简介:摘要目的探讨乳腺癌甲醛固定石蜡包埋(formalin-fixed and paraffin-embedded,FFPE)穿刺样本杂交捕获法二代测序(next-generation sequencing)样本优选条件。方法纳入多中心乳腺癌FFPE穿刺样本共计435例,选取燃石36基因检测试剂盒二代测序数据分析。纳入样本保存时间、切片厚度、降解等级、建库后的浓度、核酸片段大小、下机数据质量等质控信息。结果435例样本中111例核酸总量低于30 ng,剩余28例DNA质量低于C级,最终296例进入质控分析。保存时间分布为:<1年188例;1~2年74例;>2~3年34例,其DNA降解程度分布为:A级(>2 500 bp)67例(22.6%);B级(1 500~2 500 bp)155例(52.4%);C级(<1 500 bp)74例(25.0%)。预文库质控合格样本(300 ng)的分布为:A级65例(97.0%);B级138例(89.0%);C级64例(86.0%)。终文库片段大小280 bp以上合格样本分别为:A级66例(98.5%);B级151例(97.4%);C级72例(97.3%)。保存<1年、1~2年、>2~3年样本根据下机数据插入片段质控合格(>170 bp),所占比率分别为:156例(83.0%)、45例(60.8%)和25例(73.5%)。降解程度分布分别为:A级 54例(80.6%);B级 127例(81.9%);C级 46例(62.2%)。结论FFPE穿刺样本杂交捕获法二代测序样本优选条件:(1)切片总厚度不低于50 μm;(2)保存时间优选<1年样本;(3)核酸降解优选A级。
简介:浸渍纸生产工艺中通常使用三聚氰胺甲醛树脂(MF树脂)。MF树脂有很强的胶接强度,较高的耐沸水能力,较强低温固化能力,硬度高,且耐磨等多种优异性能,但是价格较贵,有易产生裂纹的缺点,因此生产中添加剂的选择尤为重要。固化剂就是其中的关键因素,固化剂选择的好坏影响产品质量和产品的成本。目前生产中常用的MF树脂固化剂主要有进口或国产的成品固化剂,国产固化剂价格比较低,但是性能上较进口固化剂差。为了寻求合适的固化剂,笔者以对甲苯磺酸和吗啉为原料自行配制。这种自制固化剂稳定、性能优良,成本低。在掌握了制备工艺后,操作方便易行。