简介：应用DNA聚合酶链式反应(PCR)技术,对p16抑癌基因(CDKN2)进行体外定点突变,在p16cDNA中引入第48位密码子CCG(Pro)→CTG(Leu)和第74位密码子GAC(Asp)→AAC(Asn)突变,构建了p16-P48L和p16-D74N突变体。野生型和突变型p16cDNA克隆于pcDNA3构建pCMV-p16、pCMV-p16P48L和pCMV-p16D74N真核表达载体,导入纯合缺失p16基因的人肺癌细胞株H460,经RNA点杂交、RNA印迹和细胞免疫化学染色,检测到P16表达。通过比较表达野生型和突变型P16的H460细胞在~3H-TdR掺入及细胞所在周期的差异,证实P16表达抑制细胞进入S期,而P48L和D74N突变体对细胞进入S期没有什么影响,提示P48L和D74N突变导致P16蛋白功能丧失。

简介：Circulargenomes,beingthelargestproportionofsequencedgenomes,playanimportantroleingenomeanalysis.However,traditional2Dcircularmaponlyprovidesanoverviewandannotationsofgenomebutdoesnotofferfeature-basedcomparison.Forremedyingtheseshortcomings,wedeveloped3DGenomeTuner,ahybridofcircularmapandcomparativemaptools.Itscapabilityofviewingcomparisonsbetweenmultiplecircularmapsina3Dspaceoffersgreatbenefitstothestudyofcomparativegenomics.Theprogramisfreelyavailable(underanLGPLlicence)athttp://sourceforge.net/projects/dgenometuner.

简介：QuestionsconcerningthefunctionalroleofthehollowregionofthebutterflyPyrameisatalanta(L.)scaleareexperimentallyinvestigated.Attentionwasinitiallydirectedtothisproblembyobservationofthecomplexmicrostructureofthebutterflyscaleaswellasotherstudiesindicatinghigherliftonbutterflywingscoveredwithscale.Theaerodynamicforcesweremeasuredfortwooscillatingscalemodels.ResultsindicatedthattheaircavityofanoscillatingmodelofthePyrameisatalanta(L.)scaleincreasedtheliftbyafactorof1.15andreducedthedampingcoefficientsbyafactorof1.38.Themodificationoftheaerodynamiceffectsonthemodelofbutterflyscalewasduetoanincreaseofthevirtualairmass,whichinfluencedthebody.Thehollowregionofthescaleincreasedthevirtualairmassbyafactorof1.2.Thevirtualmassofthebutterflyscalewiththehollowregionwasrepresentedasthesumofairmassoftwoimaginarygeometricalfigures:acircularcylinderaroundthescaleandaright-angledparallelepipedwithinthehollowregion.TheinteractionmechanismofthebutterflyPyrameisatalanta(L.)scalewithaflowwasdescribed.Thisnovelinteractionmechanismexplainedmostgeometricalfeaturesoftheairpermeablebutterflyscale(invertedV-profileoftheridges,nozzleofthetipedge,hollowregion,andopeningsoftheupperlamina)andtheirarrangement.

简介：AktandBcl-xLbothpromoteresistancetoapoptosis.AcomparisonofAkt-andBcl-xL-dependentcellsurvivalwasundertaken.ExpressionofconstitutivelyactiveAktallowscellstosurviveforprolongedperiodsintheabsenceofgrowthfactors.ThissurvivalcorrelateswiththeexpressionlevelofactivatedAktandiscomparableinmagnitudetotheprotectionprovidedbytheanti-apoptoticgeneBcl-xL.Althoughbothgenespreventcelldeath,Akt-protectedcellscanbedistinguishedfromBcl-xL-protectedcellsonthebasisofincreasedglucosetransporterexpression,glycolyticactivity,mitochondrialpotential,andcellsize.Inaddition,Akt-expressingcellsrequirehighlevelsofextracellularnutrientstosupportcellsurvival.In

简介：

简介：目的：选择发酵系统中各可控因素的最佳水平组合，从而减少各种干扰的影响，以获得稳健的赖氨酸产量。方法：利用田口法的内外表与Box性能规则优化赖氨酸发酵条件。结果：通过实验得知，转速、硫酸铵和葡萄糖浓度对发酵影响较大；结果稳定的最优发酵条件为初始葡萄糖浓度为80g/L、硫酸铵浓度为42g/L、转速为225r/min、初始pH值为6.7、接种量为8%。经实验验证，最优化发酵条件是低灵敏度的，最优目标值比较稳健。在10L自动发酵罐上培养65h，L-赖氨酸盐酸盐的产量为165.68g/L，比优化前提高了12.4%。结论：基于稳健性设计所得的最优发酵条件参数，可使目的产物产量稳定，便于生产操作。

简介：目的研究阻断CD40-CD40L共刺激信号通路对移植皮肤免疫排斥反应的影响。方法通过RT-PCR技术克隆了呈可溶性表达的CD40L分子胞外区（sCD40L）,利用K14启动子构建了sCD40L皮肤特异性表达载体,并利用该载体制备了转基因小鼠。结果所克隆的CD40L胞外区片段其大小及序列符合预期;以哺乳动物表达载体PCI为骨架,通过DNA重组,获得了含K14启动子和sCD40L编码区的皮肤特异性表达载体K14-sCD40L;通过显微注射和胚胎移植,PCR筛选检测：49只G0代小鼠有1只小鼠扩增出特异性条带,阴性对照无条带。结论成功建立sCD40L转基因阳性小鼠。

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简介：在这研究，L1蛋白质定序的人的乳头状瘤病毒(HPV)的107种类型从可得到的数据库，和这些HPVL1蛋白质的原子本地化信号(NLS)被获得被生物信息的分析分析并且预言。从107种类型，39种类型的NLS被PredictNLS软件(由两部组成的NLS的35种类型和单音的深裂的NLS的4种类型)预言。留下的HPV类型的NLS象NLS的一般规则一样根据特征和已经预言的NLS的相同被预言。根据结果，HPVL1蛋白质的107种类型的NLS被分类进15个范畴。在一样的NLS范畴的HPVL1蛋白质的不同类型能分享类似或一样的nucleocytoplasmic运输小径。他们可能被用作一样的目标阻止并且对待HPV感染的不同类型。结果也证明生物信息的技术能被用来分析并且预言蛋白质的NLS。

简介：据国外媒体1月29日报道。最新研究显示，维生素D或能缓解哮喘症状，体内维生素D含量不足的患者，哮喘症状更严重。

简介：C3d是补体C3不可再被酶解的最小片段,在抗原特异性免疫建立之前,C3d可识别非己抗原并与之共价结合,增强了抗原递呈细胞的递呈能力、降低了B细胞的活化阈、提高特异性抗体的滴度、促进抗体亲和力成熟等.近年来研究显示,C3d还可以促进抗原特异性细胞免疫应答水平并改变机体免疫应答模式.所以,C3d是连接固有性免疫和获得性免疫的桥梁.本文对C3d的分子生物学特征、生物学功能以及作为分子佐剂可能的分子机制进行了简要总结.

简介："第三次全国农作物种质资源普查与收集行动"重庆项目组于2015-2017年历时3年,从重庆19个区县收集豌豆地方种质资源56份。豌豆种质资源在重庆地区分布呈现出范围广、海拔跨度大的特点。本研究对上述豌豆资源的14个性状进行了遗传多样性分析,结果表明该批资源多样性丰富,其中多样性指数最高的质量性状和数量性状分别是荚型和百粒重;变异系数最大的是分枝数。聚类分析将该批豌豆资源划分为5大类群,第Ⅰ类群为大籽粒和食荚型材料;第Ⅱ类群为高产、中粒型材料;第Ⅲ类群为直立型、早熟型材料;第Ⅳ类群为叶用型兼食荚型材料;第Ⅴ类群为籽粒食用型材料。这些豌豆资源经重庆不同地区和民族农民长年选择后,在抗逆性、食荚性、食叶性、籽粒特性等方面发展出了独特性状,利用好这些资源将为今后的豌豆产业发展注入新的多样性。

简介：聚左旋赖氨酸(poly(L-lysine))可以作为基于载体应用于基于转染。但由于DNA转染效率较低,现在对于聚左旋赖氨酸的研究更多的集中在对于其修饰上。本实验是在前人的基础上对已合成的PLLz和mPEG-PLLz进行脱保护,得到了重复单元为80、100、120的PLL,mPEG-PLL,对得到的材料进行了细胞毒性,荧光素梅转染定性以及定量的实验。分析得出结论相同重复单元的mPEG-PLL的转染效率要高于PLL。

简介：心肌细胞膜上的L型Ca^2+通道具有重要的生理意义，尤其在信号转导中发挥重要作用。近年来，由于膜片钳与分子生物学技术的发展，人们对离子通道的认识更加深入。有关L型Ca^2+通道的信号转导途径日渐清晰，本文分别在蛋白激酶A、蛋白激酶C、磷脂酰肌醇3激酶、G蛋白βγ亚基等途径对心肌L型Ca^2+通道调节信号转导的研究进展作一综述。

简介：Wntsignalingplaysanimportantroleinembryogenesisandtumorgenesis.AlthoughthemechanismabouthowWntstransducetheirsignalingfromreceptorfrizzled(Fz)tocytosolhasnotbeenunderstood,dishevelled(Dvl)proteinwasconsideredastheintersectionofWntsignaltraffic.Inthisstudy,wecharacterizedthefunctionofthreedomains(DIX,PDZandDEP)ofDvl-1incanonicalWntsignaltransductionandDvl-1membranetranslocation.ItwasfoundbothDIXandDEPdomainweresufficienttoblockWnt-3a-inducedLEF-1transcriptionalactivityandfreecytosolβ-cateninaccumulation;whereasPDZdomainandafunctionalmutantformofDEPdomain(DEP-KM)hadnoeffectoncanonicalWntsignaling.Inaddition,whencotransfectedwithFz-7,DEPdomain,butnotDIX,PDZorDEP-KM,translocatedandco-localizedwithFz-7totheplasmamembrane,whichwassimilartoDvl-1.Furthermore,itwasDEPdomainthatcouldblockFz-7-inducedmembranetranslocationofDvl-1viaapossiblecompetitivemechanism.TheseresultsstronglysuggestthatDEPdomainisresponsibleforthemembranetranslocationofDvl-1proteinuponWntsignalstimulation.

简介：Ithasbeenshownthattheprogressinthedeterminationofmembraneproteinstructuregrowsexponentially,withapproximatelythesamegrowthrateasthatofthewater-solubleproteins.Inordertoinvestigatetheeffectofthis,ontheperformanceofpredictionalgorithmsforbothα-helicalandβ-barrelmembraneproteins,weconductedaprospectivestudybasedonhistoricalrecords.WetrainedseparatehiddenMarkovmodelswithdifferentsizedtrainingsetsandevaluatedtheirperformanceontopologypredictionforthetwoclassesoftransmembraneproteins.Weshowthattheexistingtop-scoringalgorithmsforpredictingthetransmembranesegmentsofα-helicalmembraneproteinsperformslightlybetterthanthatofβ-barreloutermembraneproteinsinallmeasuresofaccuracy.Withthesamerationale,ameta-analysisoftheperformanceofthesecondarystructurepredictionalgorithmsindicatesthatexistingalgorithmictechniquescannotbefurtherimprovedbyjustaddingmorenon-homologoussequencestothetrainingsets.Theupperlimitforsecondarystructurepredictionisestimatedtobenomorethan70%and80%ofcorrectlypredictedresiduesforsinglesequencebasedmethodsandmultiplesequencebasedones,respectively.Therefore,weshouldconcentrateoureffortsonutilizingnewtechniquesforthedevelopmentofevenbetterscoringpredictors.

简介：心脏压力负荷导致心肌肥厚的过程是心衰发生的关键环节。已有研究表明，控制心脏收缩的细胞钙致钙释放过程在心肌肥厚及心衰状态下发生缺损，但分子机制尚未阐明。我们以主动脉结扎手术建立压力负荷的大鼠心肌肥厚模型：实验组分为假手术组、代偿性肥厚组（CHT）和失代偿性肥厚组（DHT），以松钳一共聚焦成像技术研究单个L-型钙通道（LCC）与ryanodine受体（RyR）间的钙信号耦联。我们发现DHT中LCC—RyR分子耦联潜伏期延长49％，耦联成功率降低47％，失败概率提高72％，证明DHT进入了一种“分子间衰退”状态。出人意料的是，心功能正常的CHT也发生分子间衰退，并与锚定肌质网与细胞膜的junctophilin蛋白表达下降有关，表明分子间耦联衰退在细胞功能变化显现之前已经潜性地发生。与此一致，细胞兴奋期钙释放同步性降低，但钙释放总量和细胞钙瞬变在CHT并无变化。这些结果提示，在一个我们称为“稳定余量”（stabilitymargin）的范围内，分子间耦联衰退不会影响细胞兴奋收缩耦联能力，只有分子间耦联衰退超出稳定余量，心衰才会发生。潜性的分子间耦联衰退的发现对早期防治心衰有重要意义。

简介：目的：构建汉滩病毒包膜糖蛋白基因的真核表达载体，并加入可增强免疫应答效应的细胞因子CD40L基因，检测其可否在真核细胞中表达。方法与结果：参照GenBank中汉滩病毒M基因和小鼠CD40L的全基因序列设计引物，通过聚合酶链反应（PCR）获得M和CD40L基因片段，将其与pCI—neo载体相连，测序证实该载体构建成功后，将此真核表达载体以脂质体转染法转染至哺乳动物细胞CHO—K1中，利用间接免疫荧光法（IFA）检测发现M基因和CD40L基因可以同时表达于CHO-K1细胞中。结论：构建了带有CD40L基因的汉滩病毒包膜糖蛋白重组质粒并获得表达，为深入研究汉滩病毒感染后包膜糖蛋白引起的特异性免疫应答规律奠定了实验基础。

简介：蚜虫Therioaphismaculata的抽象生物学在苜蓿(MedicagosativaL.)上被学习，包括四抵抗(Mesa-Sirsa，CUF101，贝克和Lahontan)并且二易受影响(弧和Caliverde)苜蓿栽培变种，并且大多数之一收割了巴西栽培变种，Crioula。在控制条件下面，抗生现象(即，减少的长寿，肥沃和蚜虫的增加的死亡)主要在抵抗苜蓿栽培变种上被观察，除了在Lahontan上。Crioula似乎对蚜虫容忍。现在的数据支持栽培变种的地理限制用法，并且我们作为抗生现象的来源建议贝克和Mesa-Sirsa，并且提供热带T的生物信息。苜蓿上的maculata遗传因子型。

简介：目的探讨L型嗜肺巴氏杆菌在诊断学及流行病学上的意义。方法青霉素液体法诱导，并对嗜肺巴氏杆菌L型的生物学特性进行系统观察。结果嗜肺巴氏杆菌L型具有典型的“煎蛋状”(L型)和“丝状”(F型)菌落，扫描电镜观察，L型菌体呈球状、杆状、长丝状：革兰染色呈阴性、缠绕的长丝体，并具有圆球体及巨型体，细胞壁染色显示细胞壁缺失：对紫外线、新洁尔灭抵抗力较原菌增强5-10倍；自然干燥环境中，原菌2d死亡，而L型可存活12d：能透过0．45lam滤膜；回复的最初几代，其菌体形态较原菌大数倍。结论L型嗜肺巴氏杆菌在形态学方面有较大变化，对理化因素及外界环境抵抗力增强，有可能透过胎盘屏障垂直传播。本研究提示L型嗜肺巴氏杆菌在该菌诊断学及流行病学上有重要意义。