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  • 简介:目的探讨5-氨基酮戊酸光动力疗法(5-Aminolevulinicacidphotodynamictherapy,ALA-PDT)对体外培养的断发毛癣菌肉芽肿株的杀伤效应。方法将临床Majocchi肉芽肿患者皮损分离培养出的断发毛癣菌肉芽肿株,在马铃薯葡萄糖琼脂培养上活化后制备菌悬液,与5mmol/LALA共孵育后荧光显微镜观察原卟啉PpⅨ(ProtoporphyrinⅨ,PpⅨ)产生情况。实验分对照组、单药组、单光组和ALA-PDT组。对照组无处理。ALA-PDT组断发毛癣菌与5mmol/LALA共孵育6h后,采用功率密度为40mW/cm^2的633nm红光以不同能量密度(50、100、150、175、200J/cm^2)照射。单药组断发毛癣菌与5mmol/LALA共孵育6h,不照光。单光组无ALA共孵育,只给予200J/cm^2红光照射。通过数码相机拍摄照片及菌浓度评估ALA-PDT对断发毛癣菌肉芽肿株生长的抑制效应。结果荧光显微镜下可见明显砖红色荧光物质PpⅨ产生,当照光能量密度为175、200J/cm^2时,照片显示菌落生长明显受限,数量减少,菌浓度计数分别为(0.53±0.058)×10^5CFU/mL、(0.13±0.057)×10^5CFU/mL,明显低于对照组、单药组、单光组及其他低能量密度ALA-PDT组(P〈0.05)。结论ALA-PDT对断发毛癣菌肉芽肿株有明确的杀伤效应,可为临床ALA-PDT治疗皮肤癣菌感染提供理论依据。

  • 标签: 光动力治疗 断发毛癣菌 Majocchi肉芽肿 皮肤癣菌
  • 简介:目的研究贵州小型猪淋巴细胞对化学物或药物引起的DNA损伤及修复影响的反应。方法用单细胞凝胶电泳技术检测比较5-对PHA刺激和未刺激淋巴细胞的DNA损伤及其修复过程。结果5-氮胞引起未刺激淋巴细胞明显的DNA泳动(彗星尾),经修复孵育2h后,DNA泳动与孵育前比较无显著差异。而5-氮胞引起的刺激细胞DNA泳动经2h修复孵育后与孵育前比较显著减少。结论5-氮胞引起贵州小型猪未刺激淋巴细胞DNA损伤经2h孵育未能修复,而刺激细胞的DNA损伤明显修复。

  • 标签: 5-氮胞苷 贵州 小型猪 淋巴细胞DNA损伤 修复 实验动物
  • 简介:目的:探究喜树碱-氟尿(CPT-FUDR)纳米颗粒对口腔鳞癌Tca-8113细胞增殖与迁移的影响。方法:制备喜树碱-氟尿纳米颗粒,通过丁达尔现象证明已组装完毕。将制备好的纳米颗粒组和喜树碱(CPT)单药组、氟尿(FUDR)单药组以及两种单药混合组(CPT/FUDR)作对比,采用MTT实验检测药物对口腔鳞癌细胞Tca-8113增殖的抑制作用,通过划痕实验探究CPT-FUDR纳米颗粒和CPT/FUDR混合药物对细胞迁移能力的影响。结果:MTT结果显示:在药物浓度大于0.1μM时,随着浓度的增加,四组细胞存活率均明显下降(P〈0.05),而CPT-FUDR纳米颗粒组Tca-8113细胞的存活率明显低于单药CPT、FUDR和CPT/FUDR混合物组(P〈0.05)。在划痕实验中,培养48h后,CPT/FUDR混合物组和CPT-FUDR纳米颗粒组均显著低于空白组(P〈0.05),且CPT-FUDR纳米颗粒组显著低于CPT/FUDR混合物组(P〈0.05)。结论:在体外,CPT-FUDR纳米颗粒对口腔鳞癌Tca-8113细胞的增殖与迁移有较好的抑制作用,且抑制效果优于CPT/FUDR两种单药混合。

  • 标签: 口腔癌 联合化疗 口腔鳞癌 TCA-8113
  • 简介:为了验证普通菜豆脯氨酸合成酶基因PvP5CS2在改善作物抗旱性方面的作用,构建了普通菜豆PvP5CS2基因的烟草表达载体pCAPE2-PvP5CS2,利用农杆菌将PvP5CS2导入烟草,获得15株阳性转PvP5CS2基因植株。干旱胁迫条件下,转基因烟草植株和野生型植株叶片中脯氨酸含量、叶片相对含水量和萎蔫叶片数的差异均达到极显著水平。转基因烟草的脯氨酸含量、叶片相对含水量分别是野生型的2.30倍和1.26倍,而萎蔫叶片数只相当于野生型的90%。表明超表达PvP5CS2基因的烟草植株在干旱胁迫条件下能积累较多的脯氨酸,抗旱性得到初步改善。

  • 标签: PvP5CS2 转基因烟草 抗旱
  • 简介:Thenon-classicalHLAclassIantigenHLA-GisanimmunemodulatorwhichinhibitsthefunctionsofTcells,NKcells,andtheDendriticcells(DC).Asaresult,HLA-Gexpressioninmalignantcellsmayprovidethemwithamechanismtoescapetheimmunesurveillance.Inmelanoma,HLA-Gantigenexpressionhasbeenfoundin30%ofsurgicallyremovedlesionsbutinlessthan1%ofestablishedcelllines.OnepossiblemechanismunderlyingthedifferentialHLAGexpressioninvivoandinvitroisthattheHLA-Ggeneisepigeneticallyrepressedinmelanomacellsinvitro.Totestthishypothesis,wetreatedtheHLA-GnegativemelanomacelllineOCM-1AwiththeDNAmethyltransferaseinhibitor5-aza-2'-deoxycytidine(5-AC)andanalyzedwhetherHLA-Gexpressioncanberestored.OurdatastronglysuggestthatHLA-GissilencedasaresultofCpGhypermethylationwithina5'regulatoryregionencompassing220bpupstreamofthestartcodon.Aftertreatment,HLA-GmRNAexpressionwasdramaticallyincreased.WesternblotandflowcytometryshowedthatHLA-Gproteinwasinduced.Interestingly,HLA-Gcellsurfaceexpressiononthe5-ACtreatedOCM-1AcellsismuchlessthanthatontheHLA-GpositiveJEG-3cellswhileasimilaramountoftotalHLA-Gwasobserved.Possiblemechanismsforthedifferencewereanalyzedinthestudysuchascellcold-treatment,peptideloadingandantigenprocessingmachinerycomponents(APM)aswellasβ2microglobulin(β2-m)expression.DatarevealedthattheAPMcomponentcalreticulinmightbeinvolvedinthelowerHLA-GsurfaceexpressiononOCM-1Acells.Takentogether,ourresultsindicatedthatDNAmethylationisanimportantepigeneticmechanismbywhichHLA-Gantigenexpressionismodulatedinmelanomacellsinvitro.Furthermore,tothefirsttime,wehypothesizedthatthedeficiencyofcalreticulinmightbeinvolvedinthelowHLA-Gsurfaceexpressiononthe5-ACtreatedOCM-lAcells.

  • 标签: 感应现象 HLA-G 基因表达 黑色素瘤 肿瘤细胞 OCM-1A
  • 简介:目的:探讨声辐射力脉冲成像(ARFI)技术与尿β2-微球蛋白(β2-MG)检测联合诊断高尿酸肾病(HUAN)的临床价值。方法:回顾性分析和比较192例原发性高尿酸血症患者(PHUA组)、162例HUAN患者(HUAN组)和360例健康体检者(对照组)的血尿酸(UA)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)及尿β2-MG水平、二维超声检测结果及ARFI技术检测的肾皮质、髓质和肾窦SWV值,分析HUAN患者的SWV值与临床分期的相关性,其肾实质、肾窦SWV值与尿β2-MG水平的相关性。结果:162例HUAN患者中,肾实质回声增强76例(46.91%),肾窦增宽89例(54.94%),肾皮质髓质结石49例(30.25%);192例PHUA患者和360例健康体检者肾皮质和髓质回声均无明显异常,肾窦结石分别为3例(0.83%)和5例(2.60%)。HUAN组肾皮质、髓质和肾窦SWV值分别为3.32±0.45m/s、3.02±0.51m/s和1.58±0.45m/s;PHUA组分别为2.92±0.64m/s、2.51±0.51m/s和1.41±0.35m/s;对照组分别为2.73±0.58m/s、2.26±0.43m/s和1.21±0.21m/s;三组SWV值均为肾皮质〉肾髓质〉肾窦(P〈0.05)。HUAN组尿β2-MG水平明显高于PHUA组和对照组(P〈0.05)。HUAN

  • 标签: 尿微 微球蛋白 成像技术
  • 简介:随着环境污染加剧和人们对自身健康关注度的提高,功能性食品在全球范围内蓬勃发展。彩色稻米作为稻米家族中的一员,由于富含微量元素、花色、生物碱等功能性成分,已成为当前功能性食品研究开发的热点之一。本研究利用粳稻品种龙锦1号/香软米1578杂交组合214个F_5家系,对水稻糙米总花色含量、粒色等级和千粒重的变异及其相关性进行了分析。糙米粒色等级变异范围为1~9,平均值为4.98,变异系数为57.87%;糙米总花色含量变异范围为0~5459.34mg/kg,平均值为834.47mg/kg,变异系数为191.96%;糙米千粒重变异范围为11.96~26.24g,平均值为17.75g,变异系数为12.89%。糙米总花色含量、粒色等级和千粒重在F5家系中不符合正态分布,表现为右偏态,其中糙米总花色含量的偏斜程度最大。糙米总花色含量和千粒重的峰度系数为正值,表明为尖顶峰;而糙米粒色等级的峰度系数为负值,表明为平顶峰。糙米总花色含量与粒色等级呈极显著正相关,相关系数为0.69;糙米总花色含量、粒色等级均与千粒重呈极显著负相关,相关系数分别为-0.20和-0.34。与高亲龙锦1号相比,27个家系的糙米总花色含量极显著提高,占214个F_5家系的12.62%,为高花色水稻种质创新奠定了基础。

  • 标签: 糙米总花色苷含量 糙米粒色等级 糙米千粒重 高花色苷水稻 种质创新
  • 简介:人参皂为人参主要的药理活性组成部分,通过水解二醇系人参皂的糖苷配基是制备稀有人参皂的常用方法。酶法转化因其底物高度专一、条件温和、副产物少等潜在优势而被作为结构修饰和生理研究的主要技术手段。本文主要对糖苷酶转化人参皂研究进展进行了综述,为其工业化生产高活性皂提供理论依据。

  • 标签: 人参皂苷人参皂苷糖苷酶微生物转化
  • 简介:目的:建立一个稳定可靠分离度好的方法测定黄芪桂枝五物颗粒中芍药的含量。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱:YMC-PackODS-A(250×4.6mm,5μ);流动相:以乙腈—0.1%磷酸溶液(14:86)为流动相;检测波长:230nm;流速为1.0ml/min;柱温为30℃。结果:芍药的进样量在0.120μg~1.200μg范围内有良好的线性关系,平均回收率为99.22%,RSD为0.89%。建立了高效液相色谱法测定黄芪桂枝五物颗粒的含量的方法,该方法准确、可靠、分离度好。

  • 标签: 黄芪桂枝五物颗粒 芍药苷 高效液相色谱
  • 简介:目的:随着人参药用和保健价值的不断发掘,人参皂引起人们越来越多的关注,但有关人参皂与肠道菌群之间相互作用的研究仍为空白领域,本实验旨在探明人参皂对小鼠肠道菌群的影响,以期为人参皂的推广应用提供理论基础和实验依据。方法:有机溶剂法提取人参皂,将正常BALB/c小鼠按2mg/0.1kg人参皂进行连续灌胃饲养,分别在灌胃第10d和第13d无菌收集小鼠粪便,提取肠道细菌基因组总DNA,应用PCR-DGGE技术获得肠道菌群分子指纹图谱,进行菌群结构相似性、多样性分析,并将感兴趣的优势条带进行切胶、测序分析,对获得的序列在GeneBank数据库比对。结果:灌胃人参皂后小鼠肠道菌群结构发生改变,荧光假单胞菌和丁酸梭菌数量明显增加。结论:人参皂使小鼠肠道的菌群结构和数量发生明显改变,天然的人参皂口服很难被直接吸收利用,因此推测人参皂可能以肠道菌群作为发挥生物学作用的靶点,进而行使提高健康水平等保健功能。

  • 标签: 人参皂苷 肠道菌群 PCR-DGGE
  • 简介:目的:研究地塞米松联合熊脱氧胆酸对妊娠期肝内胆汁淤积症患者血清血清磷脂转移蛋白(phospholipidtransferprotein,PLTP)、白介素-18(interleukin-18,IL-18)水平的影响。方法:选择2014年10月至2016年10月在我院进行治疗的妊娠期肝内胆汁淤积症患者130例,按照治疗方法不同分为观察组和对照组,观察组给予地塞米松联合熊脱氧胆酸治疗,对照组给予地塞米松治疗。比较两组的临床治疗效果、治疗前后肝功能指标、血清PurP、1L-18水平、瘙痒评分的变化及妊娠结局。结果:治疗后,观察组总有效率(93.8%)明显高于对照组(80.0%)(P〈O.05);观察组血清PulP、IL-18水平均明显低于对照组(P〈O.05),且血清TBA、ALT、AST、TBIL水平、瘙痒评分、剖宫产率均明显的低于对照组(P〈0.05),早产率、胎儿窘迫率、新生儿窒息率均低于对照组,但差异无统计学意义(P〉0.05),Apgar评分明显高于对照组(P〈0.05)。结论:地塞米松联合熊脱氧胆酸治疗妊娠期肝内胆汁淤积症的临床疗效显著优于单用地塞米松治疗,可有效改善患者肝功能和妊娠结局,并降低血清PLTP,IL-18水平。

  • 标签: 脑梗死 肩手综合征 丹参川穹嗪 康复训练 针灸
  • 简介:目的:探讨银屑病患者采用复方甘草酸治疗的临床效果。方法:选取2012年7月-2013年7月于本院进行治疗的76例寻常性银屑病患者作为研究对象,将其采用随机的方法进行分组,即观察组38例与对比组38例,对比组予以传统综合治疗,观察组基于传统综合治疗之上予以复方甘草酸,对两组患者疗效进行观察对比。结果:经治疗,观察组患者治愈率、总有效率分为为50.0%和73.7%,对比组分别为26.3%和42.1%,两组疗效对比观察组明显更佳(P<0.05)。结论:复方甘草酸治疗银屑病疗效显著且不良反应少,可在临床上进行推广应用。

  • 标签: 银屑病 复方甘草酸苷 疗效
  • 简介:以国家桑树种质资源圃华南分圃中保存的160份果桑种质资源为材料,对桑椹高花色及抗氧化能力种质资源进行了筛选与评价。结果表明,其总花色含量、总抗氧化能力和DPPH清除能力的变幅分别为106.5~1472.0mg/L、5.4~32.3mmol/mL和33.7%~87.8%,表现出明显的品种间差异。113份二倍体和47份四倍体果桑种质资源桑椹中的花色含量、总抗氧化能力和DPPH清除率差异较大,但差异无统计学意义(P&gt;0.05)。聚类分析表明,160份果桑种质资源可分为6大类群,分别由13、11、56、44、10和26份种质构成。桑椹的总抗氧化能力、DPPH清除率和总花色含量呈极显著(P﹤0.01)正相关,表明桑椹的抗氧化能力与其所含的总花色类物质密切相关。本研究筛选出了一批高花色和抗氧化能力的果桑种质资源,可用于高花色和高抗氧化能力果桑新品种的培育。

  • 标签: 桑椹 花色苷 抗氧化 种质资源
  • 简介:以pBRTM/HCV-3011模板,通过PCR法扩增ns5a、LISDR(左端序列)和RISDR(右端序列),分别经XhoⅠ/EcoRⅠ、XhoⅠ/HindⅢ和EcoRⅠ/HindⅢ双酶切,连入穿梭质粒pEGFP-N3中,构建重组质粒pEGFP-N3-ns5a和pEGFP-N3-ns5a-△ISDR.对重组质粒进行酶切分析和序列测定.将这2种重组质粒通过电穿孔法转染HeLa细胞,然后在G418选择压力下进行有限稀释法筛选,用RT-PCR和荧光显微镜鉴定.经酶切鉴定和基因测序证实,重组穿梭质粒已插入目的片段ns5a、LISDR和RISDR.RT-PCR和荧光显微镜检测到目的基因的表达.以上结果说明成功构建了真核表达载体pEGFP-N3-ns5a和pEGFP-N3-ns5a-△ISDR,目的基因在HeLa细胞中得到表达,为研究HCVNS5A中是否存在抗干扰素治疗的功能蛋白提供了实验材料.

  • 标签: 丙型肝炎病毒 干扰素敏感决定区 HELA细胞系 增强型绿色荧光蛋白 丙型肝炎 真核表达载体
  • 简介:目的:应用重组杆状病毒表达系统制备由HA、NA、M1和M2蛋白组成的H5N1高致病性禽流感病毒样颗粒,为研究H5N1高致病性禽流感疫苗奠定基础。方法:构建能共表达A/chicken/Jilin/2003(H5N1)禽流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)、A/PR/8/34(H1N1)流感病毒基质蛋白(M1)和离子通道蛋白(M2)的2个二元重组杆状病毒,共同感染HighFive细胞,同时表达HA、NA、M1和M2蛋白,使这4种蛋白在感染的细胞内自主组装成病毒样颗粒。经差速离心和蔗糖密度梯度超速离心收获病毒样颗粒,通过Western印迹鉴定病毒样颗粒的组成,透射电镜观察病毒样颗粒形态,血凝试验测定病毒样颗粒的活性。结果:HA、NA、M1、M2蛋白在昆虫细胞中共表达,并组装成病毒样颗粒;电镜观察到病毒样颗粒的形态与流感病毒一致,直径约80nm;血凝试验显示该病毒样颗粒具有凝集鸡红细胞的活性。结论:应用该方法可以制备流感病毒样颗粒,为H5N1流感疫苗研究提供了可行方案。

  • 标签: 流感病毒 病毒样颗粒 杆状病毒
  • 简介:目的:观察熊果结合高分子化合物聚乙烯醇(PolyvinylAlcohol,PVA)面膜治疗黄褐斑的临床疗效。方法:48例黄褐斑患者随机分为两组,治疗组24例,外用熊果PVA面膜,对照组24例,予vitC导入治疗,一个月为一疗程。结果:熊果治疗组有效率为79.2%;高于对照组(20.8%),差异具有统计学意义(x^2=12.34,P〈0.01)。未见明显不良反应。结论:熊果PVA面膜疗效确切,配制操作简单,便于临床推广使用。

  • 标签: 熊果苷 聚乙烯醇 黄褐斑 临床研究