简介：目的：观察人胚胎成纤维细胞（FBs）对糖尿病足FBs生物学特性的影响，探讨其促进糖尿病溃疡愈合的机制。方法分离培养糖尿病创面FBs10例，分别与孕中期人胚胎皮肤FBs3例（实验组）、正常人皮肤FBs5例（对照组1）于transwell小室培养体系中间接共培养，并设立空白对照（对照组2）。绘制共培养体系中糖尿病足FBs生长曲线；观察共培养7d后糖尿病足FBs形态；共培养至第4、7d后，将各组糖尿病足FBs分离培养2d，测量和对比上清液中羟脯氨酸和TGF-β1含量；检测共培养第3、5、7d，β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色阳性细胞百分率。胚胎FBs制作三维培养应用于8例糖尿病足溃疡，比较治疗前后创面愈合时间，做自身前后对照研究。结果实验组糖尿病足FBs比2个对照组增殖活跃，形态更接近于正常。经胚胎FBs处理4、7d，糖尿病足FBs培养上清液中羟脯氨酸、TGF-β1明显增高，相对2个对照组差异均有统计学意义（羟脯氨酸4、7d：与对照组1相比P＝0.023、P＝0.007；与对照组2相比P＝0.007、P＝0.003；TGF-β14、7d：与对照组1相比P＝0.000、P＝0.000；与对照组2相比P＝0.000、P＝0.000）。实验组糖尿病足FBs的SA-β-gal染色阳性率在共培养第3、5及7d无明显变化，2个对照组则明显增高。8例临床糖尿病足溃疡应用胚胎FBs三维培养治疗后创面均愈合。结论胚胎FBs能显著促进糖尿病足FBs增殖，延缓老化表型出现，同时上调羟脯氨酸、TGF-β1的分泌，可能与促进创面愈合机制有关。

简介：人类肿瘤的90％来源于上皮组织，上皮细胞需要在生长信号的不断作用下避免分化和凋亡，获得无限复制的潜能，并依靠新生血管生成、获得侵袭、转移能力才能最终形成肿瘤。整个过程依赖于肿瘤细胞与宿主间质微环境的相互作用，遗传学和细胞生物学研究表明，间质细胞可以提供肿瘤细胞生长、增殖信号，并参与新生血管生成，

简介：目的寻找调控心脏成纤维细胞增殖的microRNA。方法微矩阵分析比较正常培养和经TGFβ诱导的人成年心脏成纤维细胞microRNA表达谱,发现受TGFβ调控的microRNA。RealtimePCR验证microRNA的表达改变。通过转染模拟物或antagomir,高表达或敲低miR-143表达,MTT实验观察对心脏成纤维细胞增殖的影响。结果TGFβ诱导心脏成纤维细胞中多个microRNA表达失调。MiR-143表达被TGFβ特异性诱导上调,但不受AngII、CTGF和TNFα的影响。高表达miR-143能够促进心脏成纤维细胞增殖10%左右,而敲低miR-143则显著抑制心脏成纤维细胞增殖。结论MiR-143在心脏成纤维细胞中受TGFβ信号通路调控,是心脏成纤维细胞增殖的调控因子。

简介：目的：探讨以鼠胚成纤维细胞为饲养层分离、培养鸡胚胎生殖细胞的方法和条件。方法：分离、培养12.5～13.5d鼠胚成纤维细胞。分离孵化5.5d鸡胚原始生殖细胞，原代培养时不使用饲养层，与性腺基质细胞共培养；继代培养时将其置于鼠胚成纤维细胞饲养层上，在含生长因子、分化抑制因子的培养体系中培养胚胎生殖细胞。结果：鼠胚成纤维细胞可连续传代18代以上（4个月），3～15代细胞可以用作饲养层细胞。分离的鸡胚胎生殖细胞在饲养层上可增殖形成典型胚胎生殖细胞集落，并能连续在体外培养超过9代。集落未分化标志高碘酸希夫反应（PAS）呈强阳性，体外分化实验表明胚胎生殖细胞具有多能性。结论：用鼠胚成纤维细胞作为饲养层能获得可连续增殖的胚胎生殖细胞。

简介：心脏成纤维细胞作为一种间充质细胞,调控着生理和病理状态下心肌细胞生物学和电生理活动,并在心肌梗死时通过替代已破坏的心肌细胞来保持心肌结构的完整性。近年来,运用转录因子、microRNAs将心脏成纤维细胞直接重编程为心肌样细胞的相关研究取得了一系列进展。本文总结了近年心脏直接重编程体外和体内相关实验研究,并分析这一技术在修复坏死心肌和改善心功能方面的临床应用前景。

简介：

简介：摘要目的探究瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFs)中是否存在Warburg效应，及增生性瘢痕成纤维细胞(HSFs)、萎缩性瘢痕成纤维细胞(ASFs)是否存在类似现象。方法瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、萎缩性瘢痕及正常皮肤标本，均来源于中国医学科学院整形外科医院患者手术后废弃组织，每种标本各来源于8例患者。分离培养KFs、HSFs、ASFs及正常皮肤成纤维细胞(NFs)，检测各组细胞葡萄糖消耗量与乳酸产生量；以qPCR检测各组细胞糖酵解关键酶mRNA的相对表达量；利用2-脱氧-D-葡萄糖(2-DG)抑制KFs与NFs中糖酵解，对比2种细胞增殖活性的变化。结果KFs组的葡萄糖消耗量及乳酸产生量较NFs组分别增高达45.5%、38.1% (P<0.01)；而HSFs组、ASFs组与NFs组相比，差异无统计学意义(P>0.05)。KFs组己糖激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶mRNA的相对表达量分别为NFs组的4.7、2.7、1.8倍(P<0.05)；而HSFs组、ASFs组与NFs组相比，差异均无统计学意义(P>0.05)。2-DG作用下，KFs组与NFs组细胞增殖活性分别降低37.5%、27.0%，糖酵解抑制剂对KFs增殖活性的抑制作用显著高于NFs组(P<0.05)。结论KFs中存在Warburg效应，而HSFs及ASFs中无类似现象。

简介：目的初步探讨低氧环境诱导人牙周膜成纤维细胞（PDLCs）凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响。方法体外正常氧（20%O2）或低氧（1%O2）状态下培养PDLCs,光学显微镜观察比较低氧诱导前后PDLCs形态学变化;台盼蓝染色实验检测PDLCs细胞死亡率的差异;凋亡实验比较各组PDLCs凋亡水平的变化。Western免疫印迹检测低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、p53、Caspase-3、Bcl-2与Bcl-xL蛋白的表达水平。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果随着低氧处理时间延长,人PDLCs细胞数量减少,体积逐渐变小,细胞胞质浓缩。台盼蓝染色实验与凋亡实验均证实低氧处理48h后PDLCs死亡率（t=3.855,P=0.018）与凋亡率（t=6.621,P=0.003）显著增高。Western免疫印迹结果显示PDLCs中HIF-1α、p53、Caspase-3蛋白随着低氧刺激时间延长逐渐升高,Bcl-2与Bcl-xL蛋白逐渐降低。结论低氧能促进PDLCs形态变化、凋亡及凋亡相关蛋白的表达。

简介：肿瘤相关成纤维细胞（TAF）对肿瘤发生、生长、血管形成、浸润与转移有重要作用。TAF细胞通过产生旁分泌因子，影响上皮细胞转化，在肿瘤——宿主界面微环境形成中发挥重要作用。本文对TAF细胞的起源，TAF细胞形态及生物学特征及TAF细胞调节信号通路与肿瘤细胞的相互作用的研究现状作一综述。

简介：摘要目的检测甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma，PTC）相关成纤维细胞（tumor-associated fibroblasts，TAFs）中成纤维细胞特异性蛋白-1（fibroblast-specific protein 1，FSP1/S100A4）、平滑肌肌动蛋白-ɑ（ɑ-smooth-muscle actin，ɑ-SMA）和成纤维细胞活化蛋白（fibroblast-activated protein，FAP-ɑ）的表达，探究其与PTC发生、发展的关系。方法通过免疫组化SP法检测FSP1/S100A4、ɑ-SMA、FAP-ɑ在正常甲状腺组织和PTC中的表达情况，并分析这些指标与重要临床病理参数的关系。结果FSP1/S100A4、ɑ-SMA和FAP-ɑ在PTC间质细胞中可见阳性表达，而在正常甲状腺组织的滤泡上皮或间质细胞内均不表达。患者肿瘤的大小、是否有淋巴结转移及TNM的不同分期与FAP-ɑ的阳性病例数有统计学差异（χ2=6.833，P<0.05；χ2=10.296，P<0.05；χ2=4.910，P<0.05）；ɑ-SMA阳性病例数在是否被膜侵犯、淋巴结转移有显著差异（χ2=6.008，P<0.05；χ2=11.766，P<0.05），而S100A4的阳性病例数在患者的性别、年龄、瘤体的大小、有无被膜侵犯、有无淋巴结转移及患者的TNM分期差异均没有统计学意义（P>0.05）。结论PTC中TAFs的存在可能提示肿瘤具有较强的侵袭转移能力，TAFs有望成为PTC诊疗的一个新靶点。

简介：摘要目的探讨人真皮乳头层成纤维细胞（Fp）、网状层成纤维细胞（Fr）和肌成纤维细胞（MFB）在瘢痕疙瘩皮损组织中的表达与分布。方法2019年5-12月在武汉大学人民医院皮肤科门诊确诊的15例瘢痕疙瘩患者，男8例，女7例，年龄20~50岁，取皮损组织，以15例年龄匹配的女性乳房整形术正常皮肤组织为对照。采用双重免疫荧光染色法检测成纤维细胞活化蛋白（FAP）、CD90和α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）在瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中的分布。从3例正常皮肤和3例瘢痕疙瘩组织中分离成纤维细胞原代培养，采用10 ng/ml转化生长因子β1（TGF-β1）体外处理两组细胞0~48 h，观察细胞表型的变化，荧光定量RT-PCR和Western印迹检测FAP、CD90和α-SMA mRNA和蛋白表达。两组间差异比较采用t检验。结果免疫荧光结果显示，正常皮肤组织中，FAP+/CD90-细胞主要分布在真皮浅层，FAP-/CD90+细胞集中在真皮深层，CD90+细胞几乎不表达α-SMA；瘢痕疙瘩组织深层可见大量FAP+和CD90+细胞，大量CD90+细胞同时表达α-SMA。双重免疫荧光染色显示，正常皮肤成纤维细胞几乎不表达α-SMA，瘢痕疙瘩成纤维细胞表达α-SMA；TGF-β1处理24 h时，正常成纤维细胞和瘢痕疙瘩成纤维细胞α-SMA+细胞荧光强度（21.058 ± 0.709、27.112 ± 0.097）均高于未处理组（11.312 ± 0.636、21.306 ± 0.464），t值为22.430、13.370，P < 0.05。RT-PCR和Western印迹显示，TGF-β1处理48 h时，瘢痕疙瘩成纤维细胞FAP、CD90、α-SMA mRNA相对表达水平（92.610 ± 3.667、1.366 ± 0.105、3.240 ± 0.141）与蛋白表达水平（0.652 ± 0.073、1.046 ± 0.119、0.946 ± 0.117）均高于处理前（均P < 0.05）。结论瘢痕疙瘩组织真皮深层的CD90+（Fr）细胞异常增生，提示针对真皮深层异常增殖活跃的FAP-/CD90+（Fr）细胞群进行定向干预可能提高瘢痕疙瘩治疗疗效。

简介：目的建立东方田鼠胚胎成纤维永生化细胞系,为全面研究东方田鼠抗日本血吸虫机制以及开展不同动物成纤维细胞间比较研究奠定基础和提供细胞实验材料。方法运用脂质体介导的基因转染法将pSV3neo质粒导入第3代东方田鼠胚胎成纤维细胞,经G418筛选抗性克隆并扩大培养,建立永生化细胞系;用PCR检测细胞株中SV40T基因的整合,RT-PCR鉴定SV40T基因在转染细胞中的表达;绘制东方田鼠胚胎成纤维永生化细胞生长曲线。结果阳性细胞克隆已扩大培养并稳定传代50代,经鉴定SV40T抗原已整合到东方田鼠胚胎成纤维细胞中且稳定表达。结论成功建立东方田鼠胚胎成纤维永生化细胞系。

简介：通常从易获得的组织中产生的诱导性多能干细胞（iPS）更容易满足临床应用需求。牙龈是一种非常容易获得的组织，在牙科治疗中经常被切除，并作为医学废物被处理掉。从这样的牙龈组织中分离细胞，病人所受痛苦极小。方法和结果：本实验中将4个因子（Oct3／4、Sox2、Klf4和C—Myc，形成GF—iPS-4F细胞）或3个因子（和GF—iPS-4F细胞相似，

简介：摘要近20年来，细胞生物学技术的发展推动了瘢痕疙瘩的相关研究。瘢痕疙瘩成纤维细胞（KFb）是瘢痕疙瘩中的主要效应细胞，与瘢痕疙瘩的发生发展密切相关。KFb在生物学特性、基因表达等方面与正常成纤维细胞有明显差异。该文从多个角度对KFb的特性进行了综述，详细描述了其生物学特性如显微结构、代谢特点、增殖性质等情况，并介绍了KFb的异质性与基因组学等方面的主要特征。对KFb研究的不断深入将有助于阐明瘢痕疙瘩的发病机制并为瘢痕疙瘩的防治提供宝贵策略。

简介：Graves眼病（GO）是一种器官特异性自身免疫性疾病．在Graves病患者中20％－25％会发展为G[1-2]．对于50岁以上男性吸烟患者及有微血管病变的患者来说发展为GO的风险更高。部分GO患者只表现为轻度眼部不适，但约5％的GO患者有严重的眼部病变．包括球结膜水肿、突眼甚至视力丧失。其发病机制目前尚未明确．病理变化包括免疫活性细胞浸润，多种促炎细胞因子释放．糖胺聚糖（GAG）堆积，眼外肌肿胀纤维化。球后脂肪细胞增殖、脂肪堆积。

简介：摘要目的研究人参皂苷对小鼠成纤维细胞生长和衰老的影响。方法自新生昆明小鼠身上分离培养成纤维细胞，加入不同浓度的人参皂苷，观察细胞生长曲线，MTT法分析细胞活力。结果中浓度人参皂苷可以在传代后6-12d显著增加活细胞。结论一定浓度的人参皂苷可以延迟细胞进入衰老和死亡状态。

简介：摘要成纤维细胞活化蛋白α（FAP-α）是一种丝氨酸蛋白酶，在肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）中过表达，本文概述了该酶在的生物学特性及其在肿瘤诊治中的应用。

简介：无

简介：摘要目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、骨形态发生蛋白(BMP)-12基因序贯转染兔脂肪干细胞向成纤维细胞分化的可能性。方法2017年1月至2018年12月，原代培养兔脂肪干细胞(取自新西兰大耳兔颈背部皮下脂肪)，细胞表面抗原CD44、CD49d、CD106检测结合成骨细胞诱导分化对培养的细胞进行鉴定，脂质体介导的方法序贯转染BMP-12和bFGF基因，蛋白质印迹法(Western blot)检测目的基因BMP-12和bFGF蛋白的表达；实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测转染细胞Ⅰ型胶原和弹性蛋白RNA的表达情况。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示，应用单因素方差分析比较组间差异。结果兔脂肪组织中分离出来的脂肪间充质干细胞(ADSCs) CD44、CD49d表达阳性，CD106表达呈阴性。Western blot检测筛选后的ADSCs稳定表达BMP-12(0.229±0.005)和bFGF(0.208±0.019)蛋白(F＝120.221，P<0.05)，差异有统计学意义。双基因转染的ADSCsⅠ型胶原(2.250±0.007，F＝340.103，P<0.05)和弹性蛋白(1.807±0.008，F＝107.314，P<0.05)的mRNA表达最高，差异均有统计学意义。结论pcDNA3.1＋绿色荧光蛋白(GFP)-BMP-12和pcDNA3.1＋红色荧光蛋白(RFP)-bFGF可以促进ADSCs向成纤维细胞分化，可能在组织工程技术修复韧带损伤中具有重要作用。

简介：摘要目的观察分析冠层成纤维细胞生长因子信号调节因子2(CNPY2)在甲状腺乳头状癌(PTC)患者癌组织及血清上的表达，探讨其临床应用价值。方法2010年1月至2012年12月山东省立医院乳腺甲状腺外科收治并行手术的PTC患者92例(PTC组)，良性病变组45例，组织切片做免疫组织化学(IHC)；PTC组术前患者血清样本92例、良性病变组45例及正常对照54例，进行血清酶联免疫吸附试验(ELISA)。采用t检验、秩和检验及受试者工作特征(ROC)曲线进行分析。结果PTC患者癌组织CNPY2的IHC得分[9.74(8.00，12.00))]均显著高于癌旁组织[5.78(4.00，8.00)，Z＝8.252，P<0.01]和良性病变组织[5.87(4.00，8.00)，Z＝6.823，P<0.01]。CNPY2蛋白在年龄≥55岁与<55岁PTC患者[11.47(12.00，12.00)比9.40(8.00，12.00)，Z＝3.082，P<0.01]、女性与男性患者[10.05(8.00，12.00)比8(8.00，8.00)，Z＝3.421，P<0.01]、淋巴结转移与未转移患者[10.44(8.00，12.00)比9.28(8.00，12.00)，Z＝2.033，P<0.05]、恶性肿瘤分期(TNM分期)Ⅱ期与Ⅰ期患者[12.00(12.00，12.00)比9.58(8.00，12.00)，Z＝2.452，P<0.05]差异均有统计学意义。PTC患者血清CNPY2的浓度(μg/L)[0.19(0.13，0.23)]显著高于正常组[0.13(0.13，0.15)，Z＝4.273，P<0.01]及良性组[0.15(0.10，0.17)，Z＝2.792，P<0.01]；PTC患者中女性血清CNPY2浓度(μg/L)[0.22(0.14，0.29)]显著高于男性[0.16(0.13，0.17)，Z＝3.687，P<0.01]。根据受试者工作特征曲线确定的最佳截断值0.159 μg/L，分CNPY2高值组和低值组，并将PTC患者分为PTC组(42例)、合并淋巴细胞性甲状腺炎的PTC组(21例)及合并结节性甲状腺肿或腺瘤样增生的PTC组(29例)，发现PTC组中抗甲状腺球蛋白抗体在CNPY2高值组与低值组中比较差异有统计学意义[31.17(10.10，61.01)比10.39(10.21，10.43)，Z＝2.043，P<0.05]。结论通过检测PTC患者组织及血清CNPY2的表达水平，分析其与病理因素及甲功血液指标的相关性，CNPY2有助于PTC的预测。