘤旁组织与骨肉瘤组织组织中LBX2-AS1的表达量分别为(1.01±0.10)、(3.56±0.35)，miR-491-5p的表达量分别为(1.02±0.10)、(0.16±0.02)，与瘤旁组织比较，骨肉瘤组织中LBX2-AS1的表达水平显著升高(t＝35.027，P<0.05)，miR-491-5p的表达水平显著降低(t＝42.165，P<0.05)，差异均有统计学意义；si-NC组与si-LBX2-AS1组细胞存活率分别为(100.02±10.00)%、(55.67±5.54)%，G1期比例分别为(38.51±2.55)%、(52.27±4.68)%，S期比例分别为(30.10±2.14)%、(15.36±1.26)%，细胞凋亡率分别为(8.28±0.92)%、(24.11±2.37)%，与si-NC组比较，si-LBX2-AS1组细胞存活率显著降低(t＝11.638，P<0.05)，细胞周期G1期比例明显升高(t＝7.745，P<0.05)，S期比例明显降低(t＝17.806，P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(t＝18.680，P<0.05)，Cyclin D1表达量显著降低(t＝20.871，P<0.05)，p21、Caspase-3表达量显著升高(t＝22.687，P<0.05；t＝20.871，P<0.05)，差异均有统计学意义；双荧光素酶报告实验证实LBX2-AS1能够靶向结合miR-491-5p；抑制miR-491-5p表达能减弱抑制LBX2-AS1表达对U2OS细胞增殖的抑制作用，还能减弱抑制LBX2-AS1表达对U2OS细胞凋亡的促进作用。结论lncRNA LBX2-AS1通过调控miR-491-5p从而促进骨肉瘤细胞增殖，抑制细胞凋亡。

简介：摘要目的探讨肾癌索拉非尼耐药相关长链非编码RNA(lncRNA-SRLR)对骨肉瘤U2OS细胞侵袭和转移的机制。方法应用慢病毒空载对照(LV-NC)和慢病毒lncRNA-SRLR过表达载体(LV-over/SRLR)转染U2OS细胞，并建立细胞稳转株U2OS/NC和U2OS/SRLR。应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测lncRNA-SRLR和赖氨酸羟化酶(PLOD2)mRNA的相对表达量。采用transwell和划痕实验检测细胞迁移和侵袭能力。采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测白细胞介素6(IL-6)的表达情况。采用荧光原位杂交技术(FISH)检测lncRNA-SRLR细胞定位。采用免疫荧光法检测PLOD2蛋白的表达情况。采用Western blot法检测PLOD2和FAK/STAT3通路相关蛋白的表达情况。结果qRT-PCR检测结果显示，U2OS/NC和U2OS/SRLR细胞中lncRNA-SRLR mRNA的相对表达量分别为1.00±0.01和3 964.97±0.05，差异有统计学意义(P<0.001)。PLOD2 mRNA在U2OS/SRLR细胞中的表达量为2.77±0.11，明显高于对照U2OS/NC细胞(1.00±0.04，P<0.01)。划痕实验和侵袭实验均显示，U2OS/SRLR细胞的迁移和侵袭能力明显高于U20S/NC细胞(P<0.05)。ELISA法检测结果显示，U2OS/NC和U2OS/SRLR细胞上清液中IL-6的表达水平分别为(125.38±11.22)pg/ml和(119.97±13.43)pg/ml，差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光检测结果显示，U2OS/SRLR细胞中PLOD2蛋白的表达明显高于U2OS/NC细胞。Western blot法检测结果显示，U2OS/SRLR细胞中PLOD2、p-FAK和p-STAT3等蛋白的相对表达量明显高于U2OS/NC细胞，差异有统计学意义(P<0.01)。结论lncRNA-SRLR可能通过作用于PLOD2，激活FAK/STAT3通路诱导了骨肉瘤U2OS细胞的侵袭和转移。

简介：摘要目的探究膀胱尿路上皮癌中长链非编码RNA(lncRNA)母系表达基因3(MEG3)的表达情况以及MEG3调控膀胱尿路上皮癌细胞增殖活性的分子机制。方法通过实时荧光定量PCR检测膀胱尿路上皮癌组织及癌旁正常组织中lncRNA MEG3的表达水平；通过Western blot检测过表达lncRNA MEG3后T24细胞内第10号染色体同源丢失性磷酸酶一张力蛋白基因(PTEN)蛋白水平；CCK8试剂盒检测细胞活性。结果MEG3的RNA水平在膀胱尿路上皮癌组织中表达显著下调(P<0.01)，PTEN的表达水平也明显降低(P<0.01)。T24中过表达MEG3后，PTEN水平上调，细胞活性降低(P<0.01)；而过表达MEG3并给予PTEN抑制剂时细胞活性则上升。结论过表达lncRNA MEG3可通过上调PTEN抑制人膀胱尿路上皮癌T24细胞的细胞增殖活性，有可能成为临床治疗的潜在靶点。

简介：摘要目的观察人膀胱移行细胞癌(BTCC)患者肿瘤组织及膀胱癌细胞株中长链非编码RNA(lncRNA)HIT的表达，探讨lncRNA-HIT对膀胱癌细胞的生物学影响。方法应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2016年9月至2019年3月华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院54例BTCC患者手术切除的癌组织及其配对毗邻正常黏膜组织中lncRNA-HIT的表达水平；统计分析其表达水平与患者临床病理特征之间的相关性。采用短发卡RNA(shRNA)干扰lncRNA-HIT，观察其对膀胱癌细胞的凋亡、增殖及侵袭等生物学的影响。两组均数间比较用t检验，多组间均数比较采用单因素方差分析。结果BTCC患者癌组织中lncRNA-HIT的表达量较配对癌旁正常组织上调(t＝5.763，P<0.05)；lncRNA-HIT在膀胱癌细胞株EJ、UMUC3和T24细胞的表达较正常膀胱细胞系SV-HUC-1细胞明显上调(t＝15.030、13.020、14.050, P<0.05)。lncRNA-HIT异常增高与患者肿瘤分级(χ2＝6.862，P<0.01)、分期(χ2＝14.814，P<0.01)、淋巴结转移(χ2＝9.429, P<0.01)、远处转移(χ2＝12.523, P<0.01)等密切相关，但与性别(χ2＝0.441, P>0.05)和年龄(χ2＝0.106，P>0.05)无明显相关，体外靶向干扰实验显示下调lncRNA-HIT可以显著促进膀胱癌细胞的凋亡，抑制膀胱癌细胞增殖和其侵袭能力。结论lncRNA-HIT在BTCC患者肿瘤组织中显著增高。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) CARMN对三阴性乳腺癌多柔比星敏感性的影响及可能作用机制。方法瞬时转染CARMN过表达质粒后，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测多柔比星对乳腺癌的抑制率。通过StarBase数据库预测CARMN可能下游分子，并筛选RAD51作为下游靶基因。采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)及免疫印迹法对CARMN在乳腺癌细胞系的表达量、CARMN过表达质粒的转染效率和RAD51的mRNA及蛋白表达改变进行检测，探讨CARMN影响三阴性乳腺癌对多柔比星敏感性的可能机制。配对样本采用配对t检验。结果CARMN在三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231、BT-549、BT-20、MDA-MB-468中较正常乳腺上皮细胞系MCF-10A表达下降(分别为0.032±0.005、0.524±0.044、0.367±0.783、47.448±6.929)。体外药物敏感性研究显示CARMN可以提高癌细胞对多柔比星的敏感性：在MDA-MB-231和BT-549细胞系中，过表达组多柔比星的抑制率均低于阴性对照组(t＝-9.042、-10.217，P<0.05)；药物作用72 h时过表达组的半数抑制浓度(IC50)均低于对照组(MDA-MB-231：1.43 μmol/L比2.32 μmol/L；BT-549：228.00 nmol/L比375.78 nmol/L，t＝-3.402、-3.624，P<0.05)。RAD51在CARMN过表达组的mRNA[MDA-MB-231 (25.59±1.52比77.19±7.08)、BT-549 (4.54±0.52比77.03±10.96)]和蛋白水平均明显下降(t＝-12.352、-8.864，P<0.05)。结论lncRNA CARMN可提高三阴性乳腺癌对多柔比星的敏感性，可能通过抑制DNA损伤修复相关因子RAD51的表达来实现。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因1(lncRNA SNHG1)靶向微小RNA-16(miR-16)对人骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响。方法将BMSCs(购自上海泽叶生物科技有限公司)进行体外培养，实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测BMSCs成骨诱导前后SNHG1和miR-16的表达水平。将BMSCs分为正常组、诱导分化组、si-con组、si-SNHG1组、miR-con组、miR-16组、si-SNHG1＋anti-miR-con组和si-SNHG1＋anti-miR-16组。蛋白质印记(Western blot)检测碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨桥蛋白(OPN)的表达水平。双荧光素酶报告基因实验和RT-qPCR验证SNHG1和miR-16的靶向调控关系。两组间数据比较采用独立样本t检验，多组间数据比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果与正常组比较，诱导分化组BMSCs细胞SNHG1(0.64±0.12比1.00±0.08，t＝1.323，P<0.05)的表达水平显著降低，miR-16(4.54±0.84比1.00±0.11，t＝7.238，P<0.01)的表达水平显著升高。与si-con组比较，si-SNHG1组BMSCs中ALP(0.61±0.06比0.41±0.05，t＝4.435，P<0.05)、Runx2(1.25±0.13比0.79±0.09，t＝5.039，P<0.01)、OPN(0.94±0.08比0.41±0.06，t＝9.180，P<0.01)蛋白表达显著升高。与miR-con组比较，miR-16组BMSCs中ALP(0.63±0.06比0.40±0.04，t＝5.524，P<0.01)、Runx2(1.04±0.09比0.69±0.07，t＝5.317，P<0.01)、OPN(0.98±0.11比0.51±0.08，t＝5.985，P<0.01)蛋白表达显著升高。与si-SNHG1＋anti-miR-con组比较，si-SNHG1＋anti-miR-16组BMSCs中ALP(0.52±0.04比0.66±0.06，t＝3.363，P<0.05)、Runx2(0.89±0.07比1.08±0.09，t＝2.886，P<0.05)、OPN(0.71±0.08比0.98±0.11，t＝3.438，P<0.05)蛋白表达显著降低。miR-16是SNHG1的靶基因，SNHG1可负性调控miR-16表达。结论lncRNA SNHG1通过靶向miR-16可抑制BMSCs成骨分化。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA（lncRNA）CTA-796E4.4在膀胱癌组织和细胞株中的表达，并观察其对膀胱癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其分子机制。方法采用荧光实时定量聚合酶链反应（qPCR）法检测湖北省天门市第一人民医院2016年11月至2019年1月手术切除标本73例膀胱癌组织及癌旁组织、4种膀胱癌细胞株（UM-UC-3、BIU-87、5637、T24）及正常膀胱上皮细胞中CTA-796E4.4的表达。以携带CTA-796E4.4基因的重组慢病毒（LV-CTA-796E4.4）感染UM-UC-3细胞作为实验组，以阴性对照慢病毒（LV-NC）感染UM-UC-3细胞为对照组。采用qPCR法检测过表达CTA-796E4.4对叉头框转录因子O1（FOXO1）基因mRNA表达的影响，通过Western blotting检测FOXO1蛋白的表达，分别以噻唑蓝（MTT）法、Transwell侵袭实验检测高表达CTA-796E4.4对UM-UC-3细胞增殖和侵袭能力的影响。结果CTA-796E4.4在膀胱癌组织中的表达水平低于癌旁组织（1.22 ± 0.33比4.30 ± 0.64），差异有统计学意义（P<0.01）。CTA-796E4.4在膀胱癌细胞株（UM-UC-3、BIU-87、5637、T24）中的表达均低于膀胱上皮细胞（0.11 ± 0.03、0.61 ± 0.03、0.33 ± 0.03、0.73 ± 0.04比1.01 ± 0.10）（P<0.01）。LV-CTA-796E4.4感染细胞后，CTA-796E4.4表达量显著增加（P<0.01），FOXO1基因表达升高（P<0.01）。高表达CTA-796E4.4能明显抑制细胞增殖能力和侵袭能力（P<0.05）。结论lncRNA CTA-796E4.4在膀胱癌及细胞株中表达降低，高表达CTA-796E4.4可抑制UM-UC-3细胞的增殖和侵袭，其分子机制可能是上调CTA-796E4.4促进FOXO1基因的表达。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肿瘤易感性候选基因9(CASC9)对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响，明确微小RNA-195-5p(miR-195-5p)与lncRNA CASC9的靶向关系。方法收集2017年4月至2018年5月间湖北省襄阳市中西医结合医院40例行手术切除并经组织病理学确诊的胰腺癌组织及相应癌旁正常胰腺组织，选取4株胰腺癌细胞(AsPC-1、HPAC、BxPC-3、PANC1)和正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7，采用实时定量PCR法检测胰腺癌组织和各株细胞lncRNA CASC9表达。将BxPC-3细胞分为si-CASC9组(转染靶向lncRNA CASC9的siRNA)、si-control组(转染与lncRNA CASC9不匹配的siRNA)和CASC9组(转染lncRNA CASC9过表达质粒)、CASC9/miR-195-5p组(共转染CASC9过表达质粒和miR-195-5p mimics)。采用MTT法检测各组细胞增殖活性，采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达，采用生物信息学和荧光素酶实验分析CASC9和miR-195-5p的靶向关系。结果胰腺癌组织lncRNA CASC9表达量显著高于癌旁正常胰腺组织(4.70±1.25比2.15±0.82，P＝0.04)，胰腺癌细胞株AsPC-1、HPAC、BxPC-3、PANC1细胞lncRNA CASC9表达量分别为1.43±0.12、1.86±0.13、2.03±0.14、1.73±0.15，均显著高于HPDE6-C7细胞的1.00±0.10(P值均<0.001)，其中以BxPC-3细胞的表达量最高。si-CASC9组细胞较si-control组细胞的增殖活性显著下降(细胞培养第3天0.57±0.05比0.72±0.04，P＝0.01；第4天0.75±0.07比0.95±0.07，P＝0.02)；Bax表达上调(1.39±0.13比1.07±0.11，P＝0.03)，Bcl-2表达显著下调(1.44±0.11比1.71±0.12、P＝0.04)。CASC9/miR-195-5p组细胞增殖活性较CASC9组显著下降(P值<0.005)；Bax表达水平显著高于CASC9组(0.68±0.04比0.56±0.03，P＝0.01)，Bcl-2表达显著低于CASC9组(1.05±0.03比1.47±0.04，P<0.001)。结论lncRNA CASC9靶向结合miR-195-5p可逆转CASC9促进胰腺癌细胞增殖和抑制胰腺癌细胞凋亡的作用。