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  • 简介:摘要目的应用新型生物墨水和聚己内酯(polycaprolactone,PCL)通过3D生物打印构建骨-软骨复合组织块,并评估其修复关节软骨缺损的效果。方法实验分为三组:①丝素蛋白(silk fibroin, SF)-磷酸三钙冻干支架组(冻干组),应用冻干法制作的SF-TCP复合支架修复软骨缺损,作为对照;②3D生物打印组(3D打印组),以PCL为原料通过3D生物打印机打印一个中空的多层圆柱体框架,后以软骨细胞外基质、SF和骨髓间充质干细胞为原料配置新型生物墨水,并在PCL框架上方继续3D生物打印含有活细胞的软骨层,最后于底层的PCL框架中充填自体松质骨,以此构建骨-软骨复合组织块修复关节软骨缺损;③自体骨软骨移植组(马赛克组),通过自体骨软骨移植术修复软骨缺损,作为对照。术后3个月通过国际软骨修复协会(International Cartilage Repair Society,ICRS)软骨修复组织学评分系统对修复组织进行评分。通过测定硫化糖胺聚糖(sulfated glycosaminoglycan,sGAG)和胶原蛋白含量可分析软骨细胞外基质分泌的程度。通过测定缺损修复区域组织的压缩模量评价修复组织的性状。结果3D打印组新生软骨的压缩模量(2.56±0.30)MPa和马赛克组(2.51±0.13)MPa相接近(P>0.05),明显高于冻干组(1.37±0.14)MPa且差异具有统计学意义(F=11.058,P<0.05)。3D打印组中sGAG的含量(14.49±0.7)μg/mg和马赛克组(14.98±0.81)μg/mg接近(P>0.05),明显高于冻干组(8.72±0.73)μg/mg且差异有统计学意义(F=20.973,P<0.05)。三组的胶原含量并无明显统计学差异(P>0.05)。ICRS软骨修复组织学评分结果表明,在基质、细胞分布、细胞群活力和软骨下骨4项评分中,3D打印组与马赛克组的得分接近(P>0.05),明显高于冻干组且差异有统计学意义(F=19.544,P<0.05);在表面和软骨矿化2项评分中,组间差异无统计学意义。结论应用新型生物墨水和聚己内酯通过3D生物打印构建骨-软骨复合组织块能够简化组织工程骨-软骨复合组织块的体外构建,并且可以在体内较好的修复软骨缺损。

  • 标签: 生物打印 打印,三维 细胞外基质 羧甲基纤维素钠 丝素蛋白质类
  • 简介:水体沉积物中的重金属会对生态系统构成直接和间接的威胁.为了研究工业化、城市化过程中城市湖泊沉积物重金属污染程度,以武汉市墨水湖为研究对象,测定了5种重金属Zn、Cu、Ni、Pb及Cr在表层沉积物中的含量,分析了其污染程度、分布特征,并对其稳定度进行了分析.结果表明,墨水湖表层沉积物重金属污染程度较重,在所有采样点5种重金属含量均高于最低效应阈值(LEL),多数采样点甚至超过了严重效应阈值(SEL);该湖泊沉积物中重金属分布具有比较明显的空间差异性:排污口区〉湖中心水域〉城区岸边带〉林田岸边带;其稳定程度依次为:Zn〈Cu〈Ni〈Pb〈Cr,其中Zn交换态及碳酸盐结合态比例超过50%,稳度程度极低,而Pb、Cr稳定程度较高,其交换态及碳酸盐结合态比例小于10%.像墨水湖这样受纳高污染负荷市政污水、暴雨径流的城市湖泊,其潜在的重金属生物活性,必须引起足够的重视.

  • 标签: 沉积物 重金属 稳定度 城市 湖泊
  • 简介:摘要目的制备赫赛汀靶向载阿霉素/印度墨水(DOX-ink-HER-NBs)多功能分子探针,评估其在乳腺癌动物模型成像诊断及治疗中的应用价值。方法通过薄膜水化、碳二亚胺法制备DOX-ink-HER-NBs多功能纳米造影剂,检测其基本物理特性。通过激光共聚焦显像及流式细胞术检测靶向纳米分子探针体外靶向乳腺癌细胞能力。选取6周龄雌性BALB/c裸鼠构建乳腺癌移植瘤模型。将18只移植瘤裸鼠随机分为靶向组(DOX-ink-HER-NBs)、非靶向组(DOX-ink-NBs)和对照组(PBS),每组6只,通过尾静脉分别注射200 µl DOX-ink-HER-NBs混悬液、DOX-ink-NBs混悬液、PBS,应用超声诊断仪及光声成像系统观察分子探针在裸鼠体内超声、光声双模态显像情况。通过激光共聚焦对组织冰冻切片的显像,观察分子探针在肿瘤组织内的分布。对18只移植瘤裸鼠尾静脉注射200 µl DOX-ink-HER-NBs、DOX-ink-NBs、PBS,配合超声辐照,每3天注射治疗一次,持续治疗7次,观测分子探针抑制移植瘤生长的效果。结果DOX-ink-HER-NBs分子探针粒径约(621.23±42.56)nm,电位约(-25.34±2.56)mV。流式细胞结果显示靶向组的体外寻靶率较非靶向组、对照组高[(71.64±9.32)% vs (16.99±4.84)%、(9.29±3.15)%],差异均有统计学意义(P均<0.0001)。裸鼠移植瘤体内实验结果表明,与非靶向组和对照组相比,靶向分子探针能够大量聚集在肿瘤组织细胞周围。靶向组移植瘤部位的超声造影信号强度显著强于非靶向组及对照组[(60.33±4.51)dB vs (15.67±4.04)dB、(7.00±2.00)dB],差异均有统计学意义(P均<0.0001)。与非靶向组及对照组比较,靶向组移植瘤的光声信号显像明显[(0.8567±0.0950)a.u. vs(0.3233±0.0950)a.u.、(0.1033±0.0153)a.u.],差异均有统计学意义(P=0.0002、<0.0001)。与非靶向组和对照组相比,靶向组肿瘤抑制率最高[(62.93±6.96)% vs(22.73±8.05)%、(18.33±15.88)%],差异均有统计学意义(P=0.0043、0.0026)。结论本研究成功制备了DOX-ink-HER-NBs多功能分子探针。在赫塞汀的介导下纳米分子探针可聚集于靶组织,实现乳腺癌的超声及光声双模式分子成像,同时协同发挥抗肿瘤效应,为乳腺癌的分子诊断和可视化靶向治疗及疗效评估提供了新的思路。

  • 标签: 分子探针 乳腺肿瘤 超声成像 光声成像 造影剂
  • 简介:<正>人物简介赖文勇,男,1980年11月出生。博士,现为南京邮电大学信息材料与纳米技术研究院教授。主要从事塑料电子材料与光电器件研究。主持国家优秀青年基金、江苏省杰出青年基金等多个国家级/省部级项目。获国家自然科学奖二等奖、江苏省科技进步奖二等奖,入选国家青年"973"首席科学家、江苏省"333"工程培养对象。法国著名的现实主义雕塑艺术家奥古斯特·罗丹有一句名言:"工作就是人生的价值,人生的欢乐,也是幸福之所在。"每一个事业有成的人,都曾在工作中体验到快乐,获得过幸

  • 标签: 青年基金 有机半导体 国家自然科学奖 纳米技术研究 南京邮电大学 人物简介
  • 简介:摘要目的探讨含人脐血来源富血小板血浆(HUCB-PRP)的海藻酸钠-明胶(AG)生物墨水(称为HUCB-PRP-AG生物墨水)的可打印性能和细胞相容性,及该生物墨水的三维打印组织治疗裸鼠全层皮肤缺损创面的效果。方法采用实验研究方法。制备含体积分数2.5%、5.0%、10.0%HUCB-PRP的HUCB-PRP-AG生物墨水,分别命名为1P-AG、2P-AG、4P-AG。取AG、1P-AG、2P-AG、4P-AG,观察室温下外观,采用旋转流变仪检测黏度、储能模量和损耗模量。利用以上4种生物墨水分别进行三维生物打印并观察打印组织外观(后续使用交联后打印组织),将4种打印组织分别与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)在Transwell小室内用HUVEC专用培养基共培养24 h,采用细胞计数试剂盒8检测细胞增殖水平(样本数为3);将4种打印组织分别用DMEM培养基培养12、24、48 h,进行干燥称重并计算降解率(样本数为3);将1P-AG、2P-AG、4P-AG打印组织分别用磷酸盐缓冲液培养0.5、24.0、48.0 h,采用酶联免疫吸附测定法检测培养上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的表达(样本数为5)。取16只6~8周龄雌性BALB/c-NU裸鼠建立背部全层皮肤缺损创面模型,分为创面仅覆盖医用水胶体敷料的常规对照组和另予HUCB-PRP滴加的HUCB-PRP组、AG打印组织覆盖的AG组、4P-AG打印组织覆盖的4P-AG组(每组4只),观察每组3只裸鼠伤后4、8、14 d创面愈合情况并计算创面愈合率;取每组剩余裸鼠伤后8 d创面组织,行苏木精-伊红染色后观察组织病理学改变,行免疫组织化学染色后观察CD31阳性新生血管情况。对数据行重复测量方差分析、LSD检验及Bonferroni校正。结果在室温下,AG、1P-AG、2P-AG、4P-AG均呈半透明液态;AG为淡黄色,1P-AG、2P-AG、4P-AG均为淡红色但颜色依次逐渐加深。在温度10 ℃和剪切率0.1~10.0 s-1范围内,AG、1P-AG、2P-AG、4P-AG的黏度均随着剪切率的增加而减小;在温度10 ℃和角频率1~100 rad/s范围内,4种生物墨水的储能模量均大于损耗模量。4种生物墨水打印组织的分辨率与形态均相近。与1P-AG、2P-AG、4P-AG打印组织共培养24 h的HUVEC增殖水平分别为0.885±0.030、1.126±0.032、1.156±0.045,均明显高于与AG打印组织共培养的HUVEC的0.712±0.019(P<0.01);与2P-AG、4P-AG打印组织共培养24 h的HUVEC增殖水平均明显高于与1P-AG打印组织共培养的HUVEC(P<0.01)。1P-AG、2P-AG、4P-AG打印组织培养12、24、48 h的降解率均明显高于AG打印组织(P<0.01);2P-AG、4P-AG打印组织培养24、48 h的降解率均明显高于1P-AG打印组织(P<0.01);4P-AG打印组织培养12 h的降解率明显高于1P-AG打印组织(P<0.01),培养24、48 h的降解率均明显高于2P-AG打印组织(P<0.01)。培养0.5、24.0、48.0 h,2P-AG打印组织培养上清液中VEGF表达量均明显高于1P-AG打印组织(P<0.01),1P-AG和2P-AG打印组织培养上清液中VEGF表达量均明显低于4P-AG打印组织(P<0.01)。常规对照组与HUCB-PRP组裸鼠伤后8 d创面较伤后4 d干燥且缩小,HUCB-PRP组裸鼠伤后14 d创面较常规对照组缩小且无结痂;AG组、4P-AG组裸鼠伤后4 d创面上打印组织明显降解且创面无明显渗出,伤后8 d创面明显上皮化且缩小,伤后14 d创面无结痂;4P-AG组裸鼠伤后14 d创面完全上皮化。与常规对照组比较,AG组裸鼠伤后4 d创面愈合率明显降低(P<0.05),HUCB-PRP组、4P-AG组裸鼠伤后各时间点及AG组裸鼠伤后8、14 d创面愈合率均明显升高(P<0.01);与HUCB-PRP组比较,AG组裸鼠伤后4、8 d及4P-AG组裸鼠伤后4 d创面愈合率均明显降低(P<0.01),AG组裸鼠伤后14 d及4P-AG组裸鼠伤后8、14 d创面愈合率均明显升高(P<0.01);4P-AG组裸鼠伤后各时间点创面愈合率均明显高于AG组(P<0.01)。伤后8 d,常规对照组裸鼠创面组织可见大量炎症细胞浸润、少量新生微血管以及少量CD31阳性新生血管,HUCB-PRP组裸鼠创面组织可见大量炎症细胞浸润、丰富新生微血管以及较多CD31阳性新生血管,AG组裸鼠创面组织可见轻度炎症浸润、少量新生微血管以及少量CD31阳性新生血管,4P-AG组裸鼠创面组织可见轻度炎症浸润、大量新生微血管以及大量CD31阳性新生血管。结论HUCB-PRP-AG生物墨水具备良好的可打印性能和细胞相容性,其三维打印组织可促进裸鼠全层皮肤缺损创面血管化,加速创面愈合。

  • 标签: 生物相容性材料 打印,三维 新生血管化,生理性 生物墨水 人脐血来源富血小板血浆 创面修复