简介：高温（〉28℃）可引起含N基因的免疫寄主对TMV抗性丧失,导致TMV系统侵染。本研究以枯斑三生（Nicotianatabacumvar.SamsunNN）烟草为研究材料,采用代谢组学方法,系统研究25℃和31℃条件下,TMV未侵染和TMV侵染12h、24h和48h枯斑三生烟草的代谢差异。应用气相色谱与质谱联用（GC-MS）技术,结合主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘-判别分析法（OPLS-DA）对不同温度下代谢产物的差异性进行分析。结果表明：GC-MS技术共检测到49种代谢物包括氨基酸类、糖类、有机酸类、脂肪酸类、醇类以及多胺类等。在25℃常温条件下,TMV侵染枯斑三生烟引起苹果酸、水杨酸、γ-氨基丁酸、脯氨酸和乙醇胺等代谢物含量上调,而在31℃高温处理N基因失活后,TMV侵染导致组织蔗糖和肌醇含量下调、葡萄糖和果糖含量上调以及伴随氨基酸类含量普遍上调。

简介：为了减少高毒试剂苯的使用,消除淀粉、蛋白质、灰分对测定总细胞壁物质含量的干扰,本方法采用乙醚-乙醇混合液（乙醚：乙醇=1：15）进行超声脱脂后,加入α-高温淀粉酶,用热水提取,再用中性蛋白酶水解蛋白质,残渣在510℃灰化。结果表明：采用30mL乙醚-乙醇混合液进行超声脱脂1h与常规脱脂方法一致;热水提取1h能除去糖类、淀粉的干扰;用2mL中性蛋白酶水解30min能除去绝大部分蛋白质;方法回收率为98.31%～99.52%,日内RSD为1.21%～1.31%,日间RSD为1.39%。可以应用于烟草中总细胞壁物质含量的测定。

简介：【目的】探究不同品种烟草镉积累差异的分子机制。【方法】采用同源克隆方法从烟草不同镉积累基因型品种中克隆拟南芥AtNramp1同源基因NtNramp1;应用生物信息学方法分析烟草不同镉积累基因型品种中NtNramp1基因序列差异;通过酵母异源表达系统研究烟草不同镉积累基因型品种的NtNramp1对镉的转运活性差异。【结果】金英和KomotiniBasma两个烟草品种对镉的积累存在显著差异;从镉积累显著差异的两个烟草品种中克隆到的NtNramp1基因(分别命名为NtNramp1a和NtNramp1b)编码区存在57个单碱基差异,其中NtNramp1a1305位碱基变异(G>A)导致所编码蛋白比NtNramp1b编码蛋白缺少C端两次跨膜;酵母异源表达结果表明来自低镉含量品种金英的NtNramp1a转运镉的活性比来自高镉含量品种KomotiniBasma的NtNramp1b转运镉活性显著降低。【结论】金英和KomotiniBasma两个烟草品种中NtNramp1蛋白活性差异是导致两烟草品种镉积累差异的重要原因。

简介：选择三个代表性的叶龄段。研究了6-苄基腺嘌呤（6-BA）和脱落酸（ABA）对两个烟草品种NC89和JYH光合功能衰退和H2O2水平的影响。结果表明，两激素对NC89和JYH不同发育阶段的光合功能具有不同的调控作用。在烟草叶片叶绿素含量相对稳定前期，两激素对NC89和JYH各光合参数和H2O2含量影响不大；叶绿素含量相对稳定后期，光合机构和H2O2对两激素处理非常敏感，叶绿素含量相对稳定期是光合功能衰退的可逆和可调阶段；叶绿素含量速降期，6-BA处理对光合功能已无促进作用，各参数变化很小，所以叶绿素含量速降期是光合功能衰退的不可逆和不可调阶段。SDS-PAGE显示可逆衰退阶段核酮糖-1，5-二磷酸羧化酶加氧酶（Rubiaco）大小亚基对6-BA和ABA处理较敏感，而类囊体膜多肽组分基本无变化；不可逆衰退阶段，6-BA对Rubiaco大小亚基和类囊体膜多肽组分影响不大，ABA对Rubisco大小亚基和类囊体膜多肽组分有一定影响，说明烟草叶片光合膜和碳同化酶对两激素的响应不同。