简介:目的:基于大肠杆菌质粒pMMB207,构建贝氏柯克斯体穿梭载体,建立贝氏柯克斯体转化系统。方法:利用PCR分别扩增eGFP基因、Kan~R抗性基因、贝氏柯克斯体组成型表达启动子P311和P1169等4段序列,然后用融合PCR技术将4段序列融合为P311-eGFP-P1169-Kan~R串联序列,经KpnⅠ和XhoⅠ酶切后,连接至经同样双酶切的pMMB207骨架上,构建穿梭载体p207-GK;将穿梭载体电转化至贝氏柯克斯体,用ACCM-2培养基进行传代培养或感染BGM细胞;利用倒置荧光显微镜观察eGFP基因的表达,传代至eGFP基因高表达时,用半固体平板培养法克隆分纯贝氏柯克斯体转化株。结果:构建了贝氏柯克斯体穿梭载体,获得了稳定表达eGFP的贝氏柯克斯体转化株,并完成了克隆分纯。结论:建立了完整的贝氏柯克斯体转化系统,为后续用遗传学方法研究贝氏柯克斯体奠定了基础。
简介:摘要在现今重载试验线路中,贝氏体钢轨引起良好的韧性以及强度而得到了广泛的应用。而在实际应用中,其也将存在一定的伤损问题,并因此对实际应用效果产生了较大的影响。在本文中,将就贝氏体钢轨闪光焊接头伤损分析及预防对策进行一定的研究。
简介:PhaseFormationandMicrostructureofTitaniumOxidesandCompositesProducedbyThermalPlasmaOxidationofTitaniumCarbide.Stroctureandpropertiesofthehardenedcarburizedlayeroflow-carbonchromium-nickelsteelafterquenchingindiffcrentmedia-PartⅠ.Experimentalsetupforthermalfatiguetestingofsteelsforthecastingtools.
简介:[篇名]FabricationofTexturedAgSubstrateforYBCOCoatedConductor,[篇名]Quenchingofphotodarkeninginmetal-dopedchalcogenideamorphousfilms,[篇名]Quenchingofsingletmolecularoxygen(-△{sub}g)byvitaminsandpolyphenolsstudiesbytime-resolvedESR,[篇名]Vacuum-Heat-Treatmentofhot-worksteel,[篇名]QuantumconfinedstarkeffectinGaInNAs/GaAsmnultiplequantumwells。