简介：目的：用荧光定量RT－PCR（FQ－RT－PCR）法检测消化系统肿瘤患者mdr-1基因的表达，以了解该基因的表达水平。方法：用荧光定量RT－PCR（FQ－RT－PCR）方法。结果：75例本中mdr-1基因表达阳性率为37．3％（28／75），mdr-1基因平均表达量为10^4.88±1.15拷贝／ml。结论：FQ－PCR方法检测mdr-1基因表达具有简便，准确，特异性强，可定量等优点，对化疗方法的制定，疗效的预测及考察有重要指导作用。

简介：目的：对比分析酶联免疫吸附试验（ELISA）法和实时荧光定量PCR（RT-PCR）法在麻疹病毒检测中的应用。方法：由本市各医院采集并送至本中心接受麻疹病毒检测的50例疑似麻疹患者为研究对象，所有患者标本均采用ELISA法和RT-PCR法进行麻疹病毒检测。对比两种检测方式在不同出疹时间段所取标本的阳性率、检测水平。结果：在50例疑似麻疹患者中，ELISA法检测麻疹病毒IgM抗体阳性22例，IgM抗体阴性28例，阳性率为44.00%；RT-PCR法检测，麻疹病毒IgM抗体阳性26例，IgM抗体阴性24例，阳性率为52.00%，两种检测方式阳性率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。患者出疹第1天收集的标本，采用ELISA法检测阳性率为60.00%，采用RT-PCR法检测阳性率为80.00%。随着患者采样时间不断改变，两种检测方式的阳性率均逐渐降低，两种方法检测的阳性率比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。50例麻疹疑似患者同一时间段采集血清和咽拭子标本，24例患有免疫史，不伴随有免疫史亦或者是不详的共26例。结论：RT-PCR法适用于出疹时间在2d之内疑似麻疹患者的临床诊断中，而ELISA法则适合使用在出疹时间在2d或以上疑似麻疹患者的临床检测中。

简介：姚开虎副研究员非常高兴邀清到意大利佛罗伦萨大学附属AnnaMeyer儿童医院ChiaraAzzari教授来北京儿童医院做学术访问，在您的“侵袋性细菌感染的分子学诊断：一个有川的临床一具”的报告中谈到采用分子诊断方法评估意大利肺炎链球菌疾病负担的工作，这些经验对中国开展相关工作具有很好的借鉴意义。

简介：摘要本文通过荧光定量RT-PCR与常规RT-PCR，分别对191例临床粪便样本进行GⅠ、GⅡ型诺如病毒的快速检测，优化反应条件，筛选出最优反应体系，对两种方法的特异性、灵敏性进行检测分析。发现两种方法均可较好的检测出GⅠ、GⅡ型诺如病毒。其中常规RT-PCR阳性样本数为142，检出率为74.34%，最低检出限为103copies/μl，标准曲线均呈现出良好的线性关系，扩增效率分别为101.336%、103.558%；荧光定量RT-PCR的阳性样本为163，检出率为85.34%，最低检出限为102copies/μl，批内、批间重复试验的标准差范围为0.10～0.59，变异系数范围为0.43%～2.84%，重复性良好。两种方法检出率有显著差异（P＜0.05），且对星状病毒、腺病毒以及肠道病毒等均无交叉反应，GⅠ、GⅡ型诺如病毒之间也无交叉反应。荧光定量RT-PCR在灵敏度方面占优，建议在临床检测中应用。

简介：摘要目的探讨实时荧光（RT-PCR）法快速检测流感病毒在临床中的应用效果，为今后的流行病学监测提供思路。方法以我中心2014年1月至2014年12月期间采集的1355份流感样病例（ILI）及暴发疫点现患病例的咽拭子标本作为本组研究的观察对象，采用实时荧光RT-PCR方法对流感病毒核酸进行检测分型。结果本组1355份咽拭子标本中共检测出流感病毒核酸阳性573份，总阳性率为42.29%；其中甲型H1N1流感352份，B型76份，季节性流感H1亚型21份，季节性流感H3亚型124份。结论实时荧光RT-PCR法快速检测流感病毒的特异性与灵敏度均较高，而且操作方便，效率高，可以作为公共卫生应急疫情的实验室快速诊断方法。

简介：摘要新冠肺炎爆发，战“疫”是全世界面临的重要任务，而快速确诊是疫情防控的基础。根据《新型冠状病毒肺炎诊疗方案（试行第六版）》以及《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南（第四版）》记载，利用实时荧光 PCR进行核酸检验是主要诊断手段。作为当下新冠肺炎确诊的“金标准”，实时荧光 PCR功不可没。但通过新闻报道，我们不难发现当前诊断依然存在确诊慢、假阴性等问题。何为实时荧光 PCR？为何还不能完全快速准确地诊断新冠？如何改进？今天我们就从专利的视角，聚焦实时荧光 PCR，为大家揭开其神秘面纱。

简介：【摘要】 目的　探讨实时荧光定量PCR( RT-PCR)法与抗酸涂片染色法在支气管肺泡灌洗液中查结核分枝杆菌，辅助诊断肺结核的作用。方法　回顾性分析2022年1月至2023年12月在大理市第一人民医院住院的疑似肺结核患者279例，采用集菌涂片法、PCR实时荧光探针法同时检测病人肺泡灌洗液标本，对检测结果进行分析和比较。比较两种方法在肺泡灌洗液标本中检测结核分枝杆菌的准确率、敏感性及特异性。结果　RT-PCR法检测肺结核患者肺泡灌洗液结核分枝杆菌的检出准确率、敏感性和特异性均高于抗酸涂片染色法(P<0.05)。结论 RT-PCR法检测肺泡灌洗液标本中的MTB，具有快速、诊断准确率、灵敏度和特异性较高的优点，可提高肺泡灌洗液标本中MTB的检出率并能减少误诊和漏诊的发生。

简介：摘要目的利用多重荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析急性下呼吸道感染患儿4种病毒：人腺病毒(HADV)、人博卡病毒(HBoV)、人偏肺病毒(HMPV)、人呼吸道合胞病毒(HRSV)的感染情况。方法收集1 045例急性呼吸道感染的住院患儿鼻咽深部分泌物标本，采用多重荧光RT-PCR进行呼吸道病毒4项指标检测，就病毒分布情况、季节因素等方面进行临床流行病学特点分析。结果1 045例患儿中有281例4种呼吸道病毒阳性，总阳性率为26.89%；其中单一病毒感染194例(69.04%)、混合病毒感染87例(30.96%)，HMPV感染最多，为120例(42.70%)、其次为HRSV感染119例(42.35%)；在各年龄组中≤3岁组阳性229例(36.06%)，4～7岁组阳性114例(42.22%)，≥8岁组阳性63例(45.00%)。从季节分布来看，春、夏、秋、冬四季的检出率分别为25.68%、28.24%、49.34%、65.57%。结论多重荧光RT-PCR法能快速检测乌鲁木齐地区儿童急性呼吸道病毒，呼吸道病毒感染主要为HMPV和HRSV感染；呼吸道病毒患儿感染率最高年龄段为≥8岁；以秋季和冬季为呼吸道病毒感染高发期。

简介：应用双功能交联剂在乳胶颗粒上交联一段与丙肝病毒(HCV)核酸某段序列互补的探针使之成为特异性活化乳胶颗粒。将这种乳胶颗粒混悬在6M硫氰酸胍中，在检测时，将待检血清与之混合并置室温振摇，病毒RNA在病毒脱壳后释放出来并与活化颗粒的探针杂交，从而被分离出来．本研究应用这种方法检测临床血清50例，并与经典法、蛋白酶K法，血清直接扩增法进行比较．结果表明：一步法提取RNA，检测方法简便、敏感性高、重复性好，是一种较理想的RNA分离技术．

简介：摘要目的了解宁波市儿童呼吸道感染病原体的流行特征，为临床防控和诊治提供参考依据。方法收集2019年7～10月份间宁波市妇女儿童医院就诊急性呼吸道感染患儿的标本共3 103例，通过基于毛细电泳的多重RT-PCR法检测常见的13种呼吸道病原体，并对结果进行统计分析。结果3 103例患儿中2 053例呼吸道病原体检测阳性，总阳性率为66.16%。检出率前3位分别为肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae, Mp)33.19%(1 030/3 103)、鼻病毒(human rhinovirus, HRV)24.20%(751/3 103)和腺病毒(human adenovirus, HADV)8.77%(272/3 103)。病原体在男性患儿和女性患儿中的检出率分别为65.70%(1 157/1 761)和66.77%(896/1 342)，差异无统计学意义(χ2＝0.386, P＝0.535)；在年龄≤1岁组、1～≤3岁组、3～≤6岁组和6～≤16岁组检出率分别为58.02%(626/1 079)、74.37%(589/792)、73.78%(543/736)和59.48%(295/496)，组间差异具有统计学意义(χ2＝84.770, P＝0.000)；7～10月份检出率依次为71.64%(341/476)、68.81%(536/779)、67.01%(648/967)和59.93%(528/881)，差异具有统计学意义(χ2＝24.395, P＝0.000)；单一感染率为52.30%(1 623/3 103)，2种及以上病原体混合感染率为13.86%(430/3 103)，其中以2种病原体混合感染多见。结论宁波市儿童呼吸道病原体检出以Mp和HRV为主，病原体检出率在不同年龄阶段和不同月份间存在一定差异。

简介：摘要目的建立武乡病毒(wuxiang virus, WUXV)的实时荧光定量TaqMan反转录聚合酶链式反应(real-time RT-PCR)检测方法。方法从GenBank中下载WUXV的全部基因序列，使用MEGA-X完成多序列比对分析，选择针对S段基因高保守区设计的引物和探针，分别对检测反应的特异性、灵敏性和稳定性进行评价。结果建立的方法可以特异性地检测WUXV，并且与多种虫媒病毒无交叉反应；反应的灵敏度较高，最低检测下限为1 pfu/ml；同一样品重复检测循环阈值(Ct)的批间变异系数均小于1.00%；用本研究建立的TaqMan RT-PCR检测30批白蛉核酸样本，其中7批出现WUXV阳性扩增曲线。结论本研究建立了灵敏度高、特异性强、重复性好的TaqMan RT-PCR方法可用于WUXV的大批量样本筛查。

简介：

简介：摘要目的分析实时荧光定量RT-PCR法对手足口病病原体的定量检测。

简介：摘要目的对桂林市一起旅游团体腹泻疫情进行诺瓦克病毒Ⅰ型(NVGⅠ型)和Ⅱ型（NVGⅡ型）检测分型，为疫情处理及时做出准确的判断。方法用实时荧光探针（RT-PCR）方法对腹泻病人样本的特异引物进行核酸扩增检测。结果通过用实时荧光PCR法对28份样品进行快速检测，NVGⅠ型阳性6份（21.4﹪），NVGⅡ型阳性3份（10.7﹪），NVGⅠ型和NVGⅡ型同时阳性1份（3.6﹪），阴性19份（67.9﹪）。结论实时荧光PCR在诺瓦克病毒检测中能起到快速、准确和高灵敏的效果，对病人病情的及时诊断治疗和对突发疫情的快速控制和处理起到了积极的作用。

简介：ObjectiveToinvestigatetheoccurrenceandpossiblemechanismsofapoptosisincochlearepitheliumandspiralganglionneuronsaftermefloquinetreatment.MethodsWeusedquantitativeRT-PCRapoptosis-focusedgenearrays(96-well,84apoptosisrelatedgenes)toassesschangesofgeneexpressioninthecochlearbasilarmembrane(haircells-supportingcells)andspiralganglionneuronsofratcochlearorganotypicculturestreatedwith100μMmefloquinefor3h.ResultsSignificantup-ordown-regulationingeneexpressionwasdetectedin23genesinthecochlearbasilarmembrane,andin32genesinthespiralganglionneuronscomparedwithtime-matchedcontrols.Therespondinggenescouldbeclassifiedaspro-oranti-apoptotic,andweremainlyimplicatedintheBcl-2,Caspase,Card,IAP,TNFligand/TNFreceptor,Deathdomain/Deatheffectordomain,DNAdamage/p53,andNF-kappaBfamilies.Syntheticanalysissuggestedthatthesefamiliescouldberevisedtotwomajorpathwaysmainlyinvolvedinthedeathreceptor-mediatedsignalingpathwayandapoptoticmitochondrialpathway.Inaddition,itwasfoundthatnumerousanti-apoptoticgenessuchasBcl2a1,Birc1b,Birc3,Birc4,Bnip1,Cflar,Il10,Lhx4,Mcl1,Nfkb1,Prlr,Prok2,andTNFweregreatlyup-regulatedinthecochleartissue,whichmightimplytheco-existenceofprotectiveresponseinthecellsattheearlystageofmefloquine-induceddamage.

简介：目的：建立李痘病毒（PPV）特异、灵敏、快速的实时荧光定量RT-PCR检测方法,用于核果类种苗的健康评测及李痘病毒疫情监测。方法：根据PPV-D株系和PPV-M株系的外被蛋白（CP）基因保守序列,设计特异性引物和TaqMan探针,扩增全长CP基因片段,并将其克隆到pMD18-T载体上,构建质粒标准品,建立PPV的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行评估。结果：此荧光定量RT-PCR方法对PPV检测呈现高灵敏度和高特异性,与马铃薯Y病毒和马铃薯X病毒无交叉反应,最低检出限可达1.6×10^2拷贝/μL,标准曲线的相关系数为0.99918。结论：建立了李痘病毒的荧光定量RT-PCR检测方法,可望应用于检验检疫部门对李痘病毒的快速检测

简介：【摘要】：新型冠状病毒肺炎是由新型冠状病毒 (2019-nCoV)引起的一种急性的呼吸道传染疾病，可迅速发展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍，严重威胁患者的生命健康安全。经相关学者对新型冠状病毒毒株的检验研究后，确认通过实时荧光 RT-PCR核酸检测可对新型冠状病毒进行临床诊断，可以早发现、早诊断、早治疗或尽早与其他病毒感染者进行鉴别诊断。

简介：摘要随着时代的进步，社会的发展，大多数疾病已经可以得到很好的治愈，但是大规模的流感病毒的爆发，仍然困扰着我们，特别是甲型H1N1流感。流感病毒传染性强，变异性强传播速度快，爆发后难以控制，极大的危害了社会的安定和谐，，影响了人们的生活质量。所以及早点了检测发现流感病毒是抑制病毒传播，控制流感病毒爆发程度的最为关键的步骤。现在国内外常用的检测流感病毒的方法主要有血清学检测、核酸扩增法检测、细胞培养法、流感病毒抗原检测法等。但是这些常用的方法耗费大量时间和精力，不适用于流感病毒的快速检查。相反，荧光定量RT-PCR是各种检测方法中最灵敏、最有效、最准确的。所以对于荧光定量RT-PCR检测流感病毒的应用的研究是有很大医学价值。

简介：随着现代分子生物学技术的发展,反转录聚合酶链式反应技术在甘薯病毒检测上的应用越来越广泛。采用该技术可检测出甘薯组织中含量极低的病毒RNA,具有灵敏度高、特异性强等优点。在本研究中根据NCBIGenBank中收录的SPCSV病毒外壳蛋白（CP）基因核苷酸序列的保守区域设计了3对特异性引物,使用天根生化科技（北京）有限公司生产的QuantOneStepRT-PCRkit试剂盒,针对影响扩增产物的影响因素退火温度进行优化,建立了甘薯退绿矮化病毒的RT-PCR检测方法。该方法使RT-PCR在一管内完成,大大降低了外源物质的污染及RNA降解的几率,可作为甘薯SPCSV病毒的快速检测方法。

简介：Abstract:TheP24antigentest,HIVRNAPCRtest,HIVisolation/cultureandfourth-generationHIVuniformAg/AbassayarebeingutilizedindiagnosingacuteHIVinfectionindifferentlabs.ManyfactorslimittheuseofscreeningforacuteHIVinhigh-riskpopulations,inblooddonorsandduringvoluntaryHIVtesting,including,cost,technique,sensitivityandspecificity.InthisreviewweexploreanewNAATmethodwhichinvolvesHIVRNART-PCRonpooledsamples.Thistechniqueisabletoscreenforacuteinfectionsinalargetestingvolumeandmayheusedasascreeningmethodinhigh-riskpopulationsandblooddonors.