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  • 简介:κ-银环蛇毒素(κ-bungarotoxin,κ-BGT)属于突触后神经毒素,能选择性的识别α3β2亚型的神经元烟碱乙酰胆碱受体,可作为药理学研究的工具药。由于κ—BGT分离提取比较困难,难于从自然界中大量获取,无法满足各项研究的需要,所以本文探讨在大肠杆菌和毕赤酵母表达体系中表达κ—BGT及其在实验室规模生产的可行性。

  • 标签: 表达 银环蛇毒素 乙酰胆碱受体 药理学研究 亚型 基因
  • 简介:应用DNA重组技术,构建了金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的原核表达载体pET22b(+)-SEB,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。经终浓度为0.4mmol/LIPTG的诱导作用,可获得分子量约为29KD的表达蛋白。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果表明,重组表达的SEB主要以可溶的形式存在于细胞周质中,表达SEB的量约占菌体总蛋白的30%左右。重组表达的SEB经HiTrap^TMchelatingHP柱纯化能达到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。ELISA试验表明纯化的重组SEB与抗天然野生型SEB单克隆抗体呈现明显的阳性免疫反应。

  • 标签: SEB 重组表达 金黄色葡萄球菌肠毒素B SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 ELISA试验 ET
  • 简介:真核细胞表达载体在生物技术的许多领域都具有很好的应用前景,尤其在防化研究中的应用受到了各国军界的重视。对目前国内外真核表达载体的构建策略、IRES序列的应用及存在的问题进行了评述,并对其发展趋势进行了探讨。

  • 标签: 真核表达载体 启动子 生化防护技术 基因重组 IRES 化学武器
  • 简介:为满足科研和医学应用上的需要,用基因工程的方法制备海蛇神经毒素。首先人工合成海蛇神经毒素Erabutoxin(Eb)的基因,重组到T载体。通过PCR扩增Eb基因,用限制性内切酶把基因片段酶切成黏性末端,然后将目标基因插入表达载体pPET22b(+),电转重组质粒到宿主菌BL21(DE3),在25℃0.5mmol/LIPTG诱导培养8h收获培养物,SDS-PAGE电泳检测目标蛋白大部分存在于包涵体中,用8mol/L尿素溶解后,利用C末端的His-6与Ni^2+离子亲和层析纯化,得到单一的电泳蛋白带。

  • 标签: 海蛇神经毒素 DNA克隆 基因表达 包涵体 亲和层析
  • 简介:美国国防部2004年1月批准了一种称之为“All-Clear”的新型化学生物洗消泡沫的使用。这种洗消泡沫是在缓冲蛋白质中的一种水解酶与生物杀灭剂的混合物。它能解决遭受化学和生物袭击的军事、工业和农业目标的大面积地域的快速消毒问题。

  • 标签: 泡沫 洗消 化学 2004年1月 推出 美国国防部
  • 简介:美军埃奇伍德化学生物中心(ECBC)研制了一种低成本、战术性的生物检测器现已得到联邦实验室协会(FLC)技术转化部的认可。基于半导体紫外光源技术(suvos)的生物战剂传感器能够快速检测空气中的生物威胁,提供早期报警,最大程度减少美国陆军的沾染和人员伤亡。

  • 标签: 生物检测器 战术性 化学 光源技术 快速检测 生物战剂