简介：目的构建表达针对HBsAg小发卡RNA（shRNA）的重组腺相关病毒载体,以观察该病毒在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。方法将表达针对HBsAg的shRNA定向克隆到pAAV/U6-hrGFP质粒中,获得重组表达质粒（pAAV-shHBs-hrGFP）;采用磷酸钙转染法将该质粒与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共同转染AAV293细胞,进行rAAV-shHBs-hrGFP重组病毒包装。收获病毒感染HepG2.215细胞;采用ELISA法检测HBsAg和HBeAg水平。结果酶切鉴定、测序结果表明,pAAV-shHBs-hrGFP载体成功构建。包装收获的rAAV-shHBs-hrGFP病毒液可以感染HepG2.215细胞,并且可以抑制HBsAg和HBeAg的表达。结论制备的rAAV-shHBs-hrGFP病毒载体能够抑制HBV在体外的抗原表达。

简介：目的：利用乳链菌穿梭载体构建肿瘤特异标记表达系统，为肿瘤特异性口服疫苗的研究开辟一个新领域。方法采用体外基因拼装的方法得到PEG-3启动子，经酶切鉴定并测序验证。然后利用基因克隆技术，将PEG-3启动子、EGFP、PolyA亚克隆到乳链菌载体pTRKH2中，成功得到肿瘤特异标记质粒pTR-peg3-egfp。最后，转染肿瘤及非肿瘤细胞初步验证其肿瘤特异性标记能力。结果通过PCR基因拼装得到460bp左右目的片段，测序结果与设计完全一致。获得了肿瘤特异标记的乳链菌穿梭质粒pTR-peg3-egfp，并在细胞水平得到初步验证。结论PEG-3启动子介导的乳链菌穿梭质粒具有肿瘤特异性，这一实用新颖的系统将为研究乳链菌疫苗应用于肿瘤标记及靶向治疗奠定基础。

简介：背景：研究表明,异常激活的JAK/STAT3信号通路可促进肝细胞癌（HCC）发生、发展;转化生长因子-β1（TGF-β1）在肿瘤进展中发挥双向调节作用。目的：探讨特异性抑制JAK/STAT3信号通路对HCC的影响以及TGF-β1信号通路在其中的可能作用。方法：30只Wistar大鼠随机分为对照组、HCC组和HCC＋AG490组,后两组以二乙基亚硝胺制作HCC模型,HCC＋AG490组造模第1周腹腔内注射JAK特异性抑制剂AG490。第16周末处死大鼠,记录肝内肿瘤结节的最大直径,计数最大直径〉1cm的肿瘤结节数,以real-timePCR、免疫组化和免疫荧光染色检测肝组织中STAT3、TGF-β1的表达和分布。结果：与对照组相比,HCC组肝组织中STAT3、TGF-β1mRNA表达显著增高（P〈0.05）。磷酸化STAT3（p-STAT3）、TGF-β1蛋白在对照组肝组织中呈阴性表达,在HCC组则分别呈阳性和强阳性表达,且两者有明显的共表达区域。HCC＋AG490组STAT3、TGF-β1mRNA表达较HCC组显著降低（P〈0.05）,p-STAT3、TGF-β1蛋白呈弱阳性表达,直径〉1cm的肿瘤结节数和最大直径均显著小于HCC组[1.20±1.03和（1.14±0.18）cm对4.30±1.06和（1.78±0.27）cm,P均〈0.05]。结论：特异性抑制JAK/STAT3信号通路可抑制HCC发生、发展,其机制可能与抑制TGF-β1信号通路有关。

简介：目的探讨PTD-HBcAg融合蛋白诱导小鼠体内特异性CTL并抑制HepG2.2.15细胞HBV复制的作用。方法PTD-HBcAg、HBcAg和阴性对照分别与等体积的弗氏佐剂乳化后皮下免疫小鼠;第14d,分离脾淋巴细胞并分别用PTD-HBcAg、HBcAg、PTD和PBS加强刺激后收集上清,检测细胞因子IFN-γ、IL-12、IL-4和IL-10;刺激后的淋巴细胞作为效应细胞与HepG2.2.15细胞共培养,检测,效应细胞对HBsAg、HBVDNA的抑制作用及对HepG2.2.15细胞、HepG2细胞的杀伤效果。结果PTD-HBcAg组分泌的IFN-γ、IL-12、IL-4和IL-10与HBcAg组和阴性对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;PTD-HBcAg融合蛋白组较HBcAg组和阴性对照组有更明显的病毒抑制作用（P〈0.05）;PTD-HBcAg组对HepG2.2.15细胞的杀伤率明显高于HBcAg组和阴性对照组（P〈0.05）。结论PTD-HBcAg可诱导HBV特异性CTL,能有效抑制HepG2.2.15细胞HBV的复制。

简介：目的比较急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎与慢性重型乙型肝炎患者HBVC蛋白和Pol蛋白特异性CTL表位变异的差异,以探讨乙型肝炎重症化和慢性化的可能机理。方法对516例乙型肝炎患者的血清进行HLA-A2和A11分型;用巢式PCR扩增血清HBVC基因与Pol基因并对PCR产物进行序列测定;根据HBVS基因序列,用VirusBlast软件鉴定患者感染的HBV基因型;用VectorNTI软件对目前已知的HLA-A2限制性的4个C蛋白和5个Pol蛋白特异性CTL表位与HLA-A11限制性的1个C蛋白表位进行序列分析。结果247例（47.86%）患者HLA-A2阳性,其中AHB67例,CHB109例,CSHB71例;220例（42.64%）患者HLA-A11阳性,其中AHB67例,CHB107例,CSHB46例;CTL表位变异分析结果如下：①在3组HLA-A2阳性患者,表位变异发生率无显著性差异（P〉0.05）;②在三组HLA-A2阳性HBVB基因型患者,P455-463和P816-824表位变异有极显著性差异（P〈0.01）;③在三组HLA-A2阳性HBVC基因型患者,各表位变异无显著性差异;④在三组HLA-A11阳性患者,C88-96表位变异发生率有显著性差异（P〈0.05）,三组HBVC基因型患者,表位变异发生率有极显著性差异（P〈0.01）,而在HBVB基因型患者,各表位变异无显著性差异（P〉0.05）。结论某些HBVC蛋白和Pol蛋白特异性CTL表位在AHB、CHB和CSHB患者间变异有明显差异,并且受感染病毒基因型的影响。CTL表位变异可能与乙型肝炎的重症化和慢性化机制相关。

简介：目的对拉米夫定与乙肝特异性主动免疫联合疗法治疗慢性乙型肝炎病毒携带者的临床效果.方法100例慢性乙型肝炎病毒携带者,随机分为联合治疗组(50例)用拉米夫定100mg/日,加用乙肝特异性主动免疫联合疗法每4周1次,疗程为48周;对照组为拉米夫定单一治疗(50例),用拉米夫定100mg/日,口服.结果联合治疗组HBsAg阴转率(18%),抗-HBs阳转率为6%,而拉米夫定单一治疗组分别为4%和0%,P＜0.001;联合治疗组HBeAg阴转率40%以及HBeAg血清学转换(HBeAg消失、抗-HBe阳转)率为30%,均高于拉米夫定单一治疗组,P＜0.05.结论拉米夫定与乙肝特异性主动免疫联合疗法的疗效优于单一口服拉米夫定疗法.

简介：病人女性，56岁。不明原因发热4天，体温高达39．8℃，全身酸痛，乏力、腹胀，左腹部胀痛，并触及包块，食欲不振，在院外给予“青霉素、甲硝唑等”药物治疗无效，病人又出现恶心、呕吐、尿量减少，2天未进食，急送本院。查体：T39．8℃、P92次／min、R21次／min、Bp14．7／9kPa，中年女性，神志清，精神不振，贫血貌，自主体位，查体合作，全身皮肤粘膜及浅表淋

简介：1996-01／2001-11我们在动物实验成功的基础上，设计出尿流改道最好的替代方法。即把两侧输尿管移植于乙状结肠短袢时作逆流整形，这是第一膀胱乙状结肠膀胱。再于乙状结肠与即直肠交界处缩窄成漏斗状活瓣，最终尿液贮存于直肠内为第二膀胱直肠膀胱。

简介：我院于2002年3月开始对硬膜外一点穿刺置双导管方法的临床应用研究，研制成的硬膜外置双导管穿刺针，是在传统(Tuohy)硬膜外穿刺针基础上研制而成。其结构简单，由针体、针管、针芯组成。经体外模拟试验成功后，并于4月应用于临床，获得了临床麻醉满意效果。操作方法与传统针大致相同，可在硬膜外穿刺成功后的椎体任一间隙置双导管(同向、反向)，推注药物，实施麻醉。本文介绍硬膜外置双导管穿刺针一点穿刺，同向置双管用于胸腹手术麻醉的应用体会。

简介：目的探讨经药物传输泵（DDS）门静脉化疗（PVC）联合肝动脉插管化疗栓塞（TACE）]治疗肝细胞癌伴门静脉癌栓的临床疗效及安全性。方法对87例肝细胞癌合并门静脉癌栓患者手术切除肿瘤并取出癌栓，再随机将患者分成3组。A组行TACE、B组行经DDS泵PVC，C组行经DDS泵PVC联合TACE。随访3年。结果C组患者术后6个月、1年、2年和3年无瘤生存率分别为93.5%、80.6%、41.9%和29.0%，累积生存率分别为96.8%、87.1%、54.8%和45.2%，其中2年和3年生存率显著高于A组和B组（P均〈0.05）；C组患者术后6个月、1年、2年和3年上消化道出血发生率分别为0%、0%、16.1%和22.6%，与A组和B组比无显著性差异（P均〉0.05）。结论对肝细胞癌合并门静脉癌栓患者行手术切除肿瘤并取出癌栓后，行双途径化疗可有效提高患者无瘤生存率及累计生存率。

简介：目的经胃肠镜微创治疗存在出血穿孔的并发症，在一定程度上局限了内镜治疗的应用，为提高内镜微创治疗的安全性，避免和减少并发症，在临床实践中努力寻找对策，为内镜治疗后的预防性治疗进行探索。方法经内镜双腔导管注入生物蛋白胶防治胃肠穿透性疾病，经内镜下双腔导管注入生物蛋白胶快速修复溃疡面，内镜下切除术后创面预防性治疗。我院胃镜或肠镜进行内镜下治疗47例，其中胃镜下38例，肠镜下9例。十二指肠球部巨大穿透性溃疡19例，边缘整齐的胃良性溃疡5例，食管气管凑2例，广基胃肠息肉内镜下切除创面15例，食管黏膜肌层平滑肌瘤内镜下切除创面3例，EMR黏膜切除术后创面预防性治疗3例，每两周复查一次内镜，测量创面直径。结果经内镜双腔导管注入生物蛋白胶治疗穿透性溃疡预防穿孔，修复比单纯内科治疗愈合迅速，创面对合整齐；能够修复已经穿孔的清洁的小食管气管瘘。与常规内镜检查和内镜下单纯切除法相比，对于较大和较深内镜创面，经内镜双腔导管注入生物蛋白胶，出血穿孔几率显著减少，几乎为零。结论选择经内镜双腔导管注入生物蛋白胶防治胃肠穿透性疾病新方法，使胃肠镜微创手术安全性显著提高。

简介：目的探讨应用双环醇治疗因胃癌化疗所致肝损伤患者的效果。方法2014年3月~2016年2月收治的46例胃癌术后患者,给予奥沙利铂和卡培他滨等化疗,在出现肝损伤后给予双环醇治疗。结果46例胃癌患者在化疗后,28例(60.9%)发生肝损伤,其中包括Ⅰ级3例(10.7%),Ⅱ级19例(67.9%),Ⅲ级4例(14.3%),Ⅳ级2例(7.1%);经4w治疗,28例患者血清AST、ALT和TBIL水平分别由(77.6±37.1)U/L、(103.9±42.8)U/L和(79.5±57.2)μmol/L降至(45.8±31.2)U/L、(33.5±27.4)U/L和(37.2±11.4)μmol/L,血清ALB由(28.5±1.8)g/L上升至(34.6±1.6)g/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论双环醇治疗胃癌化疗所致药物性肝损伤患者效果明显,在短时间内能够改善使肝功能恢复接近正常水平。

简介：目的:探讨双介入治疗肝硬化门脉高压合并上消化道出血围手术的护理。方法:选择我院2016年9月-2018年6月90例双介入治疗的肝硬化门脉高压合并上消化道出血患者,信封方法分对照组45例和实验组45例,对照组予护理常规,实验组予围手术期全面护理干预。比较两组满意比率;门脉高压控制时间、上消化道出血停止的时间;护理前后舒张压和收缩压监测情况、主观焦虑分值;再出血发生率。结果:实验组满意比率高于对照组,P<0.05;实验组门脉高压控制时间、上消化道出血停止的时间优于对照组,P<0.05;护理前两组舒张压和收缩压监测情况、主观焦虑分值相似,P>0.05;护理后实验组舒张压和收缩压监测情况、主观焦虑分值优于对照组,P<0.05。实验组再出血发生率低于对照组,P<0.05。结论:双介入治疗的肝硬化门脉高压合并上消化道出血者实施围手术期全面护理干预效果好,可改善舒张压和收缩压监测情况、主观焦虑分值,减少再出血发生率。

简介：目的观察双歧杆菌四联、三联活菌片治疗老年慢性腹泻的临床价值。方法纳人2015年1月至2016年6月于作者两院就诊的80例老年慢性腹泻患者为研究对象，随机分为观察组与对照组，各40例。观察组给予双歧杆菌四联活菌片治疗，对照组给予双歧杆菌三联活菌片治疗，对比两组临床疗效、腹泻缓解时间、不良反应发生率，记录两组治疗前、治疗2周后血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白M(IgM)含量。结果观察组有效率显著髙于对照组(P<0.05)。两组治疗2周后IgA、IgG含量髙于治疗前，且观察组髙于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05)。两组治疗2周后IgM含量比较无统计学意义（P>0.05)。观察组腹泻缓解时间显著短于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较无统计学意义(P>0.05)。结论双歧杆菌四联活菌片治疗老年慢性腹泻疗效优于三联活菌片，可显著改善患者免疫功能，缩短腹泻缓解时间，安全性髙，具有较好的临床应用价值。

简介：目的探讨慢性肝病和肝细胞癌患者肝组织TTVDNA的感染状况.方法采用PCR扩增法分别合成Gla、G2b两种亚型的双链TTVDNA探针.应用两型探针对45例肝组织标本进行TTVDNA原位杂交检测,巢氏PCR法检测血清TTVDNA.结果31例血清TTVDNA阳性患者的肝组织TTVDNA均为阳性(100%).14例血清TTVDNA阴性的患者肝组织中TTVDNA阳性者7例(50%).慢性肝病患者的肝组织中TTVDNA散在分布在汇管区周围的肝细胞核内,肝癌患者TTVDNA则集中分布在肝癌细胞核内及癌组织周围的肝细胞核内.结论慢性肝病与肝癌患者肝组织中TTVDNA的感染状态存在一定差异.

简介：目的观察双歧杆菌四联活菌在临床治疗慢性溃疡性结肠炎中的疗效。方法将慢性溃疡性结肠炎患者70例随机分成2组。治疗组：口服柳氮磺胺吡啶及双歧杆菌四联活菌片（商品名：思连康,杭州龙达新科生物制药有限公司生产）;对照组：口服柳氮磺胺吡啶及诺氟沙星胶囊。疗程1个月。结果治疗组总有效率91.4%,明显高于对照组的68.6%（P〈0.05）。结论双歧杆菌四联活菌在柳氮磺胺吡啶治疗慢性溃疡性结肠炎中有明显增效作用,值得临床推广使用。

简介：目的观察大剂量联苯双酯（DDB）对血清甲胎蛋白（AFP）水平升高的慢性乙型肝炎的疗效。方法26例血清AFP水平升高的慢性乙型肝炎患者采用DDB治疗，剂量为67．5mg／d（22．5mgtid）～135mg／d（45mgtid），连续治疗。治疗期间每隔4周检测AFP、肝肾功能。结果治疗后主要症状均有明显改善（P〈O．01）；治疗后AFP水平较治疗前明显降低（52．3±92．6ug／L对280．O±315．2tug／L，卢3．5338，P〈0．001）；治疗后血清ALT、AST水平均较治疗前明显下降（P〈0．05～0．001）。未见明显副作用。结论DDB对血清AFP升高的慢性乙型肝炎有明显的治疗效果，除了保肝降酶作用外，它还可降低血清AFP水平。

简介：目的:探讨2型糖尿病与结直肠癌合并发生的患者应用二甲双胍治疗效果及预后。方法:选择2型糖尿病与结直肠癌合并发生的患者60例,均为我院2016年2月至2018年2月收治,随机分组,就应用磺脲类口服降血糖类药物治疗(对照组,n=30)与应用二甲双胍治疗(观察组,n=30)总有效率、血糖水平、分化类型、淋巴结转移率、不良反应率展开对比。结果:观察组2型糖尿病并结直肠癌的患者总有效率为73.3%;明显高于对照组46.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗前,血糖指标空腹血糖、餐后2h血糖、糖化血红蛋白水平无差异(P>0.05),治疗后均低于治疗前,且观察组各指标均低于对照组,差异具统计学意义(P<0.05)。观察组低分化率和淋巴结转移率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组粒细胞下降1例,恶心呕吐2例,周围神经毒性1例,腹泻2例,不良反应率为20%;对照组粒细胞下降3例,恶心呕吐3例,周围神经毒性2例,腹泻4例,不良反应率为40%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:针对2糖尿病合并结直肠癌的患者,取二甲双胍治疗,可提高改善症状体征效果,促血糖水平下降,阻碍肿瘤发展进程,且具较高安全性。

简介：目的探讨葛根素联合二甲双胍治疗非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）合并糖尿病前期患者的临床效果.方法2014年4月～2017年6月我院收治的84例NAFLD合并糖尿病前期患者,被随机分为对照组42例和观察组42例,分别给予盐酸二甲双胍片或二甲双胍联合葛根素治疗,观察3m.常规检测血C反应蛋白（CRP）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）.结果治疗后,观察组空腹血糖、餐后2h血糖、胰岛素和HOMA-IR水平均显著低于对照组[分别为（5.92±0.51）mmol/L、（6.01±0.81）mmol/L、（5.90±0.62）mmol/L和（1.52±0.42）对（6.32±0.35）mmol/L、（6.39±0.71）mmol/L、（6.72±0.83）mmol/L和（1.71±0.39）,P〈0.05];血TC、TG、LDL-C显著低于对照组[分别为（4.15±0.14）mmol/L、（1.12±0.22）mmol/L、（1.91±0.12）mmol/L对（4.56±0.21）mmol/L、（1.31±0.13）mmol/L、（2.14±0.11）mmol/L],HDL-C显著高于对照组[（1.31±0.22）mmol/L对（1.11±0.09）mmol/L,P〈0.05];AST和ALT显著低于对照组[分别为（分别为（49.71±4.75）U/L和（52.16±4.93）U/L对（59.13±4.30）U/L和（77.52±7.15）U/L,P〈0.05];血清炎症因子水平也显著低于对照组（P〈0.05）.结论葛根素联合二甲双胍治疗NAFLD合并糖尿病前期患者疗效显著,可能与调节血糖和血脂代谢,改善肝功能有关.

简介：目的:研究美沙拉嗪联合双歧三联活菌用药对溃疡性结肠炎的治疗效果。方法:选取2016年1月~2018年1月于我院接受治疗的溃疡性结肠炎患者90例,平均分为两组,其中对照组45例,使用美沙拉嗪治疗,观察组45例,使用美沙拉嗪联合双歧三联活菌治疗,分析治疗效果。结果:观察组治疗有效率高于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05)。观察组TNF-α、CRP以及IL-10指标改善情况优于对照组,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论:在对溃疡性结肠炎患者进行治疗时,采取美沙拉嗪联合双歧三联活菌治疗能够取得更好的治疗效果,患者的TNF-α、CRP以及IL-10指标能够获得显著改善,具有较高的临床应用价值。