简介：摘要目的分析PCR检验法在细菌检验中的应用效果。方法选取我院检验科在2014.1~2015.8检测的123份阴道分泌物样本作为分析资料，123份样本来源于123例阴道病患者，同时采用革兰染色与PCR法检验样本。结果PCR的细菌检出率高于革兰染色，其中棒状杆菌、嗜血杆菌、肠球菌、弯曲弧菌、胨链球菌及普雷沃菌的检出率比较差异显著（P<0.05）。结论PCR在临床细菌检验中具有检出率高的特点。

简介：摘要目的探析分子信标荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌方法建立及其临床应用效果。方法选取167份肺结核患者痰液为研究标本，分别采用分子信标荧光定量PCR技术、抗酸染色法、集菌培养法对标本进行检测，回顾性分析三种检测方法的阳性检出率。结果分子信标荧光定量PCR技术的阳性检出率为70.66%，抗酸染色法为29.34%，集菌培养法为42.51%，分子信标荧光定量PCR技术的阳性检出率优于其他两种检测方法（P＜0.05）。结论分子信标荧光定量PCR技术检测结核分枝杆菌的阳性检出率、特异性、敏感性较高，可为肺结核的临床诊断和治疗提供借鉴，值得进一步推广和应用。

简介：【背景】小麦叶疫病菌于20世纪60年代入侵我国后,迅速传播扩散并在局部区域造成严重危害,对我国小麦的健康发展构成了巨大威胁。【方法】设计出检测小麦叶疫病菌的特异性引物,建立快速检测该病菌的PCR方法。用真菌通用引物ITS4/ITS5对小麦叶疫病菌进行PCR扩增,将扩增产物进行克隆和测序,使用DNAMAN软件设计出检测该病菌的特异性引物LJY1和LJY2,优化PCR反应体系。【结果】建立了该病菌的PCR检测方法,PCR反应体系：25mmol·L^-1MgCl22.5μL,10mmol·L^-1dNTP1.0μL,10μmol·L^-1引物各0.5μL,DNA模板8ng,最佳退火温度57.6℃。【结论与意义】该方法可以准确地将小麦叶疫病菌与其他链格孢属的真菌区分开。本研究结果为小麦叶疫病的快速检测提供了依据,能够有效防止该病菌在小麦进出口贸易中传入我国。

简介：目的建立登革病毒分子信标实时荧光PCR检测方法。方法针对登革病毒3’-UTR保守区设计引物和分子信标探针,构建阳性参考质粒,建立登革病毒分子信标实时荧光PCR检测方法。应用建立方法对血清标本进行检测,检测结果与TaqMan探针法进行比较。结果所建立的分子信标荧光PCR检测方法灵敏度达102copies/μL,与其它病毒无交叉反应;对70份血清标本检测结果与TaqMan探针法一致。结论所建立的分子信标荧光探针法具有较高的灵敏度和特异度。

简介：摘要目的研究荧光PCR检测MP-DNA在儿童肺炎诊断中临床应用价值。方法选择132例儿童呼吸道感染患者，以0～4岁为试验组，其他年龄段患者为对照组，分别行荧光PCR检测咽拭子或深部浓痰中MP-DNA，被动凝集法检测患者血清中MP-Ab。结果试验组荧光PCR阳性率为20.3%、被动凝集法阳性率为8.5%；对照组荧光PCR阳性率为20.1%、被动凝集法阳性率为30.1%；经卡方检验，荧光PCR检测两组别χ2=0.19，P>0.05无统计学差异，被动凝集法检测两组别χ2=10.7，P<0.05有统计学差异。结论荧光PCR具有特异性强，灵敏度高的特点，尤其在婴幼儿的肺炎支原体检测中，考虑患者免疫系统发育未全因素，荧光PCR更具优势。

简介：摘要目的探讨荧光定量PCR的检测流感病毒中的应用。方法采用实时荧光定量PCR法对60份经胶体金快速检测法筛查检测的标本进行检测，进行统计分析，评估不同方法灵敏度和特异性差异。结果实时荧光定量PCR法和胶体金快速检测法的阳性率分别为78.33%和58.33%，胶体金快速检测法较于实时荧光定量PCR的灵敏度和特异性分别为74.47%和53.85%。结论实时荧光定量PCR检测技术可作为流感防控的病原快速检测技术。

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简介：以植物乳杆菌P-8（Lactobacillusplantarumsubsp.plantarumP-8）亚油酸异构酶为研究对象,通过http：//swissmodel.expasy.org/,http：//smart.embl-heidelberg.de/和vecterNTI等在线工具与软件,对亚油酸异构酶进行生物信息学分析并预测与酶活性相关的位点,预测亚油酸异构酶的3个氨基酸可能为第68位甘氨酸、第107位精氨酸和第172位组氨酸。设计1对含突变的引物,以重组质粒pQE30-LAI为模板,利用PCR介导的定点突变技术构建突变体。经序列比对表明,成功构建了突变体G68A（甘氨酸突变为丙氨酸）、R107L（精氨酸突变为亮氨酸）和H172P（组氨酸突变为脯氨酸）,为进一步研究LAI的结构和功能奠定了基础。

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简介：摘要目的探讨宁夏地区宫颈疾病的发病率以及更加有效、准确、经济的诊断方法。方法自2014年11月至2014年12月，对宁夏地区宫颈癌筛查项目1374例患者进行HPV-DNA检测和液基细胞学检查（TCT），两项检查中有一项检测结果为阳性即在宫颈组织3、6、9、12点分别取材。以病理学检查为标准，对比两种初筛方法的检测结果。结果高危型HPV阳性率为31.4%，TCT阳性率（≥ASCUS）为32.5%；高危型HPV基因检测的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、正确诊断指数分别为90.2%、72.9%、19.3%、99.0%、0.631；TCT分别为95.7%、72.2%、19.8%、99.6%、0.671，二者联合检测方案的结果为100.00%、71.6%、19.1%、100.0%、0.716。结论TCT与HPV-DNA检测无明显差异，但考虑到经济及医疗资源方面，仍应以HPV-DNA检测作为首选；TCT和高危型HPV联合检测可以提高宫颈疾病筛查的敏感性、阴性预测值及正确诊断指数。

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简介：摘要目的探讨实时荧光（RT-PCR）法快速检测流感病毒在临床中的应用效果，为今后的流行病学监测提供思路。方法以我中心2014年1月至2014年12月期间采集的1355份流感样病例（ILI）及暴发疫点现患病例的咽拭子标本作为本组研究的观察对象，采用实时荧光RT-PCR方法对流感病毒核酸进行检测分型。结果本组1355份咽拭子标本中共检测出流感病毒核酸阳性573份，总阳性率为42.29%；其中甲型H1N1流感352份，B型76份，季节性流感H1亚型21份，季节性流感H3亚型124份。结论实时荧光RT-PCR法快速检测流感病毒的特异性与灵敏度均较高，而且操作方便，效率高，可以作为公共卫生应急疫情的实验室快速诊断方法。

简介：摘要布鲁氏菌病(Brucellosis)简称布病，又称地中海弛张热，马耳他热，波浪热或波状热，俗称“懒汉病”，是由布鲁氏菌(Brucella)引起的一种人畜共患传染病。布病在我国绝大多数省(市、区)都有不同程度的发生和流行，尤其以北方16个省(市、区)为重。病畜和带菌动物是主要传染源，并且布鲁氏菌能感染多种宿主，具有高度传染性1，其中羊种布鲁氏菌对人有高度的致病性。在我国,布鲁氏菌病流行广泛,尤其是以畜牧业生产为主的地区，人群分布以农民和牧民为主。近年来，实时荧光定量PCR方法是应用较为普遍的一种快速检测方法，并能在非常短的时间内提供结果。布鲁氏菌病的流行不仅造成巨大的经济损失，而且严重威胁人群的健康，研究布鲁氏菌病的病原学、流行病学及其实时荧光定量PCR的重要性日益突出，已经成为我国公共卫生迫切需要解决的一个问题。

简介：目的：评价一种直接从标本中快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的实时荧光PCR方法。方法：临床送检标本中筛选出46份金黄色葡萄球菌阳性的标本,进行实时荧光聚合酶链反应（PCR）检测,并与全自动细菌鉴定仪（VITEK-2Compact）/头孢西丁纸片扩散法进行比较,评价实时荧光PCR方法的敏感性及特异性。结果：VITEK-2Compact分离出金黄色葡萄球菌46株,其中MRSA12株,与头孢西丁纸片扩散法结果一致。实时荧光PCR法检测出金黄色葡萄球菌46株,其中MRSA13株,敏感性及特异性分别为100%（95%CI,75.75,100）,97.06%（95%CI,85.08,99.48）。2种方法有很好的一致性[Kappa=0.945（95%CI,0.839,1.000）]。结论：实时荧光PCR法是一种能从标本中直接检测MRSA的快速,敏感的方法。

简介：摘要目的鼻咽癌病人多项免疫功能及EB病毒PCR检测的综合研究。方法本文选取我院于2014年04月~2015年04月收治的18例鼻咽癌患者，对其免疫功能及其EB病毒PCR检测方式之间存在的关系加以有效研究和探讨，进一步对鼻咽癌患者血液中EB病毒抗体、其他氧化物活性等多项指标值进行测定。结果鼻咽癌患者患者的锌离子、铜离子、钙离子微量元素指标大小结果分别是（16.09±5.17）umol/l、（17.40±5.13）umol/l、（2.19±0.17）umol/l，和正常人群的三项微量元素指标大小结果对比存在显著性差异（P<0.05），具有统计学意义。结论鼻咽癌患者采用通过开展免疫功能及其EB病毒PCR检测方式的有效探索，发现鼻咽癌患者血清中含有多种微量元素及其EB病毒抗体等物质成分，这对于通过血液指标含量来测定鼻咽癌疾病奠定了坚实的条件。

简介：摘要目的利用荧光定量PCR检测技术,建立由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒的快速检测方法.方法以金黄色葡萄球菌的特异性DNA核酸片段作为靶序列,采用聚合酶链反应(PCR)结合Taqman技术,以哈尔滨市２０１３~２０１４年度食源性致病菌主动监测分离鉴定的菌株作为阳性菌,对其进行荧光检测.结果本研究建立的反应体系对１８株金黄色葡萄球菌呈现出良好的扩增曲线,在５株相关细菌的检测中,除金黄色葡萄球菌结果为阳性外,其余菌株均为阴性.结论该方法特异性强、灵敏度高,操作简便快速,适应于由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒及食源性疾病的快速检测,具有较大的推广及应用价值.

简介：摘要目的探讨腹泻患者中诺如病毒RT-PCR检验结果及曲线分析。方法对巴州地区哨点医院巴州第一人民医院上送的腹泻病粪便标本中的诺如病毒，进行RT-PCR检验。结果从2015年上送的241份腹泻患者粪便中，检测出33份诺如病毒GⅡ型阳性标本，检出率达13.69%；检测出2份诺如病毒GⅠ型阳性标本，检出率为0.83%。结论新疆巴州地区腹泻患者中诺如病毒多为GⅡ型，阳性标本RT-PCR曲线应与阳性对照保持相似的“S”型曲线，在FAM通道和HEX通道峰值要大于2000。

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