简介：目的：构建人snail基因真核表达载体并鉴定。方法：使用RT-PCR法获取人snail基因全长cDNA,经BamHI、EcoRI双酶切、连接,插入pcDNA3.1（＋）真核表达载体,转化TOP10感受态细胞,用含氨苄青霉素的LB培养基筛选阳性克隆,提取质粒双酶切电泳及测序鉴定,瞬时转染siha细胞Western-blot从蛋白水平鉴定重组质粒在真核细胞内的表达。结果：pcDNA3.1-snail重组质粒经酶切电泳符合预期片段,测序鉴定插入片段与NCBIGenBank文库中人snail序列一致,重组质粒瞬时转染后snail蛋白表达量明显增高。结论：成功构建pcDNA3.1-snail重组质粒载体,为进一步探讨snail基因生物学功能奠定了基础。

简介：美国研究人员新发现一种能从猴子传染给人的腺病毒。并且在跨物种传染后还能在人与人之间传播。这是首次发现能由动物传染给人的腺病毒。研究人员认为目前它在人群中的传播能力不强，不必担心会引发大规模传染病疫情。

简介：目的：探讨激活处理对人未受精卵子和早期胚胎三磷酸腺苷（ATP）含量影响。方法：收集辅助生殖治疗周期中体外受精（IVF）以及单精子卵母细胞浆内注射（ICSI）时的未受精卵子（包括GV期、MⅠ期、MⅡ期卵母细胞）,以及早期胚胎（2-cell、4-cell胚胎）,采用生物化学发光法测定在未处理和进行激活处理后的ATP含量。结果：1未处理的GV期、MⅠ期、MⅡ期卵子和2-cell、4-cell期胚胎的ATP含量分别为1.14±0.15、1.41±0.14、1.45±0.12、1.61±0.25、2.05±0.23pmol,激活处理后GV期、MⅠ期、MⅡ期卵子和2-cell、4-cell期胚胎的ATP含量分别为1.60±0.17、1.86±0.25、2.06±0.38、2.26±0.53、2.55±0.46pmol;2激活处理后GV期、MⅠ期卵子的ATP含量显著性高于未处理组（P〈0.05）。结论：人GV期、MⅠ期、MⅡ期卵子和2-cell、4-cell期胚胎中ATP含量逐渐增加;经激活处理后,仅GV期、MⅠ期卵子的ATP含量有显著性变化。

简介：目的：分析老年人群空腹血浆游离脂肪酸水平及构成特点。方法：采用高效液相色谱（highperformanceliquidchromatog．raphy，HPLC），检测149名60—104岁的健康老年人空腹血浆游离脂肪酸（FreeFattyacids，FFAs）的水平，包括月桂酸（C12：0）、二十碳五烯酸（C20：5）、豆蔻酸（C14：0）、软油酸（C16：1）、花生四烯酸（C20：4）、亚油酸（c18：2）、软脂酸（C16：0）、油酸（C18：1）和硬脂酸（C18：0）。结果：血浆FFA水平呈偏态分布；含量占血浆总FFA10％以上的单个FFA有3种，分别为：C16：0，C18：1和C18：2，共占总FFA的80％。结论：C16：0，C18：1和C18：2为血浆总FFA的主要组分，可体现血浆总FFA水平，并给出了健康老年人群的血浆总FFA及9种亚组分的均值、四分位数及中位数水平。

简介：目的：对精子发生RNA结合蛋白Boule基因启动子区结合蛋白进行生物信息学分析。方法：从基因参考序列数据库获取Boule基因启动子区序列，使用TFSEARCH程序对启动子序列中的转录因子结合位点进行预测。结果：成功获得长度为2kb的人Boule基因启动子区序列。该启动子区Thresholdscore〉90的共有60个转录因子结合位点，涉及sox家族、GATA结合蛋白家族、热休克因子家族、锌指蛋白Kruppel家族、POU家族、runt家族、同源异型框基因家族、TALE类同源结构蛋白家族、转录因子螺旋环螺旋家族、IKAROS家族、FOX家族11个家族的转录因子和3个TATAbox。结论：Boule基因表达的调控是在一定时间或空间上、一种或多种调节蛋白作用的复杂过程。调控Boule基因表达的转录因子绝大部分与胚胎发育、性别决定、个体生长密切相关。

简介：目的：探讨AMPK（腺苷酸活化蛋白激酶）系统在姜黄素诱导CaOV3人卵巢癌细胞凋亡中的作用及姜黄素对AMPK磷酸化水平及其信号通路的影响。方法：实验分为对照组、姜黄素单独作用组、compoundC（AMPK抑制剂）预给药组，SB203580（p38抑制剂）预给药组，AMPK抑制剂单独作用组以及p38抑制荆单独作用组。Westernblotting法检测AMPK、p38和p53的磷酸化水平，MTT法检测细胞活力。结果：与对照组相比，姜黄素作用组的AMPK和p38磷酸化水平增加（P〈0．05），与姜黄素单独作用组相比，SB203580预处理组的AMPK磷酸化水平下降（P〈0．05）。姜黄素作用组的细胞活力低于对照组（P〈0．05），compoundC和SB203580预处理组的细胞活力高于姜黄素单独作用组（P〈0．05）。与对照组相比，姜黄素作用组的p53磷酸化水平（Ser15）增加（P〈0．05），与姜黄素单独作用组相比，compoundC（AMPK抑制剂）和SB203580预处理组的p53磷酸化水平（Ser15）下降（P〈0．05）。结论：姜黄素能激活CaOV3细胞的AMPK，而AMPK的激活依赖于p38。AMPK和p38调节p53的磷酸化，并介导姜黄素诱导的细胞凋亡。

简介：目的:探讨血卟啉衍生物(hematoporphyrinderivative,HPD)光动力作用(photodynamictherapy,PDT)诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的作用及其机制。方法:采用MTT法测定PDT对人肝癌细胞的相对抑制率,并筛选最佳实验参数。应用流式细胞术检测PDT后细胞凋亡率。并用细胞免疫组化法检测survivin及caspase-3蛋白表达水平。结果:当HPD浓度为4mg/L,光照剂量为10J/cm2时,实验效果最佳,PDT光动力组人肝癌细胞SMMC-7721相对抑制率为(64.28±2.73)%,凋亡率达(35.28±1.52)%,与对照组相比,差异有显著意义(P<0.01);PDT后survivin蛋白表达水平显著低于对照组(P<0.05),而caspase-3却高于对照组。结论:血卟啉衍生物光动力作用具有诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡的生物学效应,其作用机制可能与光动力作用抑制凋亡调控蛋白survivin表达,并直接或间接促进caspase-3的表达,从而促进细胞凋亡。

简介：目的:外泌体是活细胞分泌的来源于多囊泡体的膜性囊泡,其主要作用包括携带与运输。雪旺细胞是周围神经再生中非常优秀的种子细胞,但其迁移能力较差,影响修复效果.本文旨在探讨外泌体和雪旺细胞共培养是否可以促进雪旺细胞迁移.方法:本实验通过分离纯化人脐带干细胞外泌体和大鼠坐骨神经雪旺细胞并鉴定,随后将其共培养于Transwell小室观察雪旺细胞迁移率.结果:通过人脐带干细胞超高速离心法得到的外泌体高表达干细胞标志物CD44(92.2±3.6%)、CD73(99.1±0.6%),并且低表达单核细胞表面抗原CD14(0.5±0.06%)以及造血千细胞表面抗原CD34(0.4±0.07%),外泌体鉴定高表达CD81和CD9;雪旺细胞培养鉴定纯度达(92.3±2.7)%;均符合实验要求。通过Transwell小室实验发现外泌体可以明显促进雪旺细胞的迁移,并且具有一定剂量关系:结论:外泌体可以提高雪旺细胞的迁移能力,从而使雪旺细胞在组织工程领域中的应用产生巨大突破.

简介：目的：了解皮肤性病患者不同病变类型中的HPV感染型别。方法：选择2014年6月~2015年6月我科门诊就诊者368例,分为4个组别：尖锐湿疣患者组242例,鲍温样丘疹病患者18例,男性冠状沟珍珠疹和女性假性湿疣70例,未见任何皮疹且醋酸白试验阴性的体检者38例。采用PCR-反向点杂交法检测皮损或外阴局部HPV-DNA亚型,并用SPSS11.0软件进行统计学分析。结果：（1）HPV-DNA的总检出率为72.9%,其中单一型别感染率57.1%,多重感染率15.8%;（2）268例HPV阳性标本中,高危型感染占51.9%,低危型和混合型的阳性率分别为33.2%、14.9%;（3）尖锐湿疣组和鲍温样丘疹病患者组HPV-DNA的阳性率分别为97.9%、88.9%,而男性珍珠疹和女性假性湿疣组以及要求体检人群的阳性率分别为14.3%和13.2%;从感染型别分析,尖锐湿疣主要是6、11、16、18、31、33、35、43和66亚型,鲍温样丘疹病患者主要是16亚型,男性珍珠疹和女性假性湿疣以及要求体检人群的感染型别主要是低危型感染,分别是6、42、43、81和6、42、83;（4）在被检测的18个高危HPV亚型中,最常见类型依次为HPVl6、18、58、56、33、52、68、31、39,未检测出HPV35、45、51、53、59、66、73和82亚型;在被检测的5个低危HPV-DNA亚型中依次为HPV6、11、42和43,未检测出81亚型。结论：HPV感染以单一型别感染为主,且以高危型为主,应该重视临床HPV感染亚型的检测,尤其是高危型HPV感染者的随访管理。

简介：目的：通过在微观结构水平和分子水平检测不同代次人胚肺二倍体细胞衰老相关的指标值，筛选出能够系统性评价人胚肺二倍体细胞衰老程度的生物学指标。方法：将Walvax－2细胞分成16个代次，在倒置显微镜下观察不同代次Walvax－2细胞生长情况及形态学变化；在透射电镜下观察不同代次Walvax－2细胞生长情况和衰老情况；通过检测SA—B-gal染色阳性率，分析不同代次Walvax－2细胞β－半乳糖苷酶的表达水平。结果：细胞可传58代。倒置显微镜下：随细胞代次的增加，可见颜色逐渐加深，色素积累；透射电子显微镜观察到：P20到P43细胞正常且骨架结构明显，细胞核完整，具有较高的核质比，P44和P45开始出现衰老现象，细胞质色素积聚加深，核膜不同程度内折，P50和P55细胞衰老更加明显；β－半乳糖苷酶的阳性染色率和细胞代龄之间呈显著相关（P〈0．01）。结论：细胞形态学变化，β－半乳糖苷酶阳性率变化与Walvax－2细胞代龄增长显著相关，可选择作为Walvax－2细胞衰老程度评价的生物学指标。

简介：目的：检测人胃癌细胞系中FHIT基因mRNA的表达状况及构建pcDNA3.1-FHIT真核表达载体。方法：RT-PCR法检测三种不同类型人胃癌细胞系中FHIT基因mRNA的表达，构建真核表达质粒pcDNA3.1-FHIT，通过酶切法、PCR扩增法和DNA序列分析鉴定重组质粒后，用脂质体转染至FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45，经G418筛选后RT-PCR鉴定。结果：FHIT基因在人胃癌细胞系BGC-823中呈阳性表达，在MGC-803、MKN-45细胞系中呈阴性表达。FHIT基因cDNA正确克隆到真核细胞表达载体pcDNA3.1中，并成功转染FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45。结论：FHIT基因在不同类型人胃癌细胞系中表达各异。成功构建pcDNA3.1-FHIT，并转染到FHIT基因mRNA阴性表达人胃癌细胞系MKN-45，使其FHIT基因阳性表达。

简介：目的：在pEGFP-C2真核表达载体中表达人NDRG2基因的截短部分并进行鉴定。方法：以含有人NDRG2基因的pGKBT7质粒为模板，通过PCR的方法扩增获得截短的人NDRG2基因，然后克隆入表达载体pEGFP-C2；以荧光显微镜观察和WesternBlotting方法对表达产物进行鉴定。结果：表达产物中在分子量67kD左右可见与目的蛋白分子量相符的条带，该条带可被Ndrg2单克隆抗体特异性识别。结论：构建了截短的人NDRG2基因真核表达载体，并在真核细胞中（HEK-293）获得成功表达。

简介：目的：研究腹腔镜与开腹手术对进展期胃癌患者围手术期疗效及免疫功能的影响.方法：选择从2015年9月至到2016年8月在医院治疗的进展期胃癌患者124例作为研究对象,依照简单数字随机表法将患者分成观察组以及对照组各含62例,对观察组进行腹腔镜辅助手术,对照组则给予开腹手术,对比两组围术期疗效相关指标,手术前后的免疫功能指标CD4＋、CD8＋及CD4＋/CD8＋）,以及两组术后的并发症.结果：观察组的手术时间明显长于对照组,且切口长度、出血量少于对照组,住院时间和术后排气时间均较对照组短,差异有统计学意义（P＜0.05）.术后两组CD4＋、CD4＋/CD8＋水平均较术前明显降低,而CD8＋水平明显上升,且术后观察组CD4＋、CD4＋/CD8＋水平均显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）.术后观察组并发症的总发生率是4.84％,明显低于对照组的16.13％,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：利用腹腔镜手术治疗进展期胃癌,具有较好的疗效,且对患者免疫功能产生的影响较小,安全性较高,值得给予推广.

简介：目的：通过对接受假体法隆胸患者的手术前后的生命质量和自尊水平进行主观的评价，得到真实、可靠的手术效果评价结果，最终提高隆胸手术患者的满意度。方法：选取接受假体法隆胸术患者共60例，在手术之前、术后6个月使用SF－36生命质量量表和Rosenberg自尊量表进行生命质量状况和自尊状况的测量评估，并和常模进行比较。结果：接受假体法隆胸患者术前SF－36生命质量量表中社会功能（SV）和精神健康（MH）两项得分明显低于常模（P〈0．01）；术后6个月量表中社会功能（sF）和精神健康（MH）两项水平有显著改善（P〈0．01）；Rosenberg自尊量袁显示患者术后6个月的自尊水平较术前有明显的改善（P〈0．001）。结论：假体法隆胸手术能使患者的生命质量得到一定程度的改善，隆胸手术对患者的自尊水平有积极的显著的影响。

简介：目的：探讨功能性鼻内窥镜手术治疗鼻窦炎与鼻息肉的疗效.方法：选取350例鼻窦炎与鼻息肉患者,按随机数字表法分为两组,对照组（164例）给予综合疗法,观察组（186例）给予功能性鼻内窥镜手术联合综合疗法.通过观察并记录疗效,治疗前,治疗后3个月患者体内IL-1,IL-8水平,SF-36量表评分,评价功能性鼻内窥镜手术治疗鼻窦炎与鼻息肉的疗效.结果：经手术和药物治疗,观察组有效率明显高于对照组（P＜0.05）,治疗前,两组IL-1和IL-8水平无统计学差异（P＞0.05）,治疗后3个月,两组IL-1和IL-8水平均明显下降,且观察组IL-1和IL-8水平低于对照组（P＜0.05）,治疗前,两组SF-36各项评分无统计学差异,治疗后3个月,两组SF-36评分均明显增加（P＜0.05）.观察组在躯体疼痛和总体健康2项评分明显高于对照组（P＜0.05）,其余6项评分相比无统计学差异（P＞0.05）.结论：功能性鼻内窥镜手术对鼻窦炎与鼻息肉具有较好的疗效,能显著减轻炎症反应,改善患者生活质量,值得临床推广使用.

简介：目的：比较不同手术时机治疗颅内前循环动脉瘤破裂患者的疗效及对患者远期预后的影响。方法：回顾性分析我院2010年3月-2015年10月收治的120例颅内前循环动脉瘤破裂患者的临床资料,所有患者均接受显微手术夹闭治疗,按手术时机分为超早期组（〈24h,n=43）、早期组（24-72h,n=36）、延期组（≥10d,n=41）,比较各组术后颅内动脉栓塞改善程度,统计各组术中及术后并发症发生情况,采用格拉斯哥量表（GOC）评定患者术后恢复情况,采用改良Rankin（mRS）表评定患者远期预后。结果：超早期组完全栓塞率略高于早期组、延期组,但对比差异无统计学意义（P〉0.05）;超早期组术中、术后各并发症发生率略低于早期组、延期组,但对比差异无统计学意义（P〉0.05）;术后6、12、24个月,超早期组、延期组GOS评分高于早期组、mRS评分低于早期组,超早期组GOS评分高于延期组,mRS评分低于延期组（P〈0.05）。结论：不同手术时机治疗颅内前循环动脉瘤破裂手术效果无明显差异,但超早期、延期手术患者术后恢复及预后评分稍优于早期手术。

简介：目的：评价鼻窦功能性手术（FESS）治疗慢性鼻窦炎合并支气管哮喘的远期疗效。方法：选择自2011年1月至2013年1月我院收治的慢性鼻窦炎患者65例,行FESS治疗。根据是否合并患有支气管哮喘将患者分为观察组（慢性鼻窦炎合并支气管哮喘）和对照组（慢性鼻窦炎）,选择同期健康志愿者作为正常组。采用酶联免疫吸附测定测定白细胞介素4（IL-4）、干扰素-γ（IFN-γ）水平、可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）和可溶性IgE低亲和力受体（sCD23）的水平,并术后随访2年观察对比慢性鼻窦炎和支气管哮喘改善情况。结果：对照组和观察组患者手术后的IL-4、sIL-2R及sCD23水平降低,IFN-γ水平升高,且与手术前的差异均有统计学意义（P〈0.05）;两组患者术后2年的慢性鼻窦炎治愈率均高于术后1年;观察组患者术后1年和术后2年的哮喘完全控制率明显高于术前,且差异具有统计学意义（P〈0.05）,且术后2年哮喘完全控制率显著高于术后1年之间（P〈0.05）;观察组患者术后1年、2年哮喘平均发作率显著低于术前,且术后2年的哮喘平均发作率明显低于术后1年（P〈0.05）。结论：FESS用于治疗慢性鼻窦炎合并支气管哮喘具有良好的临床疗效,能够显著改善患者的IL-4、IFN-γ、sIL-2R及sCD23水平,且随着时间的延长,其远期疗效较满意。

简介：目的：探讨体外受精／单精子胞浆内注射-胚胎移植（IVF／ICSI—ET）治疗前宫腔镜治疗对妊娠结局的影响。方法：回顾分析2006年1月-2007年12月在本中心接受IVF／ICSI-ET治疗的周期2988个。实验组为在治疗周期前B超或造影检查发现有宫腔病变，或曾有IVF／ICSI-ET失败史而行宫腔镜检查的周期；对照组为未行宫腔镜检查的周期。比较两组妊娠结局的差异。结果：实验组266个周期，第一次行1VF／ICSI．ET治疗前行宫腔镜检查和治疗后妊娠率34．0％（48／141）；第二次IVF／ICSI-E治疗前行宫腔镜检查和治疗后妊娠率妊娠率61．7％（21／34）；大于等于三次IVF／ICSI-E治疗前行宫腔镜检查和治疗后妊娠率57．6％（15／26）；冻胚复苏周期前行宫腔镜检查和治疗后妊娠率53．8％（35／65）。对照组2722例，第一次IVF／ICSI—ET治疗妊娠率43．2％（783／1811）；第二次IVMCSI—ET治疗妊娠率34．7％（139／400）；大于等于三次IVF／ICSI—ET治疗妊娠率28-3％（36／127）；冻胚复苏周期治疗妊娠率35．2％（135／384）。两组间妊娠率在IVF／ICSI—ET治疗大于等于二次时有统计学差异（P〈0．05）。结论：对于曾有IVF／ICSI—ET治疗失败的患者，拟再次治疗前行宫腔镜检查和治疗对妊娠结局有积极的作用，

简介：目的：本研究旨在比较负荷量和维持量两种右美托咪定给药方案对泌尿外科手术后苏醒期躁动的作用,研究右美托咪定用药的更优化方案。方法：将于气管插管全身麻醉下行腹腔镜泌尿外科手术的患者随机分入两组。负荷量组在麻醉诱导时10min内泵注右美托咪定1μg/kg。维持量组从麻醉诱导开始至手术结束持续以0.4μg/kg/h的速度输注右美托咪定。采用丙泊酚（1.5-2mg/kg）和芬太尼（2-4μg/kg）进行全麻诱导。麻醉维持采用七氟烷和瑞芬太尼。记录苏醒期最大Ricker镇静-躁动评分和咳嗽的分级。记录从时间零点到对语言指令有反应的时间和苏醒期的缺氧（SpO2〈90%）、喉痉挛等其他并发症的情况。在术后恢复室,记录残余镇静（入ICU时镇静-躁动评分≤3）、疼痛视觉模拟评分（100分数字分级评分法）和恶心呕吐评分。术后24h用15项问题的恢复质量问卷评估患者。结果：负荷量组苏醒期躁动评分为4（3-7）,维持量组为4（3-4）,两组间有显著差异（P=0.047）。负荷量组停药至呼之睁眼时间为19.4±8.1min,S组为16.8±5.6min,但无统计学差异。其余指标统计学均无差异。结论：与单次负荷量注射相比,维持量泵注方案更有利于减轻后腹腔镜泌尿外科手术后的苏醒期躁动,且不会引起苏醒时间延长。

简介：目的:探讨围手术期应用ω-3多不饱和脂肪酸对胃癌根治术患者术后恢复及生活质量的影响。方法:选择2015年1月~2016年12月期间南充市中心医院收治并行胃癌根治术的胃癌患者100例,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组50例。对照组接受常规静脉营养支持治疗,观察组在此基础上接受ω-3多不饱和脂肪酸治疗。检测并比较两组患者术前、术后1d、术后2周血清视黄醇结合蛋白(RBP)、前白蛋白(PA)、白蛋白(ALB)、转铁蛋白(RTF)、CD3~+、CD4~+、CD8~+细胞水平,并于术前、术后2周应用生活质量核心量表(EORTCQLQ-C30)评价患者生活质量。结果:两组患者术后1d以及对照组术后2周的RBP、PA、ALB、RTF、CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+均较术前显著降低(P<0.05),而CD8~+均较术前显著升高(P<0.05),术后1d、术后2周观察组RBP、PA、ALB、RTF、CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+显著高于对照组(P<0.05),而CD8~+显著低于对照组(P<0.05);术后两组患者EORTCQLQ-C30功能量表各项评分较术前均显著提高,症状量表各项评分较术前显著降低(P<0.05),术后观察组功能量表各项评分显著高于对照组,症状量表各项评分显著低于对照组(P<0.05)。结论:应用ω-3多不饱和脂肪酸能够促进胃癌根治术后患者机体免疫功能的恢复,改善患者的营养状况,提高患者的生活质量。