简介：[摘 要]  目的 将小鼠Sox2基因、穿膜肽TAT以及小分子泛素样修饰蛋白SUMO融合并转入大肠杆菌中进行表达，最终获得大量具有高效穿膜活性的Sox2蛋白。 方法 利用PCR技术扩增得SUMO-TAT融合基因，并插入到pET-3c载体。再通过扩增获得小鼠Sox2基因，将其与pET3c-SUMO-TAT基础载体连接，构建得重组表达载体pET3c-SUMO-TAT-Sox2，然后转化到Rosseta(DE3)表达菌中，经IPTG诱导表达，使用Ni-NTA亲和层析进行分离纯化。 结果 成功构建了pET3c-SUMO-TAT-Sox2原核表达载体，经终浓度为1 mmol /L的IPTG诱导4 h后表达约为57kDa的融合蛋白，以包涵体形式存在，Western Blotting检测显示良好特异性，经300 mmol/L咪唑洗脱可获得纯度较高的SUMO-TAT-Sox2融合蛋白。 结论 得到大量带有穿膜肽TAT的融合蛋白Sox2，为今后利用重编程因子融合蛋白诱导体细胞重编程为iPS细胞奠定基础。

简介：6ml/瓶）、药物含量、转染前细胞状态以及药物作用时间的长短等因素进行模型稳定性研究,转染后细胞接种到24孔板的浓度对药物抑制作用的影响确定了两种转染质粒的配比及转染过程中NCS含量关系,HIV-1Tat蛋白结合Tar的抗HIV-1药物筛选模型的构建经以上实验建立方法后

简介：摘要目的研究HAD和非HAD的艾滋病患者不同部位来源的Tat蛋白氨基酸位点变异及其对U87细胞氧化应激的影响。方法采用BLAST和MEGA6对一例HAD患者(H)和一例非HAD患者(N)的基底节(BG)、脾脏(SPL)共4个部位来源的HIV-1 Tat蛋白进行序列分析，研究其氨基酸位点变异，并将tat基因转染至U87细胞，显微镜观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein，GFP)初步判断Tat蛋白表达情况，Western blot检测细胞Tat蛋白的表达；并使用cck-8法、Western blot、MDA检测试剂盒研究不同部位Tat蛋白对细胞活性、氧化应激指标GPX、MDA水平的影响。结果氨基酸序列分析显示N-BG、N-SPL、H-BG、H-SPL来源的HIV-1 Tat蛋白关键氨基酸位点存在差异；Tat蛋白可抑制U87细胞的活性，抑制作用可以被抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)逆转。与对照组相比，四个实验组MDA水平均升高，GPX蛋白表达量均降低，差异具有统计学意义(P＝0.012，P＝0.004，P＝0.000，P＝0.003；P＝0.000，P＝0.016，P＝0.000，P＝0.021)；且不同部位的Tat蛋白诱导细胞氧化应激的能力不同，H-BG组MDA水平高于N-BG部位，差异具有统计学意义(P＝0.023)；且无论是HAD还是非HAD患者BG组GPX含量均低于SPL组，差异有统计学意义(P＝0.01，P＝0.007，P＝0.01，P＝0.007)。结论HAD及非HAD患者外周及中枢神经系统中的Tat蛋白关键氨基酸位点存在差异，对细胞氧化应激的影响也不同。

简介：6ml/瓶）、药物含量、转染前细胞状态以及药物作用时间的长短等因素进行模型稳定性研究,转染后细胞接种到24孔板的浓度对药物抑制作用的影响确定了两种转染质粒的配比及转染过程中NCS含量关系,HIV-1Tat蛋白结合Tar的抗HIV-1药物筛选模型的构建经以上实验建立方法后

简介：LIGAtechniquehasbeendevelopedsince1993atBSRF,includingthefabricationofLIGAmask,deepX-rayLithography,electroplating,thepouringmoldingandtheapplicationsinsomefields.TheLIGAmaskwithgoldabsorbingstructuresof20μmthicknessand5μmwidthandKaptonmembraneofaround5μmthicnesshasbeensuccessfullfabricatedandappliedtothedeepX-raylithographywiththePMMAstructureof1mmthicknessorobove.thebeamlineformawigglerisusedforthedeepX-raylithographyofLIGAstatiionandisopentootheinstitutesresearchingthedeepX-raylithography.ThenormalprocessofLIGAtechniquewiththeexceptionofmoldinghasbeenestablishedwiththePMMAstructuresof500μmthicknessatBSRF.ThelargestaspectratioofPMMAstructruescanreachabout50withtheheightof500μmandthelateralsiaeof10μm.Thenickelandcopperstructureswiththetheicknessof0.5mmand1mmhavebeenmadebyusingtheelectroplatingtechnique.TheSU8asaresistmaterialofdeepetchlithographywithUVlightisalsodevelopedinthefabricationofLIGAmaskandsomedevicesatBSRF.Electromagneticsteppingmicromotor,haetexchange,accelerator,structuresusedintheEDM(electrodischargemachinging)arebeingdevelopedforthefutureapplications.

简介：利用蛋白质转导结构域(PTDs)可以将与之融合表达的蛋白质直接送入细胞中.将通过筛选噬菌体展示锌指文库得到的特异作用于SV40启动子上9bp序列的三锌指结构的序列插入含有TAT蛋白的蛋白质转导结构域的表达载体pET-TAT-NLS中,构建融合蛋白的表达载体pET-TAT-NLS-clone3.融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中得到了可溶性表达,含量约占总蛋白的18%;并通过镍亲和凝胶层析柱得到了较好的纯化融合蛋白.

简介：目的探究TAT蛋白介导锰-超氧化物歧化酶（Mn-SOD）的可行性。方法建立插入TATPTDDNA序列的表达载体pT7460,将锰-超氧化物歧化酶（Mn-SOD）基因融合进入载体pT7460。应用层析方法提纯融合蛋白并用电泳分析。结果锰-超氧化物歧化酶（Mn-SOD）与TAT的融合蛋白表达在包涵体内。结论锰-超氧化物歧化酶（Mn-SOD）可与TAT形成融合蛋白。

简介：2005年10月，我们科室抢救了1例因脱敏注射TAT致过敏休克的病人，由于观查仔细，抢救及时，病人生命得以挽救，现报告如下。

简介：

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简介：摘要目的分析临床操作中可能产生破伤风抗毒素皮试阳性结果的原因，从而提出切实可行的改善措施。方法选择我院急诊科TAT皮试患者2000例进行归纳分析并提出改进措施。结果TAT皮试的高阳性率主要与护理因素相关，其次是患者本身因素。结论降低TAT皮试高阳性反应着重在于改善临床相关护理措施，考虑特定病人客观因素，正确规范判断TAT皮试结果。重视加强患者健康宣教。

简介：【摘要】目的：讨论血常规检验管理过程中应用PDCA循环模式对降低标本TAT的效果及作用。方法：抽取50例需实施血常规检验患者为对象，抽取时间即2019年2月至2021年2月，抽签方法将患者均分2组，对比组、讨论组，25例一组，对比组血常规检验期间实施普通管理，讨论组实施PDCA循环管理，比较二组血常规标本TAT情况。结果：讨论组的血常规标本TAT明显比对比组优，差异明显，P值＜0.05。结论：与普通管理相比，PDCA循环管理模式在临床上的应用更具优势，应用于血常规检验中后，其标本TAT达标情况良好。

简介：摘要HIV-1可穿过血脑屏障，感染中枢神经系统，引起一系列神经系统疾病。氧化应激(oxidative stress，OS)在不同的神经退行性疾病的发病机制中具有重要作用。当机体遭受各种有害刺激时，体内氧化系统和抗氧化系统的调控水平失衡，产生大量活性氧(reactive oxygen species, ROS)，从而直接或间接导致组织损伤。HIV-1感染细胞后释放的反式转录激活因子Tat蛋白对于脑组织的损伤具有重要作用，它可诱导血管内皮细胞和神经细胞产生ROS，使机体处于慢性氧化应激状态，加重疾病的发展。本文就HIV-1 Tat蛋白对血管内皮细胞和神经细胞氧化应激影响的研究进展进行综述。

简介：摘要目的统计检验科ISO15189质量管理体系运行前后不同项目急诊检验标本周转时间(Turn-Around Time, TAT)中位数、检验报告规定时限符合率、报告超时率，分析基层医院ISO15189质量管理体系对急诊检验TAT的管理效果，为持续提高基层医院检验科的服务能力提供客观依据。方法LIS系统导出检验项目的原始数据，利用mircosoft Excel 2019软件筛选出急诊数据，统计出各急诊项目的TAT，利用函数功能计算TAT中位数、检验报告规定时限符合率和检验报告超时率，列出报告超时原因并进行统计分析。结果ISO15189质量管理体系建立前(2018年1-10月)急诊检验各类项目的TAT中位数与ISO15189质量管理体系建立后(2019年1-10月)比较，除肌钙蛋白(CTNI)外，其他项目TAT均有不同程度缩短，差异具有统计学意义(P<0.05)；4个急诊项目的检验报告时限平均符合率从93.4%增高为96.8%，增高了3.4个百分点，主要超时原因前４位依次是标本量增加(64.1%)、可疑结果复检(16.3%)、仪器故障(14.2%)和工作人员岗位轮换(5.4%)。结论基层医院建立ISO15189质量管理体系可以缩短急诊检验项目的周转时间，提高医学实验室为临床服务的能力。

简介：Fortilinisamultifunctionalproteinimplicatedinmanyimportantcellularprocesses.SinceinjectionofPm-fortilinreducesshrimpmortalitycausedbywhitespotsyndromevirus(WSSV),thereispotentialapplicationoffortilininshrimpculture.Inthepresentstudy,inordertoimprovetrans-membranetransportationefficiency,theproteintransductiondomainofthetransactivatoroftranscription(TAT)peptidewasfusedtofortilin.ThePichiapastorisyeastexpressionsystem,whichiswidelyacceptedinanimalfeeds,wasusedforproductionofrecombinantfusionprotein.Greenfluorescenceprotein(GFP)wasselectedasareporterbecauseofitsintrinsicvisiblefluorescence.Thefortilin,TATandGFPfusionproteinwereconstructed.Theirtrans-membranetransportationefficiencyandeffectsonimmuneresponseofshrimpwereanalyzedinvitro.ResultsshowedthatTATpeptideimprovedinvitrouptakeoffortilinintothehemocytesandmidgutofLitopenaeusvannamei.Thephenoloxidase(PO)activityofhemocytesincubatedwithGFP-FortilinorGFP-Fortilin-TATwassignificantlyincreasedcomparedwiththatinthecontrolwithoutexpressedfortilin.ThePOactivityofhemocytesincubatedwith200μgmL-1GFP-Fortilin-TATwassignificantlyhigherthanthatinthegroupwiththesameconcentrationofGFP-Fortilin.HemocytesincubatedwithGFP-Fortilin-TATatallconcentrationsshowedsignificantlyhighernitricoxidesynthase(NOS)activitythanthoseinthecontrolorintheGFP-Fortilintreatment.ThepresentinvitrostudyindicatedthatTATfusionproteinimprovedtheimmuneeffectoffortilin.

简介：摘要目的探讨微柱凝胶技术与传统试管法抗人球蛋白试验技术在新生儿溶血病(HDN)中的检测效果。方法选取来自本院的新生儿溶血病患者及其母亲血液标本各一份，总共600份，检测新生儿与母亲血型是否相同，将ABO-HDN患者血液标本均分为两份，标记为传统检测组及凝胶技术组，每组各包含新生儿血液标本共295份，然后对传统检测组新生儿血液标本进行传统试管法抗人球蛋白试验技术(tubeanti-personglobulinexperimenttechnique,TAT)检测；凝胶技术组则进行微柱凝胶技术法(microcolumngelexperimenttechnique,MGT)检测。分析比较两组检测效果。结果血型检测结果为300例患儿中ABO-HDN295例（98.33%），RH-HDN4例（1.33%），其他新生儿溶血病患者1例（0.33%）；传统检测组295例标本中有197例（66.78%）被诊断为新生儿溶血病，低于凝胶技术组221例（74.92%）；传统检测组中直接Coombs试验阳性44例（14.92%）低于凝胶技术组68例（23.0%）；游离抗体试验阳性50例（16.95%）低于凝胶技术组110例（37.29%），抗体释放试验阳性197例（66.78%）低于凝胶技术组221例（74.92%），两组比较具有统计学意义（P<0.05）。结论微柱凝胶技术在新生儿溶血病(HDN)中的检测效果较传统试管法显著。

简介：建立了旋转振荡法配制弗氏不完全佐荆(IFA)抗原,并在精制破伤风抗毒素(TAT)生产中,与传统方法配制的IFA抗原进行比较。随机抽出40匹生产马(骡)分为两组,每组20匹,分别采用两方法配制的抗原实施免疫。于免疫第6程开始,两组再随机抽出10匹作为各自的实验组,辅以静脉注射小牛胸腺肤以提高其免疫血浆效价。结果:四组在小牛胸腺肽应用前的第5程,其免疫血浆效价比较(F=0.35,P>0.05)。至第11程四组比较(F=9.16,P<0.01)。提示:两方法在免疫及提高血浆效价方面,效果一致。本研究为实验室、尤其是临床血清生产中IFA抗原的制奋以及其他水油乳剂的乳化,提供了简便、快速,且能大量配制的可靠而有效的方法。

简介：摘要总结破伤风抗毒素致迟发过敏反应的护理。加强破伤风抗毒素致迟发过敏反应的观察与护理确保患者的生命安全。

简介：摘要生命对每个人只有一次，作为医务人员的职责就是要保护生命。过敏反应随时会危及生命，并且预见性差，一旦发生，患者及家属会惊慌、不理解，甚至责怪医院。现对我院门诊注射室2008年~2009年破伤风抗菌素注射情况进行观察，报告如下。

简介：摘要破伤风抗毒素（TAT）是一种免疫马血清，对人体是一种异体蛋白，具有抗原性，注射后容易出现过敏反应。因此，在用药前必须做过敏试验。破伤风抗毒素在外伤病人中的应用很普遍。我院从2014年10月开始使用江西生物研究所生产的TAT，参考说明书发现皮试液的配置和注入皮内的剂量与传统方法不同，为了比较阳性结果的差异性，特分组进行了对照比较，发现两组皮试结果存在明显差异。