简介：目的：探讨Blimpl基因突变在弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuselargeB-celllymphoma，DLBCL）发病中的作用。方法：应用基因测序方法检测1例DLBCL患者Blimpl基因的突变情况；用PCR扩增其Blimpl全长编码基因，并通过定点突变获得野生型Blimpl的全长编码基因。分别将野生型、突变型Blimpl的全长编码基因亚克隆至含有Flag标签的Flag-CMV4真核表达载体中，将重组质粒分别命名为Flag-Blimp1-wt和Flag-Blimp1-mut：采用PCR扩增获得人CIITA启动子，并将扩增片段插入PGL3-Basic荧光报告基因载体中．所有重组质粒均通过酶切鉴定并测序验证序列正确：将Flag-Blimp1-wt／mut分别与PGL3-CIITA-promoter共转染293T细胞．用荧光素酶报告基因系统检测报告基因载体的活性及Blimpl基因对其表达的调控．采用蛋／3印迹法检测融合蛋／3F1ag-Blimpl-wt与FIag-Blimpl-mut的蛋白表达差异。结果：成功构建野生型、突变型F1ag-Blimpl融合蛋白表达载体及PGL3-CIITA-promoter报告基因载体；经荧光素酶报告基因检测系统证实．构建的报告基因载体具有启动子活性。野生型Blimpl蛋白对其表达具有抑制作用，且该抑制作用与Blimpl的转染剂量呈正相关．而突变型Blimpl对其抑制功能明显减弱：蛋白印迹检测结果显示，突变型Blimpl蛋白明显低于野生型．结论：该例患者中Blimpl的突变影响了其转录抑制功能．可能是由基因突变导致Blimpl蛋白表达量的减少所引起。

简介：诊断疾病是每位医师最基本、最重要的临床常规实践活动。没有正确、规范、完善的诊断。就没有正确、恰当、合理的治疗。因此，诊断疾病的水平是体现医疗质量和医疗水平的重要方面。规范的诊断疾病程序是培养和训练医师临床思维，

简介：目的：验证和评价实时荧光定量PCR检测结核分枝杆菌DNA（TB-PCR）和临床-病理-影像综合评分系统在结节病与菌阴性结核病鉴别诊断中的应用价值。方法：采用TB-PCR检测和临床-病理-影像综合评分，分析鉴别病理活检报告为“结节病或增殖性结核病”的91例患者．并通过随访验证诊断准确率，评价2种鉴别诊断方法的临床应用价值。结果：①TB-PCR检测结果，91例患者中77例结核分枝杆菌DNA为阴性，14例阳性，阳性率为15．4％。而这77例TB-PCR检测结果为阴性的患者中．随访后仍维持诊断为结节病者74例，结核病2例，无法确定诊断者1例；14例TB-PCR检测结果为阳性的患者中，随访后仍维持诊断结核病3例，结节病8例，无法确定诊断3例。TB-PCR检测结果与随访后诊断一致的病例共77例（结核病3例、结节病74例），诊断明确率为84．6％（77／91），而诊断结节病的准确率达93．9％（77／82）。②临床。病理．影像综合评分结果，91例患者中经评分诊断为结节病者80例。诊断为结核病者11例。80例评分诊断为结节病的患者中，随访后仍维持结节病诊断者75例．结核病1例，无法确定诊断者4例。在11例评分诊断为结核病的患者中．随访后诊断仍维持结核病诊断者4例，结节病7例。评分结果与随访后诊断一致的病例共79例（结核病4例、结节病75例），诊断明确率为86．8％（79／91），诊断结节病的准确率达97．56％（80／82）。结论：TB-PCR检测和临床．病理．影像综合评分系统对于结节病与菌阴性结核病间的鉴别诊断均具有较高的诊断明确率和准确率。