简介：大鼠牙周膜干细胞的分离、培养方法与人牙周膜干细胞有着不同之处,分离、培养大鼠牙周膜干细胞存在磨牙小、牙周膜组织来源少以及拔牙困难等难点。然而,在基础研究中,大鼠牙周炎模型的建立应用广泛,分离、培养大鼠牙周膜干细胞用以探讨牙周炎致病机制,明确机体内环境改变是否通过影响牙周膜干细胞的生物学性能导致牙周组织破坏严重与修复困难具有重要作用;另一方面,大鼠牙周膜干细胞分离、培养方法建立后,可以尝试从干细胞水平为治疗牙周病与促进牙周组织再生提供可靠的理论依据。因此,综述分离、培养大鼠牙周膜干细胞的可行方法有着十分重要的意义,有十分可观的应用前景。

简介：目的：探讨是否可以通过使用条件培养液（CM）和引导骨再生（GBR）技术加速骨再生。材料与方法：CM取自大鼠骨髓基质干细胞（BMSCs）。CM被固定在聚乳酸一羟基乙酸共聚物（PLGA）膜上．该膜需用0，5mol／L氢氧化钠（NaOH）处理以提高亲水性。实验分为4个组：PLGA膜处理①磷酸盐缓冲液（PBS；PBS—M）．②PBS和0．5mol／LNaOH（亲水性处理；PBS-HM），③CM（CM—M）．④CM和0．5mol／LNaOH（CM—HM）。通过扫描电镜观察这些实验性膜。液相色谱-串联质谱法（LC／MS／MS）测定固定在PLGA膜上的来自骨髓间充质干细胞表达的蛋白。细胞增殖实验和碱性磷酸酶（ALP）活性测定分析CM对骨髓间充质干细胞活性的影响。实验性膜被移植到大鼠颅骨骨缺损模型。移植4周和8周后进行显微CT和组织学分析。结果：来自骨髓间充质干细胞的CM可固定于PLGA膜上。PLGA膜的亲水处理可增强CM的固定。LC／MS／MS分析表明．在PLGA膜表面的固定化蛋白质属于细胞外基质蛋白．如胶原蛋白、核心蛋白多糖、纤连蛋白。CM里从PLGA膜释放出的蛋白质．可以促进大鼠骨髓间充质干细胞的细胞增殖和碱性磷酸酶活性。被CM—HM处理过的骨缺损区域新骨形成明显高于被其他组膜处理对应的骨缺损区域。结论：PLGA膜经0.5mol／LNaOH和CM处理后可促进此大鼠颅骨缺损模型的骨再生。