简介:摘要目的探讨带有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的pEGFP.N3是否能够有效转染ADSCs。方法提取pEGFP-Genesil-1质粒,采用Lipofectamine2000脂质体将绿色荧光表达质粒Genesil-1载体转染至ADSCs。镜检各个时间点含有荧光的鼻咽癌细胞数,并选取转染率最高时间点的鼻咽癌细胞,用流式检测精确的转染率。结果脂质体复合物转化ADSCs24h后,荧光倒置显微镜下可见绿色荧光,4ug/ml质粒浓度组转染48小时绿色荧光蛋白阳性细胞率达最高值。结论带有增强型绿色荧光蛋白基因的pEGFP.N3可以较为高效地转染ADSCs。
简介:目的观察重组腺病毒载体Ad5-hOPG-EGFP转染的Beagle犬牙周膜细胞(PDLCs)体内和体外的骨化能力.方法将体外构建的携带人骨保护素(humanosteoprotegerin,hOPG)基因的腺病毒载体Ad5-hOPG-EGFP转染Beagle犬PDLCs,通过体外VonKossa染色实验、实时荧光定量PCR检测成骨指标的表达情况、酶联免疫检测RANKUL/OPG的值及裸鼠体内胶原膜成骨实验比较转染组和对照组的成骨能力.结果组织学和形态学结果显示,转染了重组腺病毒Ad5-hOPG-EGFP的Beagle犬PDLCs形成的矿化结节数目多且体积大、深染.转染组中犬碱性磷酸酶(alkalinephosphates,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OC)、骨涎蛋白(bonesialoprotein,BSP)基因相对表达水平均高于空载体组和空白对照组(P<0.05).转染组中犬RANKL/OPG的值下降趋势最为明显.裸鼠体内实验中转染组胶原膜也体现出较好的成骨能力.结论重组腺病毒介导的hOPG基因可以促进PDLCs成骨.
简介:摘要目的以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因,观察干细胞生长情况及两者间生物相容性。方法WST-1法检测rMSCs增殖效应,Westernblot法检测hBDNF蛋白的表达。结果CD34、CD45、CD29、CD90阳性细胞比率分别为0.79%、6.8%、98.9%、99.9%。结论Ad5-hBDNF-EGFP能成功转染接种在水凝胶上的rMSCs,两者间具有良好的生物组织相容性。
简介:盘活存量和用好增量是缓解当前我国城市建设用地供需矛盾日益突出的有效手段。利用2005年-2012年30个省以及275个地级市的相关数据对我国城市建设用地的利用效率和配置效率进行实证分析,结果表明:城市建设用地利用效率整体上呈下降之势,但效率改进幅度较大,且改进方式存在着空间差异性;城市建设用地利用效率及土地冗余情况存在着显著的空间差异性;配置效率呈现出显著的层级和空间分异特征,省内各市间的配置效率高于省际,且东部地区省际配置效率最高;人均收入、产业结构、人口密度以及土地交易市场的市场化程度对城市建设用地的利用效率均具有显著影响,不同的市场交易方式对城市土地初始配置扭曲状态的校正作用存在着显著的差异。
简介:摘要“学生说题”是指学生经过认真、仔细、严谨的审题后,在充分思考的基础上,说清题意,说出解题思路和解题过程,从而把自己的想法和做法与教师、同学分享。“学生说题”是一项有效提高课堂教学质量的活动,不仅能培养学生“说题、想题、做题、反思”的主动学习习惯,而且能培养学生优秀的数学思维品质。本文从教师示范说题、学生模仿说题、学生自主说题三个阶段阐述了说题的策略。