简介：

简介：探索从微量植物检材中提取DNA的有效方法,并尝试应用于法庭科学实践。方法：采用优化改良的硅珠法,从10种不同的植物叶子中提取DNA（8种常见植物,2种毒品原植物）。通过紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增及限制性内切酶消化对提取的DNA进行检测;最后以实际案例中的植物检材为研究对象,验证提取方法。结果：通过该方法提取的植物DNA纯度较高,质量较好。PCR扩增的条带清晰、明亮,无杂带。结论：该方法可有效去除次生物质对DNA的干扰,提取的基因组DNA可满足PCR扩增及以PCR为基础的实验需要,可以应用于法庭科学实践。

简介：从土壤中提取微生物DNA的方法分两类——直接提取法和间接提取法，两类方法各有优势和缺陷。因而各有一定的适用范围。

简介：方案4提取的DNA的OD260/OD280比值在1.835～1.909之间,比较了4个方案提取高良姜基因组DNA的效果,结果用改良CTAB法方案4提取的基因组DNA的OD260/OD280比值在1.8～2.0之间

简介：采用SDS和CTAB两种方法分离提取金丝小枣基因组DNA,并比较其提取效果.结果表明,改进后的CTAB法可获得高质量、高得率的基因组DNA,可用于金丝小枣的各种分子生物学研究.

简介：五唇兰组织内含有大量的酚类、多糖以及此生代谢产物,DNA提取较为困难。为获得高质量的五唇兰基因组DNA,文中采用传统十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、常规十二烷基硫酸钠(SDS)法和改进的CTAB法对五唇兰基因组DNA的提取进行比较。结果表明:改进的CTAB法比传统CTAB法和常规SDS法都好,可以得到质量较好的DNA,电泳条带清晰,通过紫外分光光度计检测,A260/A280为2.0以上。

简介：方案4提取的DNA的OD260/OD280比值在1.835～1.909之间,比较了4个方案提取高良姜基因组DNA的效果,结果用改良CTAB法方案4提取的基因组DNA的OD260/OD280比值在1.8～2.0之间

简介：摘要：应用煮沸法、微波炉提取法、异丙醇沉淀提取法、改良碱裂解法、氯化锂法等五种质粒DNA提取方法，提取农杆菌pBI121质粒DNA。结果表明，这些方法相对于经典的碱裂解法都有一定的优点，其中的煮沸法、改良碱裂解法、氯化锂法，实验操作时间短，不使用有毒的酚和氯仿，提取的质粒DNA质量也较好，可以满足分子生物学的常规实验要求，适合在中学实验教学中应用。

简介：一、鼠肝匀浆解剖小(或大)白鼠,取下肝脏,切成薄片,用蒸馏水漂洗净。称取5mg鼠肝,加入20ml蒸馏水。用研钵捣碎肝组织,使其呈匀浆状,注意整个匀浆时间不能超过1分钟。浆液用二层纱布过滤。二、DNA提取1.肝匀浆滤液中加入2ml20%SDS(十二烷基磺酸钠),搅拌均匀,使肝细胞脂质膜溶解。置于60-65°C范围内保温10分钟。其间应不停地搅拌。2.在上述液体中加入7.5ml5mol/1氯酸钠,

简介：对新鲜的血液或者血痕,采用直接扩增和chelex-100直接处理提取DNA,一般都能获得完整、均衡的DNA分型,但在日常检案过程中,陈旧血痕、载体潮湿、委托方送检的样本由于保存不当导致血液和少量血痕检材腐败的情况也比较常见。这类检材DNA采用普通的chelex-100直接提取很难获得比较完整的DNA分型。结合一列检案,分别用chelex-100、磁珠法、微量DNA提取试剂盒三种方法专门针对腐败血液进行比较分析。

简介：目的：比较提取高质量艰难梭菌基因组总DNA的方法。方法：采用4种不同方法提取艰难梭菌基因组DNA，比较作为模板用于扩增艰难梭菌看家基因磷酸丙糖异构酶（tpi）基因的优缺点。结果：除沸水浴法，其他3种方法制备的艰难梭菌DNA均能成功用作PCR扩增的模板。CTAB／NaCl法进行提取可有效去除多糖成分，但操作要求较高。碱裂解法操作简便、省时、成本低经济可靠，提取的DNA量及纯度较合适；试剂盒抽提出的产物纯度和产量明显高于CTAB／NACL、碱裂解法（P〈0．05），但成本高。结论：四种方法各具优缺点，应根据实验室条件和实验要求进行选择。

简介：为有效获得蚜茧蜂基因组DNA,并保留其虫体做形态鉴定。本文对常规试剂盒提取方法（柱离心法）进行改进,采用穿刺法提取7种蚜茧蜂的基因组DNA,同时以研磨法提取4种常见蚜茧蜂成虫基因组DNA做对照,比较两种方法提取的基因组DNA的纯度和产量,并通过线粒体COI基因序列扩增进行验证。结果表明：穿刺法能从单头蚜茧蜂中提取DNA而不影响形态鉴定。该方法提取的DNA产物产量在29~55ng/μL,提取物的OD260/OD280在1.51~1.91,可以稳定地进行线粒体COI基因序列扩增,PCR扩增条带清晰完整。

简介：在法医物证检验工作中，一般的腐败尸体由于软骨腐败速度较慢，选择软骨检材进行检验，且采用Chelex-100法提取DNA就可得到理想的STR分型结果，但在本案中的腐败软骨，由于未被软组织包裹，长时间暴露于空气和泥水中，且在温度适宜的情况下，加速了腐败，增加了检验难度，单纯依靠此法检测存在失败的可能。笔者运用二种不同的DNA提取法对高度腐败的软骨进行DNA提取，并进行了比较。

简介：通过对牡蛎肠道微生物总DNA的提取方法进行优化,以OD260/OD280比值、琼脂糖凝胶电泳、DNA浓度及PCR反应为指标,分析比较提取近江牡蛎肠道微生物总DNA的方法,结果表明,SDS-溶菌酶法的结果最优,其次是CTAB提取法,最后依次是DNA简约提取法、试剂盒法。

简介：以8份广西桑树种质资源为材料，比较了改良的CTAB法和植物基因组DNA试剂盒法（离心柱）提取桑树基因组DNA的效果。结果表明：两种方法都能得到桑树样品清晰的DNA电泳条带，DNA纯度高，改良的CTAB法提取的DNA浓度在308．70μg／mL～384．30μg／mL之间，平均值是331．45μg／mL；植物基因组DNA试剂盒法提取的DNA浓度在180．50μg／mL～305．60μg／mL，平均值是212．01μg／mL，改良的CTAB法提取的DNA产量较高，用SRAP引物组合Me2－Em8进行扩增两种方法提取的DNA，均获得了清晰的扩增图谱，各样品的扩增效果条带清晰、多态性强。这两种桑树基因组DNA提取方法都能满足桑树分子标记研究的需要。

简介：目的探索一种新的真菌DNA提取方法,该方法操作简便,提取效率高,耗时较短,应用范围广.方法将酶消化和Chelex-100提取DNA方法联合起来,配制一种新的DNA提取试剂.通过真菌ITS4和ITS5通用引物进行PCR,对新的DNA提取试剂同市售的Takaralysisbuffer在DNA提取方面的效能进行评价,同时对DNA浓度和纯度进行测定.结果实验所用34株真菌,自配试剂成功提取出32株真菌DNA;Takaralysisbuffer成功提出27株真菌DNA.对于两种方法都没能提出DNA的2株真菌,经液氮研磨破壁后,自制试剂均成功提取;而Takaralysisbuffer仅成功提取DNA1株.结论同市售试剂Takaralysisbuffer比较,自配DNA提取液提取DNA质量相对较高,可用于临床常见感染真菌的PCR诊断.对于某些真菌,提取DNA之前先进行菌体破壁是必要的.

简介：为探讨庙台槭不同组织DNA的高效提取方法,分别以叶片和果实为材料,以完全随机区组试验设计,设置不同浓度的β-巯基乙醇和不同浓度的PVP作为预处理,采用试剂盒法提取基因组DNA,提取后对基因组DNA进行浓度、分光光度值的测定以及PCR扩增,综合各项指标选择出效果最好的预处理方法,并进一步以CTAB法进行验证,之后应用于不同个体庙台槭的DNA提取中。结果发现:以庙台槭果实为材料,不需要预处理,提取的DNA即可满足下游实验需要;以叶片为材料,用0.5%β-巯基乙醇和1%PVP预处理能有效提高提取的DNA浓度和质量,经验证发现该预处理方法适用于CTAB法,且能够极显著地提高DNA提取的浓度和质量;进一步应用于所有132个庙台槭个体的总DNA提取,获得的DNA均能满足后续实验要求。本研究为进一步研究庙台槭遗传多样性等工作提供帮助,同时也能够为槭属其他植物的相关研究提供参考。

简介：模板DNA的质量直接影响PCR扩增的结果,而不同提取方法及其缓冲液的成份与浓度对提取DNA的质量有重要影响.本文以5个栽培大豆品种的叶片为材料,比较分析了SDS与CTAB两种提取方法以及不同浓度CTAB提取缓冲液对所提取的DNA质量的影响,并通过PCR进行检验.实验结果表明:用1%(W/V)、2%(W/V)浓度的CTAB提取缓冲液和1.25%(W/V)SDS提取缓冲液所提取的大豆叶片DNA的质量较好,均能满足PCR扩增模板的需求,其中以1.25%(W/V)SDS提取得到的大豆叶片DNA质量最好,以其为模板扩增的效果最佳,而4%浓度的CTAB不适宜提取大豆叶片DNA.

简介：植物叶片中含有的多糖、蛋白质和多酚等物质,很大程度会影响总DNA的提取质量。本研究以剑叶虾脊兰(Calanthedavidii)和银带虾脊兰(Calantheargenteo-striata)幼嫩叶片为材料,采用改良CTAB法提取总DNA,设置样品重量(0.05g,0.10g,0.20g)、清洗时间(10min,20min,30min)、水浴温度(25℃,60℃,45℃)、水浴时间(2h,1h,0.5h)4因素3水平正交试验,探究不同因素、不同处理对DNA得率和纯度的影响,以获取最佳提取条件。研究发现剑叶虾脊兰和银带虾脊兰DNA的最佳提取条件均为:样品重量0.2g、清洗时间30min、水浴温度60℃、水浴时间2h。该处理下剑叶虾脊兰DNA产率最高为490.5ng/μL,A260/A280均值为1.953;该处理下银带虾脊兰DNA产率最高为139.83ng/μL,A260/A280均值为1.967。各因素对剑叶虾脊兰DNA产率影响次序为:样品重量>清洗时间>水浴温度>水浴时间;各因素对银带虾脊兰DNA产率影响为:样品重量>水浴温度>清洗时间>水浴时间。本研究为虾脊兰属的分子生物学研究提供科学依据。

简介：目的：川金丝猴（Rhinopithecusroxellana）是我国特有珍稀物种，其粪便作为一种非损伤性样品，为珍稀濒危动物的种群数量调查、遗传多样性评价、亲缘关系、系统进化等研究带来了很大便利，本研究试图建立高效、简便的粪便样品保存方法。方法：在现有珍稀濒危动物粪便样品保存方法的基础上，分别使用干燥法、冷冻法和干燥．冷冻法保存川金丝猴的粪便样品，比较了不同保存方法的DNA提取效果，以及对mtDNA控制区片段的PCR扩增成功率和微卫星基因的PCR扩增效率。结果：干燥法、冷冻法和干燥一冷冻法三种不同保存方法保存粪便1周时间后，提取的粪便DNA样本扩增mtDNA片段的成功率均为92％，微卫星基因的扩增成功率分别为79％、78％、80％；保存2个月后，mtDNA片段扩增成功率分别为80％、76％和80％，微卫星基因扩增成功率分别为65％、61％、67％；保存6个月后，mtDNA片段扩增成功率分别为56％、52％和64％，微卫星基因扩增成功率分别40％、34％、46％。因此，随着保存时间的增长，三种方法的保存效率都将明显降低，但干燥．冷冻法得到的DNA样本扩增成功率相对较高。结论：粪便样品能够为川金丝猴的遗传多样性评价等相关研究提供有效信息，干燥一冷冻法保存能够更为有效的保证DNA的提取和基因扩增效率。