简介:目的观察淫羊藿苷对人胚肺二倍体成纤维细胞(MRC-5)衰老的干预作用与机制,为明确淫羊藿苷作为有效干预衰老的候选中药单体提供实验依据。方法MRC-5进行体外培养,利用淫羊藿苷进行干预,观察细胞的传代次数;利用β-半乳糖苷酶染色观察衰老细胞阳性率;MTT法检测细胞活力;分别使用单细胞凝胶电泳和流式细胞仪检测H2O2诱导细胞DNA损伤和凋亡变化。结果淫羊藿苷能够延缓MRC-5细胞的复制性衰老,促进细胞增殖,减轻H2O2诱导的细胞DNA损伤,促进受损细胞的凋亡。结论淫羊藿苷能够延缓二倍体细胞的复制性衰老,这可能与其能够减轻细胞DNA损伤有关。
简介:摘要目的探讨丹参酮IIA(TanshinoneⅡA,TanⅡA)对人肺腺癌细胞A549中HIF-1α及VEGF表达影响。方法实验分为对照组、血清组、生长因子组,采用WesternBlotting、QT-PCR及ELISA,观察HIF-1α、VEGF、AKT及MAPK表达的影响。结果不同浓度TanⅡA抑制A549细胞中HIF-1α蛋白的表达,但是不影响HIF-1αmRNA水平;不同浓度TanⅡA抑制A549细胞中VEGFmRNA及蛋白水平的表达;不同浓度TanⅡA抑制A549细胞中AKT和MAPK的激活,AKT抑制剂LY294002或MAPK抑制剂PD98059抑制A549细胞中HIF-1α蛋白的表达。结论TanⅡA通过下调AKT和MAPK信号通路抑制A549细胞中HIF-1α及VEGF的表达。
简介:目的建立基于微滤技术分离检验人血中脱落上皮细胞的新方法。方法选用微孔滤膜并构建细胞分离过滤平台,优化过滤参数;制备15组混合细胞悬液,每组包含2个等比例混合的样本,1个进行常规DNA检验,另1个经过滤平台过滤,取滤膜作DNA检验,对比两者的STR分型结果,评判过滤平台的细胞分离效果。结果当流量为250mL/h、滤膜孔径30μm时,白细胞滤除率可达90%以上,而脱落上皮细胞截留率不低于70%;对15组混合细胞悬液经分离检验,14组获得预期结果。结论该方法可用于人血中脱落上皮细胞的分离检验,能够改善此类检材中目的细胞的STR分型结果,为刑事案件中血迹浸染的烟蒂等混合生物检材的细胞分离检验提供了一种新思路。
简介:目的:外泌体是活细胞分泌的来源于多囊泡体的膜性囊泡,其主要作用包括携带与运输。雪旺细胞是周围神经再生中非常优秀的种子细胞,但其迁移能力较差,影响修复效果.本文旨在探讨外泌体和雪旺细胞共培养是否可以促进雪旺细胞迁移.方法:本实验通过分离纯化人脐带干细胞外泌体和大鼠坐骨神经雪旺细胞并鉴定,随后将其共培养于Transwell小室观察雪旺细胞迁移率.结果:通过人脐带干细胞超高速离心法得到的外泌体高表达干细胞标志物CD44(92.2±3.6%)、CD73(99.1±0.6%),并且低表达单核细胞表面抗原CD14(0.5±0.06%)以及造血千细胞表面抗原CD34(0.4±0.07%),外泌体鉴定高表达CD81和CD9;雪旺细胞培养鉴定纯度达(92.3±2.7)%;均符合实验要求。通过Transwell小室实验发现外泌体可以明显促进雪旺细胞的迁移,并且具有一定剂量关系:结论:外泌体可以提高雪旺细胞的迁移能力,从而使雪旺细胞在组织工程领域中的应用产生巨大突破.
简介:目的:建立无线粒体DNA(mtDNA)的人肺腺癌ρ^0A549细胞系。方法:在含50ng/mL溴化乙锭(EB)、100μg/mL丙酮酸钠和50μg/mL尿嘧啶核苷的RPMI1640细胞培养基中传代培养A549细胞;用低剂量EB连续诱导培养35d后,采用光镜观察、TaqMan探针法实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹鉴定无mtDNA的ρ^0A549细胞系;采用MTT法测定ρ^0A549细胞增殖曲线。结果:倒置显微镜下野生型ρ^+A549细胞为多角形,ρ^0A549细胞形态呈拉长枝状;qPCR结果显示,低剂量EB诱导35d的ρ^0A549细胞中无mtDNA的存在。Western印迹结果显示,ρ^+A549细胞中能表达核基因编码的线粒体蛋白SDHA和ATP5A,也能表达线粒体基因组编码的蛋白MT-COXI和MT-ATP6;ρ^0A549细胞中无MT-COXI和MT-ATP6蛋白表达,但核基因编码的SDHA和ATP5A蛋白能够正常表达。MTT结果显示,与ρ^+A549细胞相比,ρ^0A549细胞生长速度明显减慢,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:构建和鉴定了无mtDNA的人肺腺癌ρ^0A549细胞系,为后续探讨mtDNA缺失或突变与人肺腺癌发生之间的关系奠定了实验基础。
简介:摘要目的对PSP患者的CT影像特征进行分析,为临床诊疗提供参考。方法选取2017年1月—2018年12月,到我院进行治疗的18例PSP患者,所有患者均进行CT扫描,分析其临床、病理结果以及CT平扫、增强扫描的表现和征象。结果实性结节13例(72.22%),团块1例(5.56%),磨玻璃结节4例(22.22%);边界光滑14例(77.78%),4例(22.22%)患者有明显钙化密度影;CT平扫有晕征7例(38.89%),空气新月征1例(5.56%);增强扫描明显强化或中度强化13例(92.86%)。结论PSP病灶CT影像特征明显,可通过分析其表现和征象进行综合诊断。
简介:摘要目的研究分析在针对恶性滋养细胞肿瘤(GTT)肺转移中使用X线胸片和肺CT诊断后的价值和意义。方法研究资料为2018年1月-2019年7月本院收治的50例恶性滋养细胞肿瘤(GTT)肺转移患者,将其患者随机分成两组,常规组患者(25例)和实验组患者(25例),常规组通过X线胸片进行诊断,实验组在使用X线胸片诊断基础上使用肺CT进行诊断,比较两组恶性滋养细胞肿瘤(GTT)患者的临床诊断效果。结果常规组患者的肺转移检出率为76.00%,实验组患者的肺转移检出率为96.00%,常规组显著低于实验组,组间差异明显,(P<0.05);结论相较X线胸片诊断而言,肺CT对恶性滋养细胞肿瘤(GTT)肺转移患者的诊断效果更为明显,并且有助于期别的判定。