简介：森精机制作所由2009年4月23日起，开始接受立式CNC车床VL-553Ⅱ和VL-553MCⅡ的订购。

简介：摘要目的观察尿道上皮细胞中微小RNA(miR)-155-5p通过靶向BTB-CNC异体同源体1(BACH1)促进尿道上皮细胞的炎症和纤维化反应，从而参与尿道狭窄的发生和发展。方法生信分析结果BACH1可能是miR-155-5p的直接靶标，然后将miR-155-5p mimics或mimics NC与pmiR-Glo-BACH1-WT或pmiR-Glo-BACH1-MUT共转染到SV-HUC-1细胞中，转染48 h后，检测荧光素酶活性。将BACH1小干扰RNA(siRNA)转染到SV-HUC-1细胞中，pcDNA3.1-BACH1转染到SV-HUC-1细胞中。转染24 h后，用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)水平，应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血管内皮生长因子(VEGF)、纤维连接蛋白(FN)、IV型胶原(collagen IV)的信使核糖核酸(mRNA)水平，同时应用蛋白质印迹法(Western blot)检测VEGF、FN和Collagen Ⅳ的蛋白质水平。两组间分析采用单因素方差分析。结果miR-155-5p和pmiR-Glo-BACH1-WT共转染的细胞，与miR-155-5p和pmiR-Glo-BACH1-MUT共转染的细胞比较的荧光活性明显下降(FLUCR与RLUCR比率为0.54±0.05比0.95±0.07，F＝73.65，P<0.05)。然而，无论转染pmiR-Glo-BACH1-MUT或pmiR-Glo-BACH1-WT，模拟对照细胞中的荧光强度都无明显变化(比率为1.03±0.04比1.01±0.03 F＝0.548，P>0.05)。IL-1β、IL-6和TNF-α水平在BACH1敲低细胞中增加(分别为615.57±29.44比285.37±23.97，F＝226.939；818.53±41.16比502.63±24.38，F＝130.824；596.63±41.16比366.57±28.84，F＝88.349)，P<0.01，但在BACH1过表达细胞中下降(分别为122.70±15.94比298.87±12.44，F＝227.675；282.50±33.16比511.30±39.76，F＝58.585；129.83±9.31比374.80±25.40，F＝245.926，P<0.01)。此外，VEGF、FN和Collagen Ⅳ的mRNA(分别为1.65±0.08比0.96±0.06，F＝149.555；2.00±0.12比0.97±0.07，F＝160.243；1.65±0.06比0.96±0.02，F＝369.388，P<0.01)和蛋白质水平(分别为1.50±0.10比1.01±0.09，F＝38.382；1.42±0.10比0.99±0.09，F＝31.339；1.30±0.06比0.95±0.05，F＝62.642，P<0.01)也因BACH1敲低而增加，但因SV-HUC-1细胞中BACH1过表达而下降(mRNA水平分别为0.39±0.04比0.97±0.04，F＝340.18；0.52±0.04比0.94±0.03，F＝204.165；0.43±0.01比1.03±0.11，F＝47.206；蛋白水平分别为0.42±0.08比0.97±0.12，F＝45.375；0.52±0.05比0.96±0.12，F＝33.781；0.58±0.05比0.99±0.11，F＝36.900，P<0.01)。结论miR-155-5p通过靶向BACH1促进尿道上皮细胞的炎症和纤维化反应。

简介：摘要目的观察尿道上皮细胞中BTB-CNC异体同源体1(BACH1)对转化生长因子-β(TGF-β)信号通路的影响，从而参与微小RNA(miR)-155-5p诱导的炎症和纤维化的调节。方法采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测BACH1敲低或过表达后SV-HUC-1细胞中的TGF-β信号通路TGF-β、信号转导分子7(Smad7)和信号转导分子3(Smad3)的信使RNA(mRNA)和蛋白水平。我们在转染了miR-155-5p的细胞中过表达了BACH1，酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(interleukin，IL)-1β和IL-6水平，RT-qPCR检测血管内皮生长因子(VEGF)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Collagen Ⅳ)、TGF-β、Smad3和Smad7的表达水平。采用单因素方差分析比较两组间差异。结果TGF-β和Smad3的mRNA表达水平(2.14±0.11比0.99±0.07，F＝238.581；1.78±0.06比0.96±0.08，F＝201.720，P<0.01)，和蛋白表达水平(1.36±0.08比1.0±0.08，F＝32.911；1.34±0.04比1.01±0.08，F＝39.361，P<0.05)在BACH1敲低后升高，在BACH1过表达后下降(mRNA水平分别为0.39±0.06比1.09±0.04，F＝246.369；0.56±0.09比1.04±0.11，F＝36.668；蛋白水平分别为0.31±0.12比1.00±0.07，F＝81.323；0.63±0.05比0.98±0.14，F＝16.026，P<0.01)，而Smad7的mRNA水平(0.50±0.07比1.01±0.06，F＝105.446)和蛋白水平(0.40±0.08比1.00±0.11，F＝58.835)被BACH1小干扰RNA(siRNA)下调，P<0.01，在BACH1过表达后上调(mRNA水平为1.67±0.11比1.05±0.09，F＝55.960；蛋白水平为1.80±0.16比0.99±0.10，F＝52.571，P<0.01)。由miR-155-5p mimics引起的IL-1β、IL-6和TNF-α水平的增加因BACH1过表达而减弱(497.60±16.85比287.83±14.89比310.30±13.77，F＝171.691；795.17±34.84比396.53±24.59比425.67±21.39，F＝195.307；764.43±27.05比401.67±23.06比454.9±24.76，F＝184.088，P<0.01)。由miR-155-5p mimics诱导的VEGF、FN和Collagen Ⅳ的上调也被BACH1过表达阻断(1.90±0.10比0.95±0.05比1.21±0.05，F＝111.524；2.03±0.11比0.98±0.09比1.11±0.07，F＝121.346；1.91±0.11比1.11±0.06比0.94±0.04，F＝151.621，P<0.01)。TGF-β/smad信号通路相关因子TGF-β、Smad3和Smad7被过表达miR-155-5p激活，但BACH1共表达后，TGF-β/smad信号通路活性受到抑制(2.18±0.06比0.97±0.06比0.92±0.11，F＝240.091；1.64±0.11比1.01±0.08比0.92±0.03，F＝67.813；0.41±0.06比1.00±0.06比0.89±0.08，F＝65.57，P<0.01)。结论BACH1抑制尿道上皮细胞中TGF-β信号通路的激活从而阻断miR-155-5p诱导的炎性反应。