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  • 简介:[目的]建立具有潮霉素B(hygromycinB)抗性的3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE2-human-Ins)的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层。[方法]通过脂质体转染的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因(hyg)的质粒pHyg导入NIH3T3细胞中,利用潮霉素B的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR和southernblot鉴定。[结果]经300ug/ml的潮霉素B压力筛选后,获得了抗性细胞克隆。抗性NIH3T3细胞的形态和生长速度与正常NIH3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出相应的核苷酸片段,Southernblot鉴定结果表明潮霉素基因片段已整合入潮霉素抗性NIH3T3细胞。[结论]本实验通过脂质体介导的方法成功地培育了潮霉素B抗性的NIH3T3细胞,为进行目的基因(pTRE2-human-Ins)转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选打下了基础。

  • 标签: NIHNIH3T3细胞 潮霉素B磷酸转移酶基因 转染 潮霉素B抗性 ES细胞
  • 简介:目的建立具有潮霉素(hygromycin)抗性的3T3细胞系,用于转染目的基因(pTRE-Ins-human)的ES阳性细胞克隆筛选的饲养层.方法通过脂质体转染的方法,将含有潮霉素B磷酸转移酶基因的质粒pHyg导入3T3细胞中,利用潮霉素的药物选择特性,对转染细胞进行压力筛选,并对其进行PCR鉴定.结果经500μg/ml的潮霉素压力筛选后,获得了抗性细胞克隆.抗性3T3细胞的形态和生长速度与正常3T3细胞没有差异,特异性核苷酸引物检测抗性细胞基因组DNA,可以扩增出对应的核苷酸片段.结论成功地培育了潮霉素抗性的3T3细胞,为进行目的基因(pTRE-Ins-human)转染ES细胞的阳性细胞克隆筛选奠定了基础.

  • 标签: 潮霉素 抗性 细胞 饲养层 基因
  • 简介:采用菌丝生长速率法,测定了4个麦区的5个禾谷丝核菌Rhizoctoniacerealis菌株对井冈霉素的抗药性;在含井冈霉素的PDA平板培养基上对禾谷丝核菌进行继代培养,以诱导抗药性菌系;测定了抗性菌系对其他杀菌剂的交互抗性。并比较了抗性和敏感菌系对渗透压的敏感性及药剂处理后两种菌系培养液内还原糖和可溶性蛋白的含量差异。结果表明,田间禾谷丝核菌菌株对井冈霉素分别产生了7.26、7.75、10.46、14.92和23.31倍的抗性。室内继代培养36代,禾谷丝核菌对井冈霉素抗性达49.24倍,形成了抗井冈霉素菌系。抗井冈霉素菌系对嗯醚唑、福美双、三唑酮、丙环唑、戊唑醇和咯菌腈分别产生了48.58、21.78、17.62、10.95、2.55和1.78倍的交互抗性抗性菌系在较低和较高渗透压下其生长抑制率均大于敏感菌系,用井冈霉素处理抗性和敏感菌系后。其体内的电解质都严重外渗,且抗性菌系在10h内的外渗量明显大于敏感菌系。

  • 标签: 禾谷丝核菌 井冈霉素 抗药性 交互抗性
  • 简介:摘要目的建立pOct4-Neo转基因的小鼠胚胎干细胞(ESC)株,为进一步研究ESC分化提供有力的保障。方法设置G418不同浓度进行小鼠ESC培养,确定ESC致死G418浓度;电穿孔法转染小鼠ESC,通过G418筛选并挑取阳性克隆,检测所得细胞胚胎干细胞特异性标志物Oct4及SSEA-1的表达,通过拟胚体诱导体外分化。结果ESC的致死浓度为350μg/mL,在含400μg/mlG418的培养条件下,所得阳性细胞呈克隆样鸟巢状生长,Oct4、SSEA-1表达阳性,体外可以形成拟胚体和自发分化。结论成功对小鼠ESC进行了pOct4-Neo的转基因,为进一步的小鼠ESC体外分化研究奠定了基础。

  • 标签: 胚胎干细胞 新霉素抗性基因 转基因
  • 简介:两性霉素B(amphotericinB)是一种多烯类广谱抗真菌抗生素,是目前临床上治疗全身隐球菌、曲霉菌等真菌感染的一种有效药物,但该药在治疗剂量下比较严重的毒副作用限制了它在临床上的使用。研究表明,脂质体作为药物载体可以有效地降低药物的毒副作用,提高药物的治疗指数。

  • 标签: 色谱法 高压液相 两性霉素B 脂质体
  • 简介:目的建立两性霉素B脂质体粒度检测方法,通过测定一组性质不同的样品,找出最佳测定方法.方法用计算机的图像-数字处理技术结合扫描电镜、透射电镜和激光光散射粒度测定仪分别测定两性霉素B脂质体的粒度.结果电镜法测定两性霉素B脂质体的粒度为20~100nm,平均粒径为55~75nm;激光光散射法测定两性霉素B脂质体的粒度为30~200nm,平均粒径为50~180nm.结论激光光散射法能较好反映两性霉素B脂质体在使用时的真实粒度,且方法快速、简便是一种较好的两性霉素B脂质体粒度测定方法.

  • 标签: 两性霉素B脂质体 粒度测定 扫描电镜 透射电镜 激光微粒测定仪
  • 简介:<正>对二氧化硫抗性较强的树种有:广叶玉兰、夹竹桃、日本女贞,厚皮香、桧柏、海桐花、垂柳、榆、银杏、梧桐、臭椿、槐树、刺槐、乌桕、油茶等。对氯有抗性的树种有:银杏、合欢、杉木、池杉,重阳木、扁柏、麻栎、板栗、黄杨等。具有吸尘作用的树木有:悬铃木、水青冈、栎、花楸、白桦、杨树、洋槐、松、柏木、冷杉、落叶松、云杉、泡桐、合欢等。

  • 标签: 树种 日本女贞 落叶松 吸尘作用 夹竹桃 水青冈
  • 简介:目的探讨3个抗性品系家蝇对5种杀虫剂的交互抗性,为合理使用杀虫剂提供依据.方法采用微量点滴法.结果抗DDVP品系达14.71倍的抗性,而对氯菊酯、巴沙的交互抗性分别为93.49倍和7.703倍,而对氯氰菊酯基本没有交互抗性,对DDT为0.16倍,呈负交互抗性.抗巴沙品系达5.05倍,对氯菊酯、DDVP的交互抗性为4.07倍和2.78倍,对DDT基本无交互抗性,对氯氰菊酯呈负交互抗性.抗氯菊酯品系达223.09倍的抗性,对氯氰菊酯、DDT的交互抗性为6.63倍及9.20倍,而对DDVP、巴沙基本无明显交互抗性.结论长期使用一种杀虫剂容易产生抗性,亦可能对其它杀虫剂产生交互抗性,用药时应注意种类的选择,合理使用杀虫剂.

  • 标签: 家蝇 杀虫剂 交互抗性 DDVP 氯菊酯 巴沙
  • 简介:.真菌感染是临床上的顽固疾病,尤其当机体免疫力下降时,真菌侵入内脏及深部组织可引起严重疾病。近年来,由于广谱抗生素的广泛应用、爱滋病患者的日渐增多,真菌感染问题日渐突出。然而,迄今对内脏真菌病有效,即治疗多数致命性全身真菌病的抗生素只有两性霉素B(amphotericinB,AmB)AmB属多烯类抗真菌药,对念珠菌、隐球菌、组织胞浆菌、球孢子菌、青霉菌等都有很强的抗菌活性。50年代以来,已成为治疗深部真菌感染的首选药。

  • 标签: 两性霉素B 新型制剂 多烯类抗真菌药 合理 深部真菌感染 免疫力下降
  • 简介:【摘要】目的:研究氟康唑对两性霉素B透过血脑屏障的影响。方法:选取雄性KM小鼠分为两性霉素B (3 mg/kg)组,两性霉素B(3 mg/kg)+氟康唑(50mg/kg),两性霉素B(3 mg/kg)+ELacridar(2.5mg/kg)组,给药4天后测定血液、脑组织中两性霉素B的浓度;在脑毛细血管内皮细胞培养液中加入加入2ug/ml的AMB,而后分别加氟康唑(16 ug/ml)、Elacridar(1μM),37℃孵育60-180min。在60min、120min、180min取样测定细胞内两性霉素B的含量。结果:氟康唑、ELacridar对两性霉素B血药浓度、脑组织浓度无显著影响;氟康唑、ELacridar对脑毛细血管内皮细胞摄取两性霉素B无显著性影响。结论:氟康唑不影响两性霉素B透过血脑屏障。两性霉素B不是P糖蛋白(P-gp)和乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的底物,氟康唑和两性霉素B不存在由P-gp和BCRP介导的相互作用。

  • 标签: 氟康唑 两性霉素B P糖蛋白 乳腺癌耐药蛋白
  • 简介:摘要目的对真菌性角膜炎患者使用碘酊烧灼联合氟康唑和二性霉素B治疗的临床效果开展研究分析。方法2017年3月至10月我院对84例真菌性角膜炎患者进行研究分析,将患者分成三联组和二联组,二联组使用氟康唑联合二性霉素B治疗,三联组使用碘酊烧灼联合氟康唑和二性霉素B治疗,对两组的临床治疗情况进行比较分析。结果三联组的角膜溃疡平均消失时间是(20.5±2.6)d,前房脓肿平均消失时间是(18.8±2.4)d、异物感平均消失时间是(15.4±2.0)d、畏光流泪平均消失时间是(21.2±2.8)d,二联组分别为(24.8±2.9)d,(23.4±2.7)d,(17.8±2.2)d,(26.6±2.9)d,结果存在统计学差异性(P<0.05)。三联组的临床治疗有效率是97.62%,二联组的治疗有效率是83.33%(P<0.05)。结论真菌性角膜炎患者临床中使用碘酊烧灼联合氟康唑和二性霉素B治疗的效果比较好,可以推广使用。

  • 标签: 碘酊烧灼 氟康唑 二性霉素B 真菌 角膜炎
  • 简介:为探讨猪殃殃Galiumaparine抗药性生物型(R)对苯磺隆的抗性机制,测定了苯磺隆对猪殃殃抗性、敏感(S)生物型体内靶标酶[乙酰乳酸合成酶(ALS)]、代谢酶[谷胱甘肽-S-转移酶(GSTs)]及抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)]影响的差异。离体试验结果表明,苯磺隆对R、S生物型猪殃殃ALS的抑制中量(IC50)分别为0.682、0.718μg/L(有效剂量),R、S生物型猪殃殃ALS对苯磺隆的敏感性不存在差异。活体试验结果表明,苯磺隆茎叶喷雾处理后,R、S生物型ALS活力均表现为先上升,但S生物型上升幅度小,且随后快速下降,第3d即回落至对照之下,并维持在低于对照的水平,而R生物型ALS活力在第2d可达对照的4.10倍,第5d基本回落至对照水平,之后基本维持在对照水平;R生物型GSTs活力在第1d即开始上升,最高可达对照的2.40倍,而S生物型则表现为先下降,然后小幅回升,最高为对照的1.61倍,两者在10d左右均回落至对照水平;R生物型SOD活力与对照基本相同,而S生物型虽略有下降,但R、S间不存在显著差异;两者POD活力虽均有大幅提高,但亦不存在显著差异。结果表明,低水平抗药性生物型猪殃殃对苯磺隆产生抗性的原因可能是ALS过量表达及GSTs对苯磺隆的代谢作用加强,而不是由于ALS的敏感性下降,同时POD、SOD在减轻药害中也具有一定作用。

  • 标签: 猪殃殃 苯磺隆 杂草 抗药性 机制
  • 简介:随着科学技术的发展,防治家蝇的方法日新月异,在大力提倡综合防治以环境治理为主的方针中,应用化学防治方法仍为当前的主要手段之一。家蝇对杀虫剂发生抗药性是化学防治中的一个重要问题。尽管对抗性的研究已有近半个世纪的历史,在研究阻止抗性发生以及如何延缓抗性发展方面,许多方法及策略均被

  • 标签: 抗性水平 杀虫剂 家蝇 抗性发展 基因频率 抗药性
  • 简介:摘要两性霉素B泡腾片亦被称作莱帕,用于临床中阴道真菌感染的治疗,具有良好的治疗效果。为了能够使更多人了解两性霉素B泡腾片在阴道真菌感染当中的治疗效果,需要从药物化学及药理学两个方面分析该药品。本文对目前已有的两性霉素B泡腾片在治疗阴道真菌感染中治疗效果研究成果进行了分析,总结出两性霉素B泡腾片的分子结构以及作用机制,同时对两性霉素B泡腾片进行了药效学、耐药性、动力学的分析,以及阴道真菌感染临床治疗中使用该药品产生的不良反应。以此证明两性霉素B泡腾片是阴道真菌感染治疗当中的最理想药品。

  • 标签: 两性霉素B 阴道真菌感染 药学效果
  • 简介:

  • 标签:
  • 简介:目的:介绍国外治疗深部真菌病药物两性霉素B新剂型在临床的应用。方法:主要进入全球权威的临床医学文献数据库美国国立医学图书馆(NLN)的Mediline数据库,检索了近10年来有关两性霉素B新剂型在临床应用的大量文献,概括地进行综速和分析。结果及结论:国外临床应用的两性霉素B的剂型有10余种,并且很多剂型已经收入各国药典之中,而国内目前仪有3种,建议尽快开发各种新剂型,以满足临床各方面的需求。

  • 标签: 两性霉素B 临床应用 剂型
  • 简介:既然阶级斗争总是根本利害不同的人的对抗和冲突,那么在特定条件下人民内部出现的暂时的、局部的对抗,比如不同村组的农民相互争斗,个别企事业单位中工作人员之间打架相骂,少数地区公路上农民拦车哄抢化肥……能否说成是人民内部的阶级斗争呢?也不能。因为,对抗性矛盾与矛盾斗争的对抗形式两者是不同的。前者是矛盾的性质问题,后者是矛盾的斗争形式问题。

  • 标签: 对抗性矛盾 阶级斗争 人民内部 企事业单位 工作人员 对抗形式
  • 简介:目的评估白纹伊蚊对溴氰菊酯的抗性风险,预测抗性发展速率,为科学合理用药提供依据。方法采用群体汰选法获得抗性品系,采用数量遗传学的域性状分析法估算抗性现实遗传力(h2)并预测不同选择压力下抗性发展的速率。结果经过17代的室内选育,白纹伊蚊对溴氰菊酯的抗性达到36.7倍;白纹伊蚊对溴氰菊酯的抗性h2为0.1257,抗性风险较大;根据抗性发展规律,得出3个不同阶段的h2分别为0.1169(F0~F5)、0.1540((F5~F11)、0.0114(F11~F17),根据不同阶段的h2值预测不同选择压力下(死亡率50%、60%、70%、80%、90%),抗性上升10倍所需的代数分别为7.3~105.2、6.4~92.6、6.4~92.6、5~72、3.3~47.6、2.4~35.2代。结论白纹伊蚊对溴氰菊酯抗性风险大,应科学合理用药。

  • 标签: 白纹伊蚊 溴氰菊酯 现实遗传力 抗性风险评估
  • 简介:摘要:抗生素滥用导致抗生素抗性基因大量出现,是人类健康和环境安全的潜在威胁,是亟待处理的一类新兴环境污染物。抗生素抗性细菌和抗性基因存在于整个污水处理流程中,尤其是生物处理单元会产生数量庞大的生物污泥,是抗性基因的重要存储库,也是向环境中传播抗生素耐药性的热点。本章通过讨论预处理-厌氧消化对污泥中抗生素抗性细菌(ARB)及抗性基因(ARGs)的影响,为剩余活性处理的安全处理和处置提供一个新思路,也为降低污水处理厂抗生素抗性传播提供一定的理论指导。

  • 标签: 抗生素抗性细菌 抗生素抗性基因 厌氧消化 预处理 污泥