简介：摘要目的观察WNT2B对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向脂肪细胞分化的影响。方法采用慢病毒载体在hMSCs中过表达WNT2B基因(实验组)，以空慢病毒载体作为对照(对照组)，并将hMSCs进行脂肪细胞诱导分化7 d，以实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测脂肪细胞标志基因过氧化物酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)、脂蛋白脂酶(LPL)和降脂素(Adipsin)的表达，在光镜下计数油红O染色阳性细胞的数目，并对油红O染色强度进行定量检测。计量数据组间比较采用t检验或者Mann-Whitney检验。结果在hMSCs成脂肪细胞诱导分化过程中，WNT2B的蛋白表达水平在分化早期即发生改变，实验组hMSCs的PPARγ2(3.85±0.01比0.70±0.10，t＝54.289，P<0.01)、LPL(17.78±1.78比1.29±1.30，t＝12.958，P<0.01)、Adipsin基因表达强度(0.88±0.11比0.38±0.05，t＝7.167，P<0.01)显著低于对照组，实验组hMSCs单位面积形成脂肪细胞的数量显著低于对照组[(30.50±2.07)个比(10.33±1.63)个，t＝50.230，P<0.01]，油红染色定量分析显示实验组吸光度值显著低于对照组(0.77±0.02比0.49±0.02，t＝10.397，P<0.01)，差异均有统计学意义。结论过表达WNT2B可以抑制体外hMSCs向脂肪细胞的分化。

简介：摘要目的探讨缺氧条件下，中介素(IMD)和肾小球系膜细胞(HMC)对内皮细胞的影响。方法内皮细胞分为4组：(1)内皮细胞与系膜细胞共培养，加IMD处理作为HEMI组；(2)内皮细胞与系膜细胞共培养，无处理作为HEM组；(3)内皮细胞加IMD处理作为HEI组；(4)内皮细胞无处理作为HE组；将各组细胞在1%O2、94%N2、5%CO2条件下缺氧培养12 h后，蛋白质印迹法(Western blot)、免疫细胞化学技术检测相关蛋白表达，实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测相关基因mRNA相对表达量，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血管内皮生长因子A(VEGFA)含量，体外血管形成实验检测内皮细胞的成管分支数。实验结果两组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果上皮型钙黏分子(VE-cadherin)表达量HEMI(1.629±0.197、1.557±0.066、10.552±0.523)高于HEM(1.116±0.118、1.340±0.161、8.128±0.542)、HEI(1.278±0.096、1.078±0.088、7.523±1.211)、HE组(1.000±0.000，F＝0.734、1.244、6.134，P<0.05)，差异有统计学意义；血小板内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)表达量HEMI(1.309±0.234、1.203±0.105、1.654±0.462)高于HEM(1.067±0.379、1.038±0.035、1.601±0.397)、HEI(1.225±0.091、1.101±0.038、1.605±0.207)、HE组(1.000±0.000)，差异无统计学意义(F＝5.083、5.434、6.428，P>0.05)；VEGF表达量HEMI(0.904±0.005、1.922±0.457)高于HEM组(0.690±0.071、1.000±0.000，F＝8.307、10.896，P<0.01)，ELISA中加入IMD组(1.018±0.319)VEGFA浓度比值高于对照组(0.921±0.294，F＝0.132，P<0.05)，差异有统计学意义；体外血管形成中HEMI(22.289±0.131)、HEM(21.318±0.594)、HEI(21.533±0.867)、HE(20.755±1.798)高于NE组(18.731±0.525，F＝5.926、0.030、1.033，P<0.05；F＝6.753，P>0.05)。结论缺氧条件下，IMD可以直接或通过系膜细胞间接双重影响内皮细胞，促进血管形成。

简介：无

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简介：摘要目的探讨程序性细胞因子10(PDCD10)与胶质母细胞瘤(GBM)瘤周水肿(PTE)的关系。方法纳入2017年1月至2021年1月于湖北省华中科技大学同济医学院附属同济医院收治确诊为GBM患者21例。收集GBM患者的磁共振影像学资料和手术标本。采用磁共振T2WI图像进行测量评估PTE宽度。采用慢病毒转染法构建稳定转染的过表达PDCD10的胶质瘤细胞系(U251、U118和GL261细胞)。蛋白质印迹法(Western blot)分别检测U251、U118及GL261细胞系对照组和过表达PDCD10组PDCD10，水通道蛋白4(AQP4)和水通道蛋白1(AQP1)的表达。通过对照组及过表达PDCD10的GL261细胞系进行雄性裸鼠原位成瘤，验证PDCD10的表达与PTE，AQP1和AQP4的关系。通过t检验分析两组间差异，两组间相关性研究使用Pearson′s相关分析。结果GBM患者PDCD10表达与PTE分级呈正相关(r2＝0.871，F＝128.3，P<0.01)，且PDCD10与AQP4的表达呈正相关(r2＝0.854，F＝111.4，P<0.01)。过表达PDCD10的胶质瘤细胞系AQP4的表达显著高于对照组(U251：0.982±0.732比4.402±0.779，t＝5.543，P<0.01；U118：4.907±0.027比10.030±1.075，t＝8.244，P<0.01；GL261：1.391±0.701比6.638±2.565，t＝3.418，P<0.05)。裸鼠原位成瘤实验证实过表达PDCD10的GL261细胞成瘤后PTE的最大截面积显著高于对照组[(16.9±6.7) mm2比(32.3±5.4) mm2，t＝3.579，P<0.05]。过表达PDCD10胶质瘤成瘤后AQP4表达高于对照组(GL261成瘤组：1.577±0.673比0.564±0.125，t＝2.962，P<0.05)。结论PDCD10可能通过调控AQP4促进胶质瘤PTE。

简介：摘要急性肺损伤(ALI)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是由多种原因引起的一种临床急危重症，发展非常迅速，病死率极高。肺泡巨噬细胞M1/M2免疫失衡参与ALI/ARDS的发生发展。间充质干细胞可通过调控巨噬细胞由促炎性M1型向抗炎性M2型极化，抑制下游炎症反应，促进组织修复和再生，达到治疗ALI/ARDS的目的。因此，深入探讨间充质干细胞在治疗ALI中对巨噬细胞极化的调控机制，从而为临床治疗提供新的靶点。

简介：摘要目的构建跨膜蛋白(transmembrane protein，TMEM)240慢病毒载体，并在人神经母细胞瘤细胞中表达。方法提取人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的RNA，逆转录成cDNA并作为模板，聚合酶链反应(polymerasechain reaction，PCR)扩增TMEM240的CDS序列，与pLVX-EGFP-N1载体连接，转化、验菌送公司测序，pLVX-TMEM240-EGFP-N1质粒与慢病毒包装质粒共转染293Ta细胞，收取上清，感染SH-SY5Y，嘌呤霉素筛选，获得表达TMEM240的SH-SY5Y细胞，将感染pLVX-EGFP-N1的SH-SY5Y细胞作为对照组，感染pLVX-TMEM240-EGFP-N1的SH-SY5Y细胞为实验组。通过共聚焦显微镜、实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR，Real-time PCR)和Western blot检测细胞中TMEM240表达。结果测序结果显示pLVX-TMEM240-EGFP-N1质粒构建成功；共聚焦显微镜下，表达TMEM240的细胞内出现点状绿色荧光；Real-time PCR及Western blot结果表明细胞内TMEM240表达。结论成功构建TMEM240慢病毒载体，慢病毒在基因和蛋白水平均引起TMEM240表达升高。

简介：摘要:探讨中性粒细胞与淋巴细胞比值联合血清肿瘤标志物检测对胃癌的诊断价值效果。本研究通过选取山东某医院自2021年8月至2022年8月期间，收治符合条件的50例胃癌患者作为试验组，所选患者均经临床、病理学及影像学确诊，并根据疾病进展情况对其进行分期。同时，选取符合条件的50名健康体检者作为健康对照。两组患者均单独和联合检验一项血清肿瘤标志物，统计各检测指标水平，观察试验组患者不同阶段指标变化水平，对所得的检测结果进行数据分析，评价中性粒细胞与淋巴细胞比值联合血清肿瘤标志物检测对胃癌的临床意义。结果：两组的各项指标进行对比分析比较，试验组各指标结果优于对照组，差异有统计学意义。在胃癌的筛查和诊断中，中性粒细胞与淋巴细胞比值联合血清CEA检测在胃癌检测具有良好的效果，准确率也较高，可为临床胃癌的诊断提供参考。

简介：摘要目的探讨人脐带间充质干细胞（hUC-MSC）及其条件培养液对人非小细胞肺癌多倍体A549细胞增殖、迁移和凋亡的影响。方法取对数生长期的A549细胞，采用1 μmol/L多西他赛诱导24 h后，更换为含10%胎牛血清的DMEM/F12培养液继续培养3 d，建立多倍体A549细胞模型。分离与培养hUC-MSC，制备hUC-MSC条件培养液。正常培养的多倍体A549细胞作为对照组；条件培养液培养的多倍体A549细胞为条件培养液组；hUC-MSC与多倍体A549细胞共培养，细胞总数比分别为2∶1（MSC 1组）和5∶1（MSC 2组）。各组细胞继续培养48 h或72 h。流式细胞术检测多倍体A549细胞增殖和凋亡情况，Transwell实验检测细胞迁移能力，蛋白质印迹法检测迁移和凋亡相关蛋白的表达情况。结果成功建立多倍体A549细胞模型，分离培养出hUC-MSC。流式细胞术检测细胞增殖结果示，培养48 h时对照组、条件培养液组、MSC 1组、MSC 2组平均荧光强度分别为1 695±305、2 020±85、1 259±35、1 356±33，差异有统计学意义（F=14.00，P<0.05）；72 h时分别为1 052±77、1 309±24、864±201、1 103±237，差异无统计学意义（F=3.90，P>0.05）。Transwell实验结果显示，培养48 h时对照组、条件培养液组、MSC 1组、MSC 2组迁移细胞数分别为（52±9）个、（57±12）个、（68±8）个、（75±11）个，差异有统计学意义（F=32.16，P<0.05）；各实验组迁移细胞数均高于对照组（均P<0.05）。对照组、条件培养液组、MSC 1组、MSC 2组凋亡细胞比例分别为（15.53±4.27）%、（13.77±1.75）%、（3.60±0.50）%、（2.33±0.06）%，差异有统计学意义（F=182.36，P<0.05）；条件培养液组与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）；MSC 1组和MSC 2组分别与对照组比较，差异均有统计学意义（均P<0.05）。蛋白质印迹法检测结果显示，与对照组比较，条件培养液组、MSC 1组和MSC 2组中迁移相关蛋白基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达上调，促凋亡蛋白bax表达下调，抗凋亡蛋白bcl-xL表达上调。结论hUC-MSC可提高多倍体A549细胞的迁移和抗凋亡能力，在化疗损伤修复过程中hUC-MSC可能会影响肿瘤细胞的存活。

简介：摘要1岁4月龄患儿以发热起病，临床表现为肝脾肿大、淋巴结肿大，外周血异型淋巴细胞比例0.26，存在贫血、血小板降低、低纤维蛋白原血症、高甘油三酯、铁蛋白升高、可溶性CD25升高、EB病毒感染，同时有高T淋巴细胞血症，诊断为传染性单核细胞增多症继发噬血细胞综合征，给予甲泼尼龙、人免疫球蛋白、更昔洛韦抗病毒对症治疗，8周后疗效评估达完全应答，未行维持治疗，随访1年无复发。

简介：摘要目的分析T淋巴细胞亚群和外周血B淋巴细胞内免疫抑制因子在传染性单核细胞增多症(IM)患儿中的表达意义。方法抽取2018年11月至2021年6月郑州市第三人民医院收治的IM患儿462例作为IM组，并以1∶1配比抽取同期健康体检儿童462例作为健康对照组。检测两组受试对象的T淋巴细胞亚群、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)、程序性死亡受体-1(PD-1)、程序性死亡受体-1配体(PD-L1)水平。比较IM组与健康对照组T淋巴细胞亚群、外周血B淋巴细胞内免疫抑制因子水平，比较IM组中不同病情时期、不同异型淋巴细胞百分比(ALY%)患儿的T淋巴细胞亚群、外周血B淋巴细胞内免疫抑制因子水平，分析其相关性。结果IM组CD3+、CD8+、CTLA-4、PD-1、PD-L1水平高于健康对照组，CD4+、CD4+/CD8+水平低于健康对照组(P<0.05)。IM组急性期CD3+、CD8+、CTLA-4、PD-1、PD-L1水平高于恢复期，CD4+、CD4+/CD8+水平低于恢复期(P<0.05)。IM组中ALY% ≥10%患儿的CD3+、CD8+、CTLA-4、PD-1、PD-L1水平高于ALY% <10%患儿，CD4+、CD4+/CD8+水平低于ALY% <10%患儿(P<0.05)。Pearson分析结果显示，CD3+(r＝0.671、0.647)、CD8+(r＝0.685、0.598)、CTLA-4(r＝0.694、0.612)、PD-1(r＝0.671、0.712)、PD-L1(r＝0.682、0.685)和病情时期、ALY%呈正相关(P<0.05)，CD4+(r＝-0.469、-0.512)、CD4+/CD8+(r＝-0.501、-0.567)和病情时期、ALY%呈负相关(P<0.05)。结论IM患儿机体T淋巴细胞亚群和外周血B淋巴细胞内免疫抑制因子异常表达，并与疾病时期、ALY%密切相关，可据此评估病情进展和严重程度，指导临床制定针对性治疗方案。

简介：摘要目的探讨尘螨变应性哮喘患儿外周血滤泡调节性T(TFR)细胞/滤泡辅助性T(TFH)细胞及相关细胞因子变化，并探讨其临床意义。方法回顾性研究。选取2021年1月至12月江南大学附属医院25例急性发作期尘螨变应性哮喘患儿(哮喘组)和同期16例性别和年龄相匹配的健康体检儿童(健康对照组)作为研究对象。采用流式细胞法检测2组外周血TFR细胞、TFH细胞比例；流式细胞微球芯片捕获法检测2组细胞因子[白细胞介素(IL)-10、IL-21]水平；荧光酶免疫技术检测2组尘螨特异性IgE(sIgE)水平；血细胞分析仪检测外周血嗜酸性粒细胞比例。采用t检验进行组间分析，指标间相关性采用Spearman秩相关分析。结果哮喘组TFR细胞/TFH细胞免疫失衡。与健康对照组比较，哮喘组TFR细胞比例较低[(0.11±0.03)%比(0.13±0.03)%]，TFH细胞比例较高[(5.07±1.75)%比(3.80±1.60)%]，TFR细胞/TFH细胞比值较低(0.02±0.01比0.05±0.03)，差异均有统计学意义(t＝2.29、2.30、3.71，均P<0.05)。与健康对照组比较，哮喘组IL-21水平较高[(547.85±195.13) ng/L比(404.94±110.41) ng/L]，IL-10水平较低[(10.18±3.49) ng/L比(14.79±5.65) ng/L]，差异均有统计学意义(t＝2.60、3.15，均P<0.05)。哮喘组TFR细胞/TFH细胞比值与sIgE呈负相关(r＝－0.444 2，P＝0.026 1)，与嗜酸性粒细胞百分比无相关性(r＝－0.135 2，P＝0.519 3)。结论尘螨变应性哮喘患儿存在TFR细胞/TFH细胞亚群失衡，失衡的TFR细胞、TFH细胞及其相关细胞因子IL-10、IL-21可能参与调控哮喘sIgE的生成。

简介：摘要 目的 研究早产儿脑损伤合并脑出血患者血常规各项指标比值的临床指导价值。 方法  选取2018.06—2020.06入住我院新生儿病房的早产儿，根据回顾性研究分为早产儿无脑损伤组、早产儿脑损伤组、早产儿脑损伤合并脑出血组。比较患儿入院24h内NLR、PLR值并分析其临床意义。并追踪至患儿纠正年龄1岁，评估其生长发育状况，将其分为有后遗症组和无后遗症组，比较两组患儿入院时NLR和PLR比值变化。结果 相较于早产儿无脑损伤组，早产儿脑损伤组NLR、PLR值均明显升高（P

简介：摘要 目的 研究早产儿脑损伤合并脑出血患者血常规各项指标比值的临床指导价值。 方法  选取2018.06—2020.06入住我院新生儿病房的早产儿，根据回顾性研究分为早产儿无脑损伤组、早产儿脑损伤组、早产儿脑损伤合并脑出血组。比较患儿入院24h内NLR、PLR值并分析其临床意义。并追踪至患儿纠正年龄1岁，评估其生长发育状况，将其分为有后遗症组和无后遗症组，比较两组患儿入院时NLR和PLR比值变化。结果 相较于早产儿无脑损伤组，早产儿脑损伤组NLR、PLR值均明显升高（P

简介：【摘要】 目的 本研究回顾性分析我院收治的传染性单核细胞增多症（infectious mononucleosis IM）患者外周血异型淋巴细胞比率、CRP、中性/淋巴比值及EBV-DNA检测情况，分析其在传染性单核细胞增多症（IM）中的诊断价值。 方法 选取我院2020年1月至2021年7月诊断为传染性单核细胞增多症的患儿160例作为研究组，选取同期进行儿童保健的健康儿童150例作为对照组，对其进行血常规、CRP、异型淋巴细胞比率及EBV-DNA检测，计算中性粒细胞/淋巴细胞比值，比较研究组及对照组两者之间有无统计学意义。结果 本次研究结果显示，研究组异型淋巴细胞比率、中性/淋巴比值、CRP、EBV-DNA检测结果的阳性率均高于对照组，差异有统计学意义（P

简介：摘要目的探究高、低剂量电离辐射全身照射后短时间内小鼠海马组织损伤规律，分析小胶质细胞和巨噬细胞极化模式在损伤中的作用。方法C57BL/6小鼠随机分为假照射组、低剂量组(0.05 Gy)、高剂量组(7 Gy)，低、高剂量组分别进行单次60Co γ射线的全身照射；于照射后6 h、1 d、3 d、7 d取小鼠海马组织，采用HE和尼氏(Nissl)染色法检测神经元形态结构，Tunnel染色法检测神经细胞凋亡，RT-PCR和免疫荧光试验分别检测海马区M1和M2型小胶质细胞标记物mRNA和蛋白质表达水平及分布规律；在照射后1个月，分别采用水迷宫、旷场、高架十字迷宫以及悬尾试验评估小鼠认知和情绪行为。结果病理学检测结果显示，辐射后小鼠海马区神经细胞形态结构改变，并伴随凋亡现象。60Co γ射线照射后6 h出现急性损伤，1 d、3 d有所缓解，7 d损伤持续存在，且呈剂量依赖性。免疫荧光染色结合共聚焦成像分析结果显示，与假照射组相比，7 Gy 60Co γ射线照射后6 h、1 d小鼠海马区小胶质细胞数量显著增加，M1型小胶质细胞标志物表达下调，M2型小胶质细胞标志物表达呈上调趋势，而在辐射后3 d和7 d，M2型小胶质细胞标志物出现降低趋势。RT-PCR结果显示，照射组M1和M2型小胶质细胞标志物基因mRNA表达水平在照射后6 h有上调趋势，但无统计学意义，相关促/抗炎因子mRNA表达水平明显上调。行为学试验结果显示，与对照组比较，照射后1个月小鼠在行为和情绪上差异均无统计学意义。结论60Co γ射线照射后可导致小鼠出现海马组织损伤，海马内小胶质细胞和巨噬细胞过表达并呈现不同极化状态。

简介：摘要目的探究淋巴细胞亚群在成人噬血细胞综合征（HPS）中的预后价值。方法选取2013年1月至2020年8月8家医院确诊的172例成人HPS患者为研究对象，其中男性87例（50.6%，87/172），女性85例（49.4%，85/172），生存68例，死亡104例。对其临床资料进行总结，回顾性分析淋巴细胞亚群、免疫球蛋白特征、纤维蛋白原等变量，并分析以上变量与患者预后相关性。通过最大选择秩统计量（MaxStat）计算连续变量的最佳截断值，基于Cox比例风险回归模型筛选HPS患者的预后影响因素。结果HPS患者中位年龄56（42，66）岁。存活组年龄、血小板计数和白蛋白水平分别为48（27，63）岁，84×109/L和32.3 g/L；在死亡组分别为59岁，45.5×109/L和27.3 g/L，2组间差异有统计学意义（Z=‒3.368，P=0.001；Z=‒3.156，P=0.002；Z=‒3.431，P=0.001）。Kaplan-Meier曲线分析显示，5年累积生存率为37.4%（37.4/100），分化簇8+（CD8+）<11.1%、CD3+<64.9%、CD4+>51%、CD4/CD8比值>2.18的患者预后较差（χ2=7.498，P=0.023；χ2=4.169，P=0.041；χ2=4.316，P=0.038；χ2=9.372，P=0.002）；多因素Cox回归分析显示，CD4/CD8比、年龄、纤维蛋白原及血红蛋白是HPS患者独立预后因素（HR=2.435，P=0.027；HR=5.790，P<0.001；HR=0.432，P=0.018；HR=0.427，P=0.018）。结论外周血淋巴细胞亚群可用于评估HPS患者预后，CD4/CD8比、年龄、纤维蛋白原及血红蛋白是HPS患者独立预后因素。

简介：摘要目的观察黄芪甲苷对溶血磷脂酸（LPA）诱导的小鼠神经母细胞瘤细胞（N1E-115）神经突起回缩的影响，探讨其作用机制。方法将N1E-115细胞按随机数字表法分为空白组、模型组及0、40、80 µg/ml黄芪甲苷组。0、40、80 µg/ml黄芪甲苷组分别以20、40、80 µg/ml黄芪甲苷干预24 h，空白组及模型组不做药物干预，每组以无血清培养12 h，模型组及黄芪甲苷各浓度组以40 µmol/L的LPA干预10 min。于倒置显微镜观察并拍照，采用Image J软件计数N1E-115细胞神经突起数量；采用免疫荧光染色法检测细胞RAS同源基因家族成员A（RhoA）、Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶2（ROCK2）、p-ROCK2、磷酸化肌球蛋白轻链2（p-MLC2）蛋白表达；荧光实时定量PCR法检测RhoA、ROCK2 mRNA水平；Western blot法检测RhoA、ROCK2、p-MLC2、肌球蛋白轻链2（MLC2）蛋白表达。结果与20 µg/ml黄芪甲苷组比较，40、80 µg/ml黄芪甲苷组神经突起回缩抑制率升高（P<0.05）；与模型组比较，20、40、80 µg/ml黄芪甲苷组RhoA、p-ROCK2、p-MLC2蛋白平均荧光强度及40 µg/ml黄芪甲苷组ROCK2蛋白平均荧光强度降低（P<0.05或P<0.01）；20、40、80 µg/ml黄芪甲苷组RhoA mRNA［（0.89±0.09）、（0.41±0.01）、（0.09±0.03）比（1.50±0.01）］、ROCK2 mRNA［（0.89±0.09），（0.14±0.01），（0.20±0.01）比（1.62±0.17）］水平降低（P<0.05或P<0.01）；20、40、80 µg/ml黄芪甲苷组ROCK2蛋白［（0.75±0.06，0.57±0.02，0.66±0.01）比（1.08±0.02）］、p-MLC2蛋白［（1.72±0.03）、（1.40±0.04）、（1.29±0.03）比（2.19±0.11）］、MLC2蛋白［（1.13±0.02）、（0.68±0.03）、（0.75±0.03）比（1.60±0.03）］及40、80 µg/ml黄芪甲苷组RhoA蛋白［（0.35±0.01）、（0.40±0.03）比（0.57±0.08）］表达降低（P<0.05或P<0.01）。结论黄芪甲苷可阻止LPA诱导的神经突起回缩，促进受损神经再生，其机制可能与下调RhoA-ROCK2通路RhoA、ROCK2、p-ROCK2、p-MLC2、MLC2蛋白表达，抑制神经生长锥崩溃有关。

简介：摘要目的探讨基质刚度对尿道成纤维细胞(UFBs)活化的影响及其机制。方法2020年6月至2021年2月从福建医科大学附属第一医院泌尿外科手术患者获得的尿道瘢痕组织中提取原代UFBs；用聚二甲基矽氧烷分别以60∶1(Soft)、40∶1(Moderate)、30∶1(Stiff)的比例加入固化剂，制备不同刚度的基质凝胶，将UFBs接种其上培养。倒置显微镜观察在不同刚度基质凝胶上生长的UFBs形态学特点；蛋白质印迹法(Western blot)检测UFBs活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(collagen Ⅰ)和Ⅲ型胶原蛋白(collagen Ⅲ)表达水平；进一步检测FAK/ROCK-1/YAP通路标志蛋白表达水平，并观察整合素抑制剂Cilengtide (20 ng/ml)对其影响，探索基质刚度是否通过此通路影响UFBs活化；采用方差分析和独立样本t检验比较组间差异。结果随着基质凝胶刚度的增加，接种其上的UFBs形态由椭圆形转变为偏梭形，细胞伪足增长、增多；Soft、Moderate、Stiff组UFBs的α-SMA相对表达量分别为(0.140±0.004、0.815±0.030和1.385±0.051，F＝989.247，P<0.05)；collagen Ⅰ相对表达量分别为(0.138±0.004、0.947±0.021和1.263±0.028，F＝2 415.159，P<0.05)；collagen Ⅲ相对表达量分别为(0.284±0.005、1.089±0.017和1.374±0.038，F＝1 661.310，P<0.05)，均随基质刚度增加而升高；Stiff组中UFBs的p-FAK(1.282±0.029比0.430±0.009，t＝ 48.262，P<0.05)、ROCK-1(1.366±0.111比0.474±0.034，t＝13.300，P<0.05)和YAP(1.272±0.020比0.908±0.007，t＝30.254，P<0.05)表达水平均显著高于Soft组，而p-YAP(0.589±0.006比1.028±0.008，t＝-74.860，P<0.05)表达水平显著低于Soft组；在加入整合素抑制剂Cilengtide后，基质刚度增加引起的p-FAK、ROCK-1、YAP和p-YAP表达改变均减弱。结论细胞外基质刚度通过整合素介导的FAK/ROCK-1/YAP通路调控人尿道成纤维细胞活化。

简介：摘要目的探讨高脂血症性急性胰腺炎（hyperlipidemia-induced acute pancreatitis, HLAP）患者外周血T淋巴细胞亚群和细胞因子的变化特点及预测病情预后的价值。方法分析厦门大学附属第一医院2018年1月至2021年5月收治的急性胰腺炎患者184例。其中高脂血症（HLAP）组92例和非高脂血症（NHLAP）组92例；HLAP组根据病情再细分为重症（severe acute pancreatitis, SAP）亚组和非重症（非SAP）亚组。所有患者于入院第1、3、5天抽取外周静脉血，流式细胞术检测T淋巴细胞亚群，流式荧光法测定细胞因子。应用SPSS 19.0软件，相应采用独立样本t检验或Mann-Whitney U分析比较两组免疫指标的差异。采用Logistic回归分析HLAP组重症胰腺炎免疫指标危险因素；采用ROC曲线评价免疫指标对重症胰腺炎发生预测价值，以P<0.05为差异有统计学意义。结果HLAP组与NHLAP组比较：第1天，HLAP组CD4+%低于NHLAP组，而IL-2高于NHLAP组（P<0.05）；第3天，HLAP组CD4+%低于NHLAP组，IL-4、IL-6、IL-10高于NHLAP组（P<0.05）；第5天，HLAP组IL-6、IL-10高于NHLAP组（P<0.05）。HLAP组SAP亚组与非SAP亚组比较：第1天，SAP亚组IL-10高于非SAP亚组（P<0.05）；第3天，SAP亚组IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ均高于非SAP亚组（P<0.05）；第5天，SAP亚组CD4+%低于非SAP亚组，IL-6、IL-10高于非SAP亚组（P<0.05）。Logistic回归分析示：第1天的IL-10是HLAP组发生重症胰腺炎的独立危险因素（OR=1.139, 95%CI: 1.038~1.251, P<0.05）；进一步行ROC曲线分析：IL-10预测重症胰腺炎发生的AUC=0.772，当IL-10为5.6 pg/mL时预测价值最高，敏感度及特异度分别为83.3%和68.8%。结论与NHLAP相比，HLAP患者T淋巴细胞亚群与细胞因子变化不同；IL-10可以作为HLAP患者早期病情严重程度的一项预测指标。