简介:鉴定合成的或通过高通量随机组合方法获得的潜在功能片段的生物学功能需要一套高效便捷的酵母表达专用载体。酵母表达载体pYES2多克隆位点处不含起始密码子,通过设计含有ATG和EcoRⅠ酶切位点的特异性引物扩增一段Intron,利用In-Fusion重组技术(Clontech)将该片段构建至酵母表达载体pYES2,得到一个含有ATG的重组酵母表达载体pYES2-ATG。为了检测该载体的功能,扩增不含起始密码子的DNA序列nlea,该序列由本实验室设计合成,具有潜在的耐盐功能。构建重组表达载体pYES2-ATG-nlea在酵母中进行功能鉴定。研究结果表明,半乳糖诱导后,含pYES2-ATG-nlea的重组酵母菌株耐盐能力明显高于含pYES2-ATG空质粒的菌株,表明在该载体系统上的添加了起始密码子的nlea成功表达,具有一定的耐盐性,同时也证明改造的载体系统可用于没有起始密码子的编码区序列的功能筛选和鉴定。pYES2-ATG酵母载体系统不影响原始载体基本功能元件的表达,同时能使不含起始密码子编码区序列在酵母中正常表达,在大规模进行多个基因的功能鉴定中具有重要的应用价值。
简介:湖北省农机人才长期匮乏,结构不合理、层次不髙、能力不强,难以适应新时代农机化发展的需要,加快培育大批适应农机化发展需要的新型职业农民成为现实需要和战略选择。为此,我们对近年来湖北省农机化教育培训工作开展调研,分析目前存在的问题及其原因,提出了一些加快农机行业职业农民队伍建设步伐的意见和建议。1基本情况近年来,每年中央和省级财政投入湖北省培育资金近1亿元。2017年培育补助标准进一步提高,专业技能型和服务型培训补贴提高到每人1200元。各级农机部门以新型职业农民培育为平台,全方面、分层次、多形式、系统性地开展农机教育培训。各地积极宣传党的惠农政策,狠抓农机人才队伍建设,推广先进适用的农机化新技术新机具,指导农民提高农机装备技术含量,帮助拓展农机社会化服务领域,培养造就了一批较髙素质的新型职业农民。