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  • 简介:AbstractBackground:The pathogenesis of osteosarcoma (OS) is still unclear, and it is still necessary to find new targets and drugs for anti-OS. This study aimed to investigate the role and mechanism of the anti-OS effects of miR-296-5p.Methods:We measured the expression of miR-296-5p in human OS cell lines and tissues. The effect of miR-296-5p and its target gene staphylococcal nuclease and tudor domain containing 1 on proliferation, migration, and invasion of human OS lines was examined. The Student’s t test was used for statistical analysis.Results:We found that microRNA (miR)-296-5p was significantly downregulated in OS cell lines and tissues (control vs. OS, 1.802 ± 0.313 vs. 0.618 ± 0.235, t= 6.402, P < 0.01). Overexpression of miR-296-5p suppressed proliferation, migration, and invasion of OA cells. SND1 was identified as a target of miR-296-5p by bioinformatic analysis and dual-luciferase reporter assay. Overexpression of SND1 abrogated the effects induced by miR-296-5p upregulation (miRNA-296-5p vs. miRNA-296-5p + SND1, 0.294 ± 0.159 vs. 2.300 ± 0.277, t= 12.68, P = 0.003).Conclusion:Our study indicates that miR-296-5p may function as a tumor suppressor by targeting SND1 in OS.

  • 标签: miR-296-5p Osteosarcoma SND1 Tumor suppressor miRNA
  • 简介:【摘要】目的:研究原发性高血压发病与循环miRNA-296-5p的相关性。方法:选取2019年3月-2021年2月我院收治的60例原发性高血压患者,均纳入研究组,选取同期收治的60例未合并高血压心血管疾病患者,纳入对照组,收集两组患者的病史、用药等资料,并进行对比,同时对比两组患者血浆miRNA-296-5p表达水平的差异性。结果:两组收缩/舒张压对比,研究组高于对照组(P<0.05);研究组钙通道阻滞剂使用率63.33%高于对照组的31.67%(P<0.05)。研究组患者的miRNA-296-5p水平为(0.241±0.015),明显高于对照组的(0.059±0.003),有统计差异性(P<0.05)。结论:原发性高血压发病与循环miRNA-296-5p含量的增加密切相关。

  • 标签: miRNA-296-5p 原发性高血压 发病机制 相关性
  • 简介:摘要目的探讨miRNA-296-5p(miR-296-5p)对缺氧诱导的胰腺癌细胞迁移、侵袭的影响及其相关机制。方法选择人胰腺癌细胞株PANC-1;收集上海市奉贤区中心医院和蚌埠医学院附属第一医院2010年1月至2014年12月55例胰腺癌患者手术切除的胰腺癌组织和10例癌旁正常胰腺组织。采用免疫组织化学及原位杂交法检测胰腺癌及癌旁正常胰腺组织芯片中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、miR-296-5p的表达水平,分析二者的相关性及其与患者临床病理特征的关系。PANC-1细胞分为缺氧组和常氧组,采用Transwell法测定两组细胞迁移与侵袭能力,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测两组细胞miR-296-5p及HIF-1α mRNA表达。转染小干扰RNA(siRNA)干扰HIF-1α的表达,将细胞分为PANC-1组(空白对照)、PANC-1-NC组(阴性对照)、PANC-1-siRNA组,检测miR-296-5p的表达;同时转染miR-296-5p激动剂和抑制剂,分为Agomir-miR-296-5p组(激动剂组)、Agomir-miR-296-5p-NC组(激动剂阴性对照组)、Antagomir-miR-296-5p组(抑制剂组)、Antagomir-miR-296-5p-NC组(抑制剂阴性对照组);Transwell法检测各组细胞迁移和侵袭能力。采用荧光素酶报告基因系统验证miR-296-5p启动子区是否存在HIF-1α的结合位点。结果胰腺癌组织HIF-1α高表达率高于癌旁正常胰腺组织[81.8%(45/55)比0(0/10),P<0.01];胰腺癌组织miR-296-5p高表达率低于癌旁正常胰腺组织[12.7%(7/55)比90.0%(9/10),χ2=27.23,P<0.01]。HIF-1α表达和miR-296-5p表达呈负相关(r=-0.53,P<0.01);miR-296-5p低表达与肿瘤长径、TNM分期、淋巴结转移均有关(均P<0.05)。常氧组PANC-1侵袭细胞数为(15.3±2.1)个,缺氧组为(24.7±1.5)个,差异有统计学意义(t=0.26,P=0.003);常氧组PANC-1迁移细胞数为(20.7±3.8)个,缺氧组为(32.7±1.2)个,差异有统计学意义(t=5.25,P=0.006)。常氧组PANC-1细胞HIF-1α mRNA相对表达量为0.30±0.02,缺氧组为1.00±0.01,差异有统计学意义(t=56.45,P<0.01);常氧组PANC-1细胞miR-296-5p相对表达量为3.05±0.20,缺氧组为1.14±0.04,差异有统计学意义(t=16.05,P<0.01)。PANC-1组、PANC-1-NC组、PANC-1-siRNA组侵袭细胞数分别为(24.7±1.5)个、(25.7±1.5)个、(12.0±1.7)个,差异有统计学意义(F=68.13,P<0.01),PANC-1-siRNA组较PANC-1组细胞侵袭能力下降(t=9.50,P=0.001);迁移细胞数分别为(32.7±1.2)个、(37.0±1.0)个、(17.3±1.2)个,差异有统计学意义(F=262.09,P<0.01),PANC-1-siRNA组较PANC-1组细胞迁移能力下降(t=16.26,P<0.01)。Antagomir-miR-296-5p组与PANC-1组比较,细胞侵袭和迁移能力增强(均P<0.05);Agomir-miR-296-5p组与PANC-1组比较,细胞侵袭和迁移能力减弱(均P<0.05)。荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性结果显示,miR-296-5p存在与HIF-1α结合的靶点。结论HIF-1α通过负向调控miR-296-5p在缺氧诱导的胰腺癌细胞的侵袭、迁移中发挥重要作用。

  • 标签: 胰腺肿瘤 缺氧诱导因子1,α亚基 微RNAs miRNA-296-5p
  • 简介:摘要目的探讨血清miRNA-9-5p(miR-9-5p)、miRNA-21-5p(miR-21-5p)和miRNA-3923(miR-3923)对子宫颈癌的诊断价值。方法收集2016年7月至2018年6月山西省肿瘤医院收治的100例子宫颈癌患者(子宫颈癌组)和同期100名健康体检者(健康对照组)资料。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)结合探针杂交检测子宫颈癌患者石蜡包埋组织和健康对照者子宫颈脱落细胞中人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA的表达水平,以Ct值≤40个循环为HPV E6/E7阳性。取3例子宫颈癌患者与3名健康对照者血清样本,采用微RNA(miRNA)Array检测384个miRNA基因表达量,并进行差异miRNA表达筛选及聚类分析,采用qRT-PCR对筛选的miRNA进行验证。绘制最终筛选的各miRNA及HPV E6/E7单独或联合诊断子宫颈癌的受试者工作特征(ROC)曲线,比较诊断子宫颈癌效能。结果100例子宫颈癌患者石蜡包埋组织中,HPV E6/E7阳性65例(65%);100名健康对照者子宫颈脱落细胞HPV E6/E7均为阴性。3例子宫颈癌患者与3名健康对照者血清样本中发现248个差异表达的miRNA,经聚类分析鉴定出前16个调控异常miRNA。经qRT-PCR验证,确认在健康对照组和子宫颈癌组中miR-9-5p、miR-21-5p和miR-3923表达水平差异均有统计学意义(均P<0.01),选取三者用于后续子宫颈癌的诊断。与健康对照组比较,HPV E6/E7阳性子宫颈癌组miR-9-5p、miR-21-5p和miR-3923表达水平均增高(均P<0.05),HPV E6/E7阴性子宫颈癌组miR-21-5p和miR-3923表达水平均增高(P=0.008和P=0.038);HPV E6/E7阳性组3个miRNA表达水平均高于HPV E6/E7阴性组(均P<0.05)。经ROC曲线分析,miR-9-5p、miR-21-5p和miR-3923单独诊断子宫颈癌时,miR-3923的曲线下面积(AUC)最大(0.843),特异度也最高(82%,截断值为2.88);miR-21-5p的灵敏度最高(85%,截断值为4.08);3个miRNA联合诊断子宫颈癌的AUC(0.924)和灵敏度、特异度(85%、94%,截断值为4.04)均高于单一指标。HPV E6/E7单独诊断的AUC为0.766,miR-9-5p、miR-21-5p、miR-3923分别联合HPV E6/E7的诊断效能进一步增高,AUC分别为0.914、0.848和0.932;四者联合的诊断效能最高,AUC为0.942。结论miR-9-5p、miR-21-5p和miR-3923可能有助于子宫颈癌诊断。

  • 标签: 宫颈肿瘤 微RNAs 乳头瘤病毒E6蛋白质类 乳头瘤病毒E7蛋白质类 诊断
  • 简介:摘要目的通过检测类风湿关节炎(RA)患者血浆外泌体中miRNA-146a-5pmiRNA-155-5p的表达,探讨其在RA发病中的作用。方法采用Qiagen外泌体提取试剂盒提取56例RA患者和24例健康者血浆中的外泌体,以miRNA-451a作为内源性参考对照,实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测外泌体中miRNA-146a-5pmiRNA-155-5p的相对表达量,使用2-△△Ct法计算相对表达水平。结果RA患者外泌体中miRNA-146a-5pmiRNA-155-5p的相对表达量均显著高于健康对照组[13.662(6.058,30.801)vs 5.261(2.453,12.103)和33.354(15.087,275.309)vs 11.684(1.551,17.221),P均<0.05],且活动期RA组中二者的相对表达量也明显高于稳定期RA组[27.542 (13.905,87.017) vs 7.217 (5.218,13.697)和155.110 (35.600,437.745) vs 15.526 (10.628,24.504),P均<0.05]。外泌体中miRNA-146a-5pmiRNA-155-5p水平与基于C反应蛋白的28个关节疾病活动性评分(DAS28-CRP)、基于红细胞沉降率的28个关节疾病活动性评分(DAS28-ESR)、关节压痛数(tender joint count,TJC)和关节肿胀数(swollen joint count,SJC)均呈正相关。RA组和健康对照组外泌体浓度[660.381 (581.212, 807.308) μg/ml vs 675.897 (559.328, 752.316) μg/ml],以及活动期RA组和稳定期RA组外泌体的浓度[634.963 (561.095, 756.107) μg/ml vs 676.374 (589.167, 898.333) μg/ml]差异均无统计学意义(P>0.05)。结论miRNA-146a-5pmiRNA-155-5p在RA患者血浆外泌体中明显高表达,且在活动期RA组中的表达明显高于稳定期RA组,提示血浆外泌体miRNA-146a-5pmiRNA-155-5p可能在RA发病中起重要作用,且与疾病活动度有关。

  • 标签: 类风湿关节炎 外泌体 微小RNA
  • 简介:AbstractObjective:The objective of this study was to investigate the expression levels of microRNA-141-5p(miRNA-141-5p), MAPK1 and neutrophil elastase in patients with and without preeclampsia (PE), and the relationship between miRNA-141-5p and MAPK1 with respect to the secretion of elastase by neutrophils in patients with PE.Methods:Thirty patients with PE and 30 healthy pregnant (HP) women were recruited from The Second Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan, China, between February 2017 and July 2018. Neutrophils were isolated from 8 mL peripheral blood samples and cultured. We recorded neutrophil count and morphology during culture. Apoptosis was detected by flow cytometry in different groups at 0, 24, and 48 h. The expression levels of elastase were detected in neutrophils by enzyme-linked immunosorbent assay, whereas the expression levels of miRNA-141-5p in peripheral blood neutrophils were detected by real-time polymerase chain reaction. We used TargetScanHuman Release 7.2 to analyze the target genes of miRNA-141-5p. The expression of MAPK1 in peripheral blood neutrophils was detected by western blotting. Data were analyzed by SPSS version 21.0 software, and comparisons between groups were carried out with the Student t test.Results:There was no significant difference between the PE and HP groups (P > 0.050) with regard to age or body mass index. The weight of newborns in the PE group (2846.00 ± 600.00 g) was significantly lower than that in the HP group (3055.00 ± 230.68 g). The number of neutrophilic granulocytes(NGs) in blood samples from the PE group was significantly higher than that in the HP group (P = 0.003). There was no significant difference between the groups with regard to morphology. Apoptosis in the PE group was delayed when compared with the HP group at different time points. The P value of apoptosis in the PE and HP groups were respectively 0.790, < 0.001 and 0.030 at 0 h, 24 h and 48 h. The expression levels of miRNA-141-5p in the PE group were significantly lower than those in the HP group (P < 0.050). The expression levels of MAPK1 in neutrophils from the PE group were significantly higher than those in the HP group (P < 0.050) by western blot. The expression levels of elastase in neutrophils from the PE group were significantly higher than those in the HP group (P < 0.050). Furthermore, the number of NGs in peripheral blood from the PE group was higher than that of the HP group; however, the levels of apoptosis were lower. The expression levels of miRNA-141-5p in NGs decreased, the expression of MAPK1 increased, and the secretion of neutrophil elastase in the NG medium increased in the PE group than those in the HP group.Conclusion:Collectively, our analysis suggested that miRNA-141-5p may be involved in the pathogenesis of PE by regulating the MAPK1 signaling pathway to activate neutrophils and increase the secretion of elastase.

  • 标签: Preeclampsia Neutrophil miRNA-141-5p MAPK1 Neutrophil elastase
  • 简介:一台康佳P34FM296彩电,图像上残留有上一幅图像,如图1所示。怀疑数码板有问题,从保修站购买一块换上后故障依旧,现在不知道该检查哪里?希望大家能够帮忙分析一下,在此先谢谢了!(双喜维修)

  • 标签: 故障检修 彩电 康佳 图像 数码
  • 简介:摘要目的探讨微小RNA(miRNA)-6516-5p在肾癌细胞系中的表达及调控肾癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肾癌细胞系和正常近端肾小管上皮细胞系中miR-6516-5p的表达。用脂质体法分别将miR-6516-5p模拟物和无意义序列(NC)瞬时转染至miR-6516-5p表达最低的肾癌细胞,即miR-6516-5p组和NC组。qRT-PCR检测转染细胞miR-6516-5p的表达。CCK-8法和Transwell迁移实验检测转染细胞的增殖和迁移。生物信息学软件和双荧光素酶基因报告实验分别预测和验证miR-6516-5p对靶基因的调控。qRT-PCR和Western blotting法分别检测转染细胞中靶基因的表达。计量资料以均数±标准差(±s)表示,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果miR-6516-5p在肾癌细胞系中的表达均明显低于正常近端肾小管上皮细胞(P<0.01),786-O细胞中miR-6516-5p的表达最低(F=27.69,P<0.01)。NC组和miR-6516-5p组786-O细胞中miR-6516-5p的表达分别为1.01±0.08和9.91±1.16,与NC组比较,miR-6516-5p组786-O细胞中miR-6516-5p表达明显增加(t=7.63,P<0.01)。上调miR-6516-5p能显著抑制786-O细胞的增殖(P<0.05)。NC组和miR-6516-5p组细胞迁移数分别为(85.65±8.77)个和(28.05±6.20)个,过表达miR-6516-5p可抑制786-O细胞的迁移(t=5.36,P<0.01)。miR-6516-5p的靶基因可能是鸟氨酸脱羧酶1(ODC1),miR-6516-5p能显著抑制野生型ODC1-3′UTR的荧光素酶活性(t=9.83,P<0.01)。上调miR-6516-5p可降低786-O细胞中ODC1 mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。结论miR-6516-5p在肾癌细胞系中表达降低,miR-6516-5p通过靶向ODC1抑制肾癌786-O细胞的增殖和迁移,miR-6516-5p可能成为肾癌潜在的分子靶点。

  • 标签: 肾肿瘤 miR-6516-5p 鸟氨酸脱羧酶1 细胞增殖 细胞迁移
  • 简介:摘要目的探讨miR-182-5p对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖和侵袭的影响,并探讨其可能的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测ESCC组织和细胞中miR-182-5p的表达。将miR-182-5p抑制剂、miR-182-5p模拟物及阴性对照转染食管鳞癌Eca109和TE1细胞,RT-qPCR检测转染后ESCC细胞中miR-182-5p的表达水平,细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测ESCC细胞的增殖能力,Transwell小室法检测ESCC细胞的侵袭能力。双荧光素酶报告实验分析miR-182-5p与细胞黏附分子2(CADM2)的相互作用,RT-qPCR检测ESCC组织中CADM2的表达,并分析其与miR-182-5p表达的相关性。Western blot检测转染后CADM2、粘着斑激酶(FAK)、p-Akt和Akt蛋白的表达。结果ESCC组织中miR-182-5p的相对表达水平为2.180±1.295,显著高于正常组织(0.890±0.284,P<0.001)。miR-182-5p高表达ESCC患者的生存率低于低表达患者(P<0.05)。ESCC组织中miR-182-5p的表达与ESCC的TNM分期和淋巴结转移有关关(均P<0.05)。ESCC细胞EC9706、Eca109、TE1、KYSE450和KYSE70中miR-182-5p的相对表达水平分别为2.449±0.082、2.965±0.088、4.873±0.258、1.338±0.045和1.999±0.082,均高于正常食管上皮细胞Het-1A(0.989±0.087,均P<0.01)。miR-182-5p抑制剂组Eca109和TE1细胞中miR-182-5p的表达下调,细胞的增殖和侵袭能力降低,而miR-182-5p模拟物组Eca109和TE1细胞中miR-182-5p的表达上调,细胞的增殖和侵袭能力增强。双荧光素酶报告实验显示,在CADM2 3′非翻译区-野生型载体和miR-182-5p模拟物共转染后,Eca109和TE1细胞中荧光素酶的活性显著降低(P<0.01),CADM2是miR-182-5p的直接作用靶点。ESCC组织中CADM2 mRNA的相对表达水平为0.190±0.143,显著低于正常组织(0.845±0.327,P<0.001)。ESCC组织中miR-182-5p和CADM2的表达呈负相关(r=-0.5004,P<0.001)。ESCC组织中CADM2表达与ESCC的TNM分期和淋巴结转移均密切相关(P<0.05)。CADM2高表达ESCC患者的生存率高于低表达患者(P<0.05)。miR-182-5p抑制剂组CADM2蛋白表达上调,FAK、p-Akt和Akt蛋白表达下调,而miR-182-5p模拟物组CADM2蛋白表达下调,FAK、p-Akt和Akt蛋白表达上调。结论miR-182-5p参与ESCC的发生发展过程,有望成为ESCC潜在的分子治疗靶点。

  • 标签: miRNA-182-5p 食管鳞癌 细胞增殖 细胞侵袭 细胞黏附分子2
  • 简介:摘要目的探讨胃癌患者微小RNA(miRNA)-21和miRNA-335-5p表达与胃蛋白酶原(PG)和胃泌素17(G-17)的相关性。方法选择临海市第二人民医院2019年1月至2021年1月收治的胃癌患者61例为研究对象,选择同期该院健康体检者60例作为对照组。采用乳胶增强免疫比浊法测定PGⅠ、PGⅡ和G-17水平;采用qRT-PCR法测定miRNA-21和miRNA-335-5p表达。比较两组PGⅠ、PGⅡ和G-17水平,miRNA-21和miRNA-335-5p表达;miRNA-21和miRNA-335-5p诊断胃癌灵敏度和特异度;分析miRNA-21和miRNA-335-5p与PGⅠ、PGⅡ和G-17的相关性。结果胃癌组血清PGⅠ[(54.36±9.89)μg/L]、G-17[(13.74±1.89)pg/mL]均低于对照组的(112.31±23.24)μg/L和(18.75±2.36)pg/mL;PGⅡ[(24.35±4.53)μg/L]高于对照组的(20.37±3.28)μg/L,两组差异均有统计学意义(t=17.89、12.90、5.52,均P < 0.05)。胃癌组miRNA-21 mRNA相对表达量[(3.42±0.61)]高于对照组的(0.53±0.12);miRNA-335-5p mRNA相对表达量[(0.32±0.17)]低于对照组的(1.65±0.35),两组差异均有统计学意义(t=30.01、26.65,均P < 0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,miRNA-21诊断胃癌灵敏度为74.36%,特异度为68.18%;miRNA-335-5p诊断胃癌灵敏度为79.49%,特异度为60.90%。miRNA-21与PGⅠ和G-17呈线性负相关(r=-0.82、-0.74),而与PGⅡ呈线性正相关(r=0.76);miRNA-335-5p与PGⅠ和G-17呈线性正相关(r=0.79、0.72),而与PGⅡ呈线性负相关(r=-0.70)。结论胃癌患者miRNA-21高表达,而miRNA-335-5p低表达,且与PG和G-17具有明显相关性,可作为诊断胃癌有效指标,研究成果具备显著创新性和科学性。

  • 标签: 胃肿瘤 微RNAs 微小RNA-21 微小RNA-335-5p 胃蛋白酶原Ⅰ 胃蛋白酶原Ⅱ 胃泌素17 相关性
  • 简介:摘要目的初步探讨miRNA(miR)-193b-5p对黑素合成的影响及可能机制。方法从健康男性包皮环切术后废弃的正常包皮组织中分离培养人原代黑素细胞。分别转染miR-NC模拟物(miR-NC mimics组)和miR-193b-5p模拟物(miR-193b-5p mimics组)至人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞,转染48 h时实时定量PCR(RT-qPCR)检测miR-193b-5p的过表达效率,转染72 h时Western印迹检测黑素合成相关蛋白酪氨酸酶和小眼畸形相关转录因子的表达,转染1周时采用氢氧化钠法测定细胞中黑素含量。通过TargetScan网站预测miR-193b-5p的靶基因并采用双荧光素酶报告实验验证,RT-qPCR及Western印迹检测miR-193b-5p过表达后该靶基因mRNA和蛋白表达水平的变化。两组间比较采用两独立样本t检验。结果人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞中,miR-193b-5p mimics组miR-193b-5p的表达水平均显著高于miR-NC mimics组,t值分别为65.57、22.49,均P < 0.001,且miR-193b-5p mimics组黑素含量(0.091 ± 0.007、0.130 ± 0.004)显著低于miR-NC mimics组(0.117 ± 0.002、0.188 ± 0.032),t值分别为5.98、3.24,P值分别< 0.01、< 0.05。Western印迹检测显示,人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1细胞中,miR-193b-5p mimics组黑素合成相关蛋白酪氨酸酶及小眼畸形相关转录因子的表达均显著低于miR-NC mimics组(均P < 0.05)。通过TargetScan预测及双荧光素酶报告实验验证,转录调节因子CITED2的3′非翻译区存在miR-193b-5p的结合位点。人原代黑素细胞及人黑素瘤MNT1中上调miR-193b-5p表达后,CITED2 mRNA及蛋白的表达水平均显著低于miR-NC mimics组(均P<0.05)。结论miR-193b-5p过表达可下调黑素合成相关蛋白酪氨酸酶及小眼畸形相关转录因子的表达,抑制黑素合成,该过程与靶向抑制CITED2的表达有关。

  • 标签: 黑素细胞 黑素瘤细胞 黑素合成 CITED2 miRNA-193b-5p
  • 简介:摘要目的本研究主要目的是构建骨肉瘤细胞的基因表达谱,探究miRNA-744-5P与骨肉瘤患者转移及预后情况的相关性。方法购买并培养4种骨肉瘤细胞系分别是高转移性的U20S、SAOS2,低转移性的MG63、HOS。收集高转移性的骨肉瘤细胞与低转移性的骨肉瘤细胞上清各1000ml,经超高速离心法分离外泌体后,送苏州泓迅生物科技公司高通量测序及实时定量分析。结果根据高通量测序结果及实时定量结果,发现不同转移性的骨肉瘤细胞系外泌体中miRNA-744-5P表达具有显著差异,高转移性细胞系上清中miRNA-744-5P比低转移性细胞系提高了2.95±0.68倍。转染后高转移性的U2OS及SAOS2细胞系在Transwell上室中的细胞数量明显减少。

  • 标签: 外泌体 miRNA 骨肉瘤
  • 简介:MicroRNAs(miRNA)指导在基因表示的一个重要角色在植物为到环境条件的发展进程和回答要求了的顺序特定的posttranscriptional基因silencing玩。然而,很少对transcriptional和miRNA表示的posttranscriptional规定被知道。Histoneacetylation在染色质改变起一个重要作用并且为基因激活被要求。由在Arabidopsis的异种分析miRNAs和相应主要miRNAs的子集的累积,我们显示出那histoneacetyltransferaseGCN5(一般控制非镇压的protein5)在miRNA上有一般压抑的效果生产,当它为一个子集的表示被要求时(例如压力可诱导)MIRNA基因。在miRNA生产的GCN5的一般否定功能多半通过象DICERLIKE1(DCL1)那样的miRNA机械基因的间接压抑被完成,有锯齿(SE),偏下性的LEAVES1(HYL1)和ARGONAUTE1(AGO1)。染色质immunoprecipitation试金表明GCN5指向到MIRNA基因的一个子集并且为在这些loci的histoneH3离氨酸14的acetylation被要求。而且,由trichostatin的histonedeacetylation的抑制一个处理或在histonedeacetylase,基因异种损害了某些miRNAs的累积。这些数据一起建议ArabidopsisGCN5在transcriptional和posttranscriptional层次防碍miRNA小径,histoneacetylation/deacetylation是涉及miRNA的规定的epigenetic机制生产。

  • 标签: 组蛋白乙酰转移酶 MIRNA 拟南芥 通路 干扰
  • 作者: 宁俊杰 乔莉娜 李雪梅
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2023-03-15
  • 出处:《中华神经科杂志》 2023年第02期
  • 机构:四川大学华西第二医院儿童重症医学科 出生缺陷与相关妇儿疾病教育部重点实验室 国家卫生健康委员会时间生物学重点实验室(四川大学),成都 610041,四川省自贡市第一人民医院儿科,自贡643000
  • 简介:摘要目的分析5号染色体短臂(5p)末端的5p15.1-5p15.33重复患儿的临床特点及遗传学特征。方法收集四川大学华西第二医院儿童重症医学科于2021年7月确诊的存在5p15.1-5p15.33重复的1例患儿,总结其临床资料,并对文献报道的5p重复综合征的病例特点进行总结分析。结果患儿为男性,就诊时1岁5个月,以出生后逐渐出现生长受限及发育迟缓为主要临床表现,伴颅面畸形;7月龄时因四肢抽动被诊断为癫痫;目前为2岁龄,仍反复抽搐,不能抬头、独坐,不会爬,不会咿呀说话,伴肌张力减退。反复行头颅磁共振成像检查均示胼胝体发育不良。患儿父母表型正常。患儿拷贝数变异测序结果显示染色体5p15.1-5p15.33(chr5:1934522-18905656)存在部分重叠,根据拷贝数变异评判标准,判定为致病拷贝数变异,父母未检出异常。根据本研究设定的检索策略,共检索到10篇相关文献(均为英文)报道的17例及数据库中收录的4例,加上本例,共22例5p重复综合征患者,其中17例年龄≤14岁,起病年龄7(0,18)岁,男女比约为1.1∶1。22例患者中颅面畸形19例,发育障碍18例,骨骼/肌肉发育异常15例,自闭症11例,注意力缺陷多动障碍9例,智力障碍8例,肥胖症5例,癫痫5例,先天性心脏发育异常2例,肌张力减退4例,斜视/远视2例,表现为胼胝体发育不良、内分泌功能紊乱、腹股沟疝、脐疝各1例;多发畸形19例,单一畸形3例。结论5p15.1-5p15.33重复可能为该患儿的遗传学病因。面部畸形、发育迟缓、骨骼/肌肉发育异常、智力残疾、自闭症谱系障碍、注意力缺陷多动障碍是5p拷贝数重复最主要的临床表型;胼胝体发育不良可能为该位置染色体重复的扩展表型。

  • 标签: 染色体,人,5对 婴儿 发育障碍 癫痫 染色体片段重复 拷贝数变异 病例报告
  • 简介:摘要目的探讨血清外泌体miRNA-155-5p(miR-155-5p)表达与食管鳞状细胞癌(ESCC)患者预后的关系。方法收集2014年10月至2015年12月福建省肿瘤医院收治的336例ESCC患者标本,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清外泌体miR-155-5p的相对表达量。用X-tile软件获得血清外泌体miR-155-5p表达水平的截断值,根据最佳截断值分为miR-155-5p低表达组和高表达组。运用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,采用Cox比例风险回归模型进行生存分析。结果采用X-tile软件获得血清外泌体miR-155-5p表达水平的截断值为2.340。根据此截断值将患者分为miR-155-5p低表达组(<2.340)51例和高表达组(≥2.340)285例。两组患者年龄(χ2=0.020,P=0.887)、性别(χ2=0.283,P=0.595)、肿瘤部位(χ2=0.063,P=0.977)、分化程度(P=0.474)、临床分期(χ2=3.996,P=0.136)和是否手术治疗(χ2=0.941,P=0.332)比较,差异均无统计学意义。血清外泌体miR-155-5p高表达组患者的死亡风险比低表达组高(HR=1.763,95% CI 1.049~2.961,P=0.032)。结论血清外泌体miR-155-5p表达水平高与ESCC不良预后相关,可作为ESCC患者预后的新型标志物。

  • 标签: 食管肿瘤 癌,鳞状细胞 血清 外泌体 微RNAs 预后
  • 简介:摘要目的探讨miRNA-5089-5p(miR-5089-5p)体外对食管癌细胞增殖和迁移能力的影响及其与组织蛋白酶B(CTSB)基因表达的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测2017年3月至2019年12月鄂东医疗集团黄石市中心医院食管癌手术切除癌组织标本及相应癌旁组织标本31例,以及食管癌TE-13、EC9706、Eca109、KYSE30细胞株和正常食管黏膜上皮HET-1A细胞miR-5089-5p的表达水平。选择miR-5089-5p表达量最低的食管癌细胞,分为两组,分别转染miR-5089-5p模拟物(miR-5089-5p组)及其阴性对照序列(阴性对照组);转染48 h后,qRT-PCR检测两组细胞miR-5089-5p表达水平;采用CCK-8法和划痕愈合实验分别检测两组细胞的增殖和迁移能力。用microRNA.org、Deepbase v2.0在线工具预测miR-5089-5p的靶基因,并采用双荧光素酶报告基因实验进行验证。qRT-PCR和蛋白质印迹法检测miR-5089-5p组、阴性对照组细胞靶基因的表达水平,同时采用蛋白质印迹法检测两组细胞增殖相关蛋白PCNA、Ki-67和迁移相关蛋白N-Cadherin、Twist表达。结果食管癌患者癌组织和癌旁组织中miR-5089-5p的相对表达量分别为1.54±0.53和7.07±1.25(t=24.06,P<0.01);各食管癌细胞株miR-5089-5p相对表达量均低于正常食管黏膜上皮HET-1A细胞(均P<0.05),相对表达量最低的是Eca109细胞(0.12±0.03)。与阴性对照组相比,随着转染时间延长,miR-5089-5p组Eca109细胞增殖能力逐渐降低,从48 h开始两组间差异均有统计学意义(均P<0.05);迁移能力亦降低[细胞划痕愈合率:(29±5)%比(64±8)%,t=3.91,P<0.01]。在线工具预测miR-5089-5p的靶基因可能是CTSB,双荧光素酶报告基因实验证实miR-5089-5p互补结合CTSB 3'UTR。qRT-PCR检测显示,与阴性对照组相比,miR-5089-5p组Eca109细胞CTSB mRNA相对表达量降低(0.23±0.04比1.01±0.09,t=8.27,P<0.01),蛋白质印迹法检测显示,CTSB蛋白表达水平亦降低,同时细胞增殖相关蛋白PCNA、Ki-67和细胞迁移相关蛋白N-Cadherin、Twist表达水平均降低。结论食管癌患者癌组织和细胞株中miR-5089-5p均低表达,miR-5089-5p能抑制食管癌Eca109细胞增殖和迁移能力,此作用可能是通过下调CTSB基因表达实现的。

  • 标签: 食管肿瘤 微RNAs 组织蛋白酶B miR-5089-5p
  • 简介:摘要目的研究特发性肺动脉高压(IPAH)患者血浆中的miRNA-548a-5p预测血流动力学恶化的价值。方法回顾性纳入2010年5月至2017年6月在上海市肺科医院住院的12例IPAH患者及12名对照者。所有患者均进行了右心导管检查。通过miRNA微阵列基因芯片分析患者和正常对照差异表达的miRNA。线性回归分析miRNA-548a-5p对血流动力学相关参数升高的预测作用。受试者工作特征曲线分析miRNA-548a-5p鉴别患者和对照人群效能。结果IPAH患者和对照人群的一般情况差异无统计学意义。IPAH组miRNA-548a-5p表达明显高于对照组(t=3.038,P<0.05)。部分血流动力学参数和miRNA-548a-5p呈良好的相关性。多重线性回归分析提示miRNA-548a-5p表达水平是预测IPAH患者平均肺动脉压和肺血管阻力升高的独立预测因子。受试者工作特征曲线分析结果显示miRNA-548a-5p的临界值为10.5,其表达水平升高,血流动力学恶化。结论血浆中miRNA-548a-5p可能是预测IPAH患者血流动力学恶化的生物标志物。

  • 标签: 特发性肺动脉高压 miRNA-548a-5p 血流动力学 肺血管阻力