简介：摘要前列腺素E2(PGE2)由花生四烯酸代谢而成，含有4个碳-碳双键，为高级不饱和脂肪酸。PGE2能在多种细胞中产生并作用于不同类型的前列环素受体(EP)，在调节心血管系统及维持水盐内环境稳态中起重要作用。近年来，越来越多的研究表明PGE2/EP信号通路在慢性阻塞性肺疾病中发挥着重要作用，且其在哮喘、肺癌以及急性肺损伤中可能均起到一定的作用。本文将对PGE2/EP信号通路在各种肺部疾病中的作用进行综述。

简介：摘要目的评价两种方法学检测糖类抗原242（CA242）结果的可比性，以评估磁微粒化学发光法检测CA242是否能够满足临床的需求。方法根据美国临床和实验室标准协会（CLSI）新指南EP9-A3文件要求，收集2018年1-7月首都医科大学附属北京康复医院和北京大学首钢医院肿瘤患者检测剩余的新鲜血清标本100例，以Fujirebio Diagnostics AB的酶联免疫法为参比方法，安图生物的磁微粒化学发光法为评估方法，对2种方法检测CA242的结果进行方法学比对和偏移评估。选择Passing-Baklok回归方法进行线性拟合，采用Wilcoxon符号秩检验及Spearman相关分析。结果在4.31~295.63 U/ml范围内，2种方法学的CA242检测结果具有较好的相关性（r=0.991，截距0.652）。参比方法和评估方法比较，差异无统计学意义［（53.75±6.69）U/ml比（56.11±6.86）U/ml，t=0.246，P=0.806］。将CA242的医学决定水平25.00 U/ml代入选取的最佳回归模型拟合方程，计算得到的相对偏移3.52%，<1/2TEa±12.5%（TEa为国家卫生健康委临床检验中心室间质量评审允许总误差），满足要求。结论安图生物的磁微粒化学发光法和Fujirebio Diagnostics AB酶联免疫法检测CA242结果具有可比性，满足临床需要。

简介：摘要Christianson综合征是一种由SLC9A6基因突变的罕见的X连锁疾病。临床表现为男性发育迟缓、语言障碍、癫痫发作、智力障碍、共济失调、小头畸形等。现报道2例男性Christianson综合征患儿：先证者1岁11个月，临床表现为小头畸形、全面发育迟缓及癫痫发作，脑电图提示中央中线区棘慢波发放，全外显子测序检测到SLC9A6基因chrX：135084373处出现突变［c.803+1（IVS6）G>A］；先证者之兄4岁8个月，临床表现类似，脑电图提示双侧Rolandic区棘波、棘慢波、多棘慢波发放，磁共振成像提示存在脑萎缩，基因验证结果与先证者一致。SLC9A6基因c.803+1（IVS6）G>A剪切突变为该家系致病突变。

简介：摘要目的利用CRISPR/Cas9 (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeat/CRISPR-associated nuclease 9)技术构建携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein，EGFP)基因的单纯疱疹病毒2型(herpes simplex virus 2，HSV-2)。方法利用CRISPR/Cas9技术对外源基因EGFP插入HSV-2基因组的策略进行探索，设计如下4种插入策略：(1)经典的同源重组修复模式，即环状双侧同源臂供体介导的基因敲入；(2)线性化单侧同源臂供体介导的基因敲入；(3)同源性非依赖介导的基因敲入；(4)利用稳表达Cas9和sgRNA的细胞株，进行环状双侧同源臂供体介导的基因敲入。结果使用策略2、3和4均成功构建了携带EGFP的HSV-2，其中策略2的基因敲入效率最高，然后依次为策略3、策略4，策略1未观察到重组病毒的产生。蚀斑纯化后的重组病毒在7代内能稳定表达绿色荧光蛋白，并且和亲本株在Vero细胞上具有相似的生长特性。结论线性化单侧同源臂供体介导的基因敲入效率更高，敲除载体的稳转细胞株能够有效地提高同源重组修复机制介导的基因敲入效率。

简介：摘要目的观察蓝萼甲素预处理对H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤模型的保护作用，并采用网络药理学方法预测蓝萼甲素抗H9c2心肌细胞凋亡的作用机制。方法将H9c2心肌细胞按随机数字表法分为空白对照组、模型组及蓝萼甲素低、中、高剂量组。空白对照组使用无血清培养液处理。模型组采用无血清培养4 h后，加入250 μmol/L H2O2干预6 h。蓝萼甲素低、中、高剂量组分别给予蓝萼甲素0.125、0.250、0.500 μg/ml预处理4 h后，加入浓度为250 μmol/L H2O2干预6 h。采用MTT法检测心肌细胞活力，观察细胞形态，采用Annexin Ⅴ-FITC/PI荧光双染及Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡情况。通过Pubchem数据库获得蓝萼甲素的化学结构式，使用Swiss Target Prediction和Pharmmapper平台预测蓝萼甲素潜在靶点，利用GeneCards数据库筛选蓝萼甲素抗H9c2心肌细胞凋亡的作用靶点。采用Cytoscape软件构建蓝萼甲素作用的靶点网络，通过String数据库和Cytoscape软件绘制蛋白相互作用网络，并用Metascape数据库对靶点进行GO及KEGG通路富集分析。结果与模型组比较，蓝萼甲素低、中、高剂量组H9c2心肌细胞活力[(66.56±6.51)%、(79.21±6.89)%、(94.06±5.19)%比(51.75±4.14)%]升高(P<0.01)，细胞凋亡率[(24.12±4.71)%、(17.42±4.39)%、(7.65±1.56)%比(36.73±5.65)%]降低(P<0.01)。网络药理学分析结果提示，蓝萼甲素有22个与抗H9c2心肌细胞凋亡相关的靶点，主要调节氧化应激、细胞迁移、激酶结合活性等，可调节MAPK1、VEGFA、MMP9、NOS3、MMP2、MAPK14等靶点通路，发挥抗H9c2心肌细胞凋亡作用。结论蓝萼甲素预处理对H2O2诱导H9c2心肌细胞损伤有保护作用，其机制可能通过多靶点-多途径发挥抗氧化应激和减少细胞凋亡的作用。

简介：摘要目的探讨美国临床实验室标准化协会（CLSI）EP7-A3在评价肌酐（Cr）测定干扰因素中的应用。方法根据CLSI EP7-A3文件，采用实验当天新鲜血清（无溶血、脂血、黄疸），通过配对差异实验确认干扰物质，通过剂量效应实验中应用点对点分析方法明确干扰物质带来的结果差异。结果甘油三酯16.94 mmol/L、盐酸多巴酚丁胺4.01 μmol/L、抗坏血酸298 μmol/L对Cr测定无干扰，以游离胆红素684 μmol/L、结合胆红素684 μmol/L、羟苯磺酸钙144 μmol/L、血红蛋白10 g/L为最大干扰物浓度做剂量效应实验，结果显示以上干扰物对Cr测定有负干扰。结论按照EP7-A3评价肌酐测定的干扰因素有一定的应用价值。

简介：摘要目的研究miR-9靶向己糖激酶2（hexokinase 2，HK2）对乳腺癌细胞增殖的调节作用。方法取乳腺癌组织及癌旁组织，检测miR-9及HK2的表达水平；培养乳腺癌MCF-7细胞，分为空白对照组、NC组、miR-9组、NC-siRNA组、HK2-siRNA组，检测细胞活力、HK2及cleaved caspase-3表达水平，验证miR-9对HK2的靶向结合。结果乳腺癌组织中miR-9的表达水平低于癌旁组织（0.52±0.08 vs 1.05±0.25，t=16.685、P<0.000），HK2的表达水平高于癌旁组织（0.73±0.14 vs 0.34±0.08，t=17.587、P<0.000），miR-9与HK2呈负相关；miR-9组细胞的OD490水平、HK2表达水平、包含HK2基因mRNA 3’UTR的双荧光素酶报告基因的荧光活力低于NC组（0.58±0.09 vs 1.04±0.21、0.51±0.08 vs 1.18±0.24、41.11±9.28 vs 148.28±29.59，t/P=4.027/0.007、5.297/0.002、6.912/0.001），cleaved caspase-3表达水平高于NC组（1.08±0.26 vs 0.42±0.09、t/P=4.797/0.003）；HK-siRNA组细胞的OD490水平、HK2表达水平低于NC-siRNA组，cleaved caspase-3表达水平高于NC-siRNA组。结论miR-9能抑制乳腺癌细胞的增殖，其机制可能与靶向抑制HK2表达，增加下游cleaved caspase-3表达有关。

简介：摘要目的探讨1例Rubinstein-Taybi综合征(RSTS)患儿的临床特征与遗传学病因。方法选取2021年10月3日于苏州大学附属儿童医院内分泌遗传代谢科就诊的1例RSTS患儿为研究对象。收集患儿的临床资料，采集患儿及其父母的外周静脉血样，对患儿进行全外显子组测序(WES)，用Sanger测序对候选变异进行家系验证，并对其进行致病性分析。结果患儿为9岁4个月男性，主要表现为特殊面容、小头畸形、大脚趾宽大、生长发育迟缓以及智力缺陷。WES检测结果显示患儿EP300基因第20外显子存在c.3604G>T(p.E1202*)杂合变异，Sanger测序结果显示，患儿父母该位点为正常基因型，提示为新发变异。EP300基因c.3604G>T(p.E1202*)变异在神州基因组数据云、ExAC、1000 Genomes及gnomAD等数据库中均未见收录；经SIFT、PolyPhen-2及CADD等在线软件对该变异有害性分析结果显示，该变异均被预测为有害性变异。根据美国医学遗传学与基因组学学会变异相关指南，对该变异评级为致病性变异(PVS1+PS2+PM2_Supporting)。结论EP300基因c.3604G>T杂合变异可能是RSTS患儿的遗传学病因，患儿被诊断为RSTS 2型。上述发现进一步丰富了EP300基因的变异谱。

简介：摘要目的评价温度、紫外线以及3种消毒剂对人感染H9N2禽流感病毒的灭活效果，确定H9N2病毒的灭活条件。方法含有1010.67TCID50/ml病毒悬液分别在50 ℃、56 ℃、60 ℃、65 ℃温度下作用10～60 min；紫外线(UV)照射从10 min至80 min，每间隔10 min取样。物理条件作用的病毒残留活性在MDCK细胞上测定，通过Reed-Muench方法计算组织半数感染剂量(TCID50)来评估物理灭活效果。含有1010.37EID50/ml病毒悬液与等体积的10%的84消毒液、75%乙醇、1%浓度Virkon溶液作用1～15 min后接种SPF鸡胚，通过病毒鸡胚培养是否阴性来评估杀灭效果。当病毒滴度下降4 lgTCID50/ml或鸡胚病毒培养阴性视为该方法有效。结果人感染H9N2禽流感病毒经56 ℃ 15 min处理后病毒滴度下降4.02 lg TCID50，而作用30 min后病毒活性将降低到检测水平以下；60 ℃和65 ℃热灭活大于10 min，病毒活性将降低到检测水平以下。在UV照射20 min后病毒活性下降5.67 lgTCID50，作用70 min后病毒将降低到检测水平以下。10% 84消毒剂、75%乙醇消毒液、1% Virkon作用3 min之后不能检测到病毒增殖。结论人感染H9N2禽流感病毒需要在特定条件下才能被有效灭活，我们的研究为人感染H9N2禽流感病毒的生物安全操作提供了实验依据。

简介：摘要目的探讨外周血Septin9基因甲基化联合测定粪便样本中硫酸类肝素蛋白多糖基因（syndecan-2，SDC2）甲基化和组织因子途径抑制物2（tissue factor pathway inhibitor 2，TFPI2）基因甲基化与粪便隐血试验（fecal occult blood test，FOBT）在大肠病变筛查中的临床价值。方法选取2017年1月至2019年6月期间于四川省广元市中心医院治疗的75例大肠癌患者和50例进展期腺瘤患者分别作为大肠癌组和进展期腺瘤组，并以同期40例结肠镜检查结果为阴性者作为对照组，采用甲基化特异性PCR（MSP）法检测全部3组受试者外周血Septin9、SDC2和TFPI2基因甲基化状态以及粪便隐血试验筛查大肠癌和进展期腺瘤。绘制受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC），比较联合检测与各指标单独检测的诊断价值。结果大肠癌组Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化、FOBT的阳性检出率分别为53.04%（61/115例）、55.65%（64/115例）、59.13%（68/115例）、26.09%（30/115例），进展期腺瘤组Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化、FOBT的阳性检出率分别为33.33%（30/90例）、50.00%（45/90例）、40.00%（36/90例）、17.78%（16/90例）。以病理学检查判断为金标准，Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化联合检查筛查大肠癌时检测敏感度（82.7%）高于各单项检查以及SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测敏感度[Septin9基因甲基化（66.7%）、SDC2基因甲基化（69.3%）、TFPI2基因甲基化（73.3%）、FOBT（26.7%）、SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测（77.3%）]，同时还保持了较高的特异度（80.0%）。Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化联合检查筛查进展期腺瘤检测敏感度（70.0%）高于各单项检查以及SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测敏感度[Septin9基因甲基化（40.0%）、SDC2基因甲基化（64.0%）、TFPI2基因甲基化（50.0%）、FOBT（18.0%）、SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测（64.0%）]，也保持了较高的特异度（82.5%）。ROC曲线分析结果显示3种基因甲基化联合检查筛查大肠癌时的ROC曲线下面积0.918显著高于Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化、FOBT单独检查时以及SDC2联合TFPI2基因甲基化检测的ROC曲线下面积（0.684、0.765、0.623、0.796和0.566），差异具有统计学意义（P<0.05）；3种基因甲基化联合检查筛查进展期腺瘤的ROC曲线下面积0.867显著高于Septin9、SDC2、TFPI2基因甲基化、FOBT单独检查以及SDC2联合TFPI2基因甲基化的ROC曲线下面积（0.568、0.685、0.535、0.723和0.489），差异具有统计学意义（P<0.05）。结论联合检测Septin9、SDC2和TFPI2基因甲基化可提高大肠病变诊断的敏感度，并有较高的特异度。

简介：摘要目的揭示H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)血凝素(hemagglutinin, HA)基因氨基酸位点的变异情况并探讨其分子进化趋势。方法收集并比对EpiFlu数据库中2020年4月以前H9N2 AIV毒株HA基因序列信息，采用生物信息学的方法分析HA蛋白关键受体结合位点、裂解位点、糖基化位点的氨基酸差异。结果84.92%(4 067/4 809)序列HA226位点的谷氨酰胺(glutamine, Q)被亮氨酸(leucine, L)替代；来自禽类的序列发生HA-Q226 L突变的占84.75%(4 013/4 735)，来自哺乳动物的序列发生HA-Q226 L突变的占72.97%(54/74)；96.26%(4 629/4 809)序列HA蛋白裂解位点基序模式仍保持低致病性AIV的特点，但有180条来自禽类的序列HA蛋白裂解位点插入了2个碱性氨基酸；58.68%(2 822/4 809)序列新增1个或者2个潜在糖基化位点，而66.44%序列(3 195/4 809)丢失糖基化位点HA210-212。结论H9N2亚型AIV HA蛋白受体结合位点趋于结合人类受体，对哺乳动物的适应性增加，HA蛋白裂解位点和糖基化位点有向高致病性AIV的序列特征突变的倾向。

简介：摘要目的分析信迪利单抗联合依托泊苷+顺铂注射液(EP)方案治疗广泛期小细胞肺癌的临床效果。方法抽取2019年1月至2021年1月焦作市第二人民医院收治的广泛期小细胞肺癌患者90例，按随机数字表法分为联合组与化疗组，每组45例。化疗组采用EP方案化疗，联合组在化疗组基础上采用信迪利单抗治疗。比较两组临床效果、不良反应发生率、治疗前后血管内皮生长因子水平[血管内皮生长因子-A(VEGF-A)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)]、血清肿瘤标志物水平[基质金属蛋白酶9(MMP-9)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CY211)]及卡氏评分(KPS)。结果联合组总有效率(75.56%，34/45)高于化疗组(46.67%，21/45)，P<0.05。治疗后，联合组血清VEGF-A、VEGF-C水平低于化疗组(P<0.05)；联合组血清MMP-9、NSE、CY211水平低于化疗组(P<0.05)。联合组血小板减少、消化道反应、恶心呕吐、粒细胞减少发生率分别为20.00%(9/45)、17.78%(8/45)、22.22%(10/45)、42.22%(19/45)，与化疗组的17.78%(8/45)、24.44%(11/45)、26.67%(12/45)、48.89%(22/45)相比，差异未见统计学意义(P>0.05)。治疗后，两组KPS评分均较治疗前增高，且联合组KPS评分高于化疗组(P<0.05)。结论信迪利单抗联合EP方案治疗广泛期小细胞肺癌可提高临床效果，抑制血管内皮生长因子表达，下调血清肿瘤标志物水平，恢复机体体力和功能状况，且安全性好。

简介：摘要目的探讨鼻咽癌患者同步放化疗前后血浆基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及MMP-9含量变化及临床意义。方法以2018年1月至2019年6月在南华大学附属长沙中心医院住院治疗的46例鼻咽癌患者为研究对象，所有患者均经病理确诊。根据侵袭程度分为早期鼻咽癌组(n＝32)和侵袭性鼻咽癌组(n＝14)。早期鼻咽癌组采取单纯同步放化疗，侵袭性鼻咽癌组采取新辅助化疗联合同步放化疗。收集治疗过程中4个阶段的血液样本，用酶联免疫吸附法检测MMP-2及MMP-9浓度。结果早期鼻咽癌组患者接受治疗时间越长，血浆MMP-9浓度越低(P＝0.007)；侵袭性鼻咽癌组患者治疗前、新辅助化疗后、同步放化疗后、治疗结束及首次预后随访时MMP-9含量差异无统计学意义(P>0.05)。早期鼻咽癌组、侵袭性鼻咽癌组治疗前后MMP-2含量差异无统计学意义(P>0.05)。鼻咽癌患者血浆MMP-2和MMP-9浓度与肿瘤分期、淋巴结转移、肿瘤侵袭和治疗响应率无相关性(P>0.05)；血浆MMP-9含量与WBC计数、中性粒细胞计数(r＝0.85、P＝0.004，r＝0.82、P＝0.003)呈正相关；MMP-9/MMP-2比值与WBC计数、中性粒细胞计数呈正相关(r＝0.86、P＝0.003，r＝0.83、P＝0.001)。结论同步放化疗可以降低早期鼻咽癌患者血浆MMP-9浓度，但对侵袭性鼻咽癌患者血浆MMP-9浓度无影响，提示同步放化疗不能阻止侵袭性鼻咽癌患者癌细胞扩散与远处转移。

简介：摘要目的探讨鼻咽癌患者同步放化疗前后血浆基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及MMP-9含量变化及临床意义。方法以2018年1月至2019年6月在南华大学附属长沙中心医院住院治疗的46例鼻咽癌患者为研究对象，所有患者均经病理确诊。根据侵袭程度分为早期鼻咽癌组(n＝32)和侵袭性鼻咽癌组(n＝14)。早期鼻咽癌组采取单纯同步放化疗，侵袭性鼻咽癌组采取新辅助化疗联合同步放化疗。收集治疗过程中4个阶段的血液样本，用酶联免疫吸附法检测MMP-2及MMP-9浓度。结果早期鼻咽癌组患者接受治疗时间越长，血浆MMP-9浓度越低(P＝0.007)；侵袭性鼻咽癌组患者治疗前、新辅助化疗后、同步放化疗后、治疗结束及首次预后随访时MMP-9含量差异无统计学意义(P>0.05)。早期鼻咽癌组、侵袭性鼻咽癌组治疗前后MMP-2含量差异无统计学意义(P>0.05)。鼻咽癌患者血浆MMP-2和MMP-9浓度与肿瘤分期、淋巴结转移、肿瘤侵袭和治疗响应率无相关性(P>0.05)；血浆MMP-9含量与WBC计数、中性粒细胞计数(r＝0.85、P＝0.004，r＝0.82、P＝0.003)呈正相关；MMP-9/MMP-2比值与WBC计数、中性粒细胞计数呈正相关(r＝0.86、P＝0.003，r＝0.83、P＝0.001)。结论同步放化疗可以降低早期鼻咽癌患者血浆MMP-9浓度，但对侵袭性鼻咽癌患者血浆MMP-9浓度无影响，提示同步放化疗不能阻止侵袭性鼻咽癌患者癌细胞扩散与远处转移。

简介：摘要目的分析淮南市2016年2—4月外环境标本中H9N2亚型禽流感病毒基因组特征。方法选取H9N2亚型荧光PCR检测核酸阳性标本(Ct值≤30)，经鸡胚分离培养提取RNA，扩增8个基因节段进行全基因序列测定，分析淮南株各基因节段分子特征，构建进化树进化分析。结果淮南市外环境2株H9N2禽流感毒株血凝素(hemagglutinin, HA)基因和神经氨酸酶(neuraminidase, NA)基因与A/Anhui-Lujiang/39/2018/H9N2人源株核苷酸同源性分别为98.2%～98.3%/97.2%～94.9%，氨基酸序列同源性为98.9%～98.8%/99.2%～98.6%，其余6个内源基因与A/Anhui/1/2013/H7N9、A/Anhui/33163/2016/H5N6高度同源；基因进化分析显示，2016年淮南市2株H9N2亚型禽流感毒株为G57基因型，淮南市2株H7N9分离株、安徽人感染A/Anhui/1/2013/H7N9和A/Anhui/33163/2016/H5N6内源基因均为G57-like基因型；HA蛋白受体结合域氨基酸S132D、K138T、T189D、V/A190T、Q226L变异，NA茎区缺失了"TEI"序列，H274Y、R292K、N294S耐药位点未发生变异，PA基因I550L，PB1基因I368V，PB2基因I504V，NS1基因P42S，M1基因N30D、T215A，M2基因耐药S31N位点均发生突变。结论淮南市活禽市场H9N2病毒与人感染H9N2安徽株A/Anhui-Lujiang/39/2018/H9N2高度同源，处于同一进化分支，均为G57基因型，可提供内源基因与人感染H7N9、H5N6亚型禽流感病毒重组；HA受体结合域氨基酸位点、NA茎区缺失序列、聚合酶活性增加，均加强病毒感染人类的能力，M2离子通道抑制剂(金刚烷烃类)耐药，NA抑制剂(磷酸奥司他韦)仍为敏感药物。

简介：摘要目的初步探讨微小RNA-9a-5p(miR-9a-5p)靶向丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱性亚基2(SPTLC2)抑制大鼠原代神经元创伤后凋亡的作用及其机制。方法体外培养大鼠原代神经元，将其分为对照组(n＝9)、无意义序列转染组(n＝9)和miR-9a-5p模拟物转染组(n＝9)，并分别建立机械划伤模型。通过转染、实时荧光定量PCR、Western blot和TUNEL荧光染色等方法观察miR-9a-5p对大鼠原代神经元凋亡的影响。利用生物信息学预测、荧光素酶基因报告实验和挽救实验验证SPTLC2与miR-9a-5p的关系。利用蛋白质相互作用数据库预测、免疫共沉淀实验验证SPTLC2相互作用的蛋白。结果实时荧光定量PCR结果显示，miR-9a-5p模拟物转染组miR-9a-5p的相对表达量(6.162±0.184)较对照组(0.938±0.058)和无意义序列转染组(1.010±0.095)明显增高(均P<0.05)。Western blot实验结果显示，miR-9a-5p模拟物转染组SPTLC2的相对表达量(0.272±0.034)较对照组(0.855±0.037)和无意义序列转染组(0.880±0.040)明显降低(均P<0.05)；凋亡相关蛋白检测结果表明，miR-9a-5p模拟物转染组神经元的凋亡程度较对照组和无意义序列转染组显著降低(均P<0.05)。TUNEL染色结果显示，高表达miR-9a-5p可抑制神经元凋亡，miR-9a-5p模拟物转染组的凋亡细胞比例(0.165±0.004)较对照组(0.239±0.008)和无意义序列转染组(0.229±0.010)显著降低(均P<0.05)。荧光素酶基因报告实验和挽救实验证实，SPTLC2是miR-9a-5p的直接靶点。免疫共沉淀实验和Western blot结果表明，SPTLC2可与Toll样受体4(TLR4)、核因子NF-κB p105亚基(NF-κB1)分别相互作用，但不影响二者的表达水平(均P>0.05)。miR-9a-5p可影响TLR4的表达水平(P<0.05)，但不影响NF-κB1的表达水平(P>0.05)。结论SPTLC2是miR-9a-5p抑制神经元凋亡的一个新靶基因。MiR-9a-5p可降低细胞损伤后SPTLC2的表达水平，并通过TLR4/NF-κB信号通路抑制神经元凋亡。

简介：摘要目的探讨骨膜蛋白(POSTN)对高糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡的作用，并初步探索其调控机制。　方法将POSTN siRNAs或pcDNA3.1-POSTN质粒转染到高糖诱导的H9c2细胞中，从而抑制POSTN的表达或使其过表达；采用RT-PCR检测POSTN mRNA或let-7c水平；Western blot检测蛋白水平；CCK-8检测细胞活性；流式细胞仪和TUNEL方法检测细胞凋亡；双荧光素酶报告基因检测POSTN和let-7c的靶向关系。　结果高糖处理的H9c2细胞诱导POSTN的表达上调(P<0.05)。抑制POSTN表达，能够提高H9c2细胞活性，降低高糖诱导的细胞凋亡，同时上调Bcl-2表达并下调Bax和cleaved Caspase-3的表达(均为P<0.05)。而过表达POSTN能够提高高糖诱导的细胞凋亡。并且发现POSTN是let-7c的一个靶基因，在高糖处理的H9c2细胞中let-7c表达下调(P<0.05)，并通过靶向POSTN负向调控其表达。　结论POSTN在高糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡中发挥重要作用。抑制POSTN表达能够提高H9c2细胞活性并降低细胞凋亡，且POSTN的表达和功能与let-7c的调控有关。

简介：摘要目的探讨缺氧复氧（hypoxia reoxygenation, HR）对H9C2心肌细胞凋亡、自噬和焦亡3种细胞死亡方式的影响。方法将培养的H9C2心肌细胞按随机数字表法分为正常对照组（Ctrl组）和HR组，其中HR组H9C2心肌细胞在缺氧培养箱中进行氧糖剥夺8h，然后复氧12 h。通过检测细胞培养液中的乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）含量及四甲基偶氮唑盐[3-（4,5-dimethylthiazol-2-yl）-2,5 diphenyl tetrazolium bromide, MTT]比色法检测细胞活力来评估细胞损伤情况（每组6孔），Western blot检测（每组9孔）细胞凋亡相关蛋白[天门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（cysteinyl aspartate-specific proteinase, caspase）-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia 2, Bcl-2）、Bcl相关蛋白（bcl-associate x protein, Bax）]、自噬相关蛋白[（轻链蛋白3(light chain 3, LC3）Ⅱ/Ⅰ、p62、Beclin-1、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（phosphorylated mammalian target of ra-pamycin, p-mTOR）]、焦亡相关蛋白[Nod样受体蛋白-3(nod-like receptor pyrin domain3, NLRP3）、凋亡相关斑点样蛋白（apopto-sis associated speck-like protein, ASC）、caspase-1p20、IL-1β、IL-18]。通过免疫荧光染色进一步评估细胞凋亡、自噬及焦亡情况（每组6孔）。结果与Ctrl组比较，HR组H9C2心肌细胞HR后细胞活力降低（P<0.05），LDH释放增加（P<0.05），活化的cas-pase-3及Bax的表达上调（P<0.05），Bcl-2表达下降（P<0.05），TUNEL染色显示HR后细胞凋亡显著增加（P<0.05），提示HR后细胞凋亡及损伤增加；而p-mTOR、p62均表达增加（P<0.05），但LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1蛋白降低（P<0.05），LC3Ⅱ/Ⅰ免疫荧光染色显示HR后细胞内的自噬小体增加（P<0.05），表明HR后H9C2心肌细胞自噬受到明显抑制；同时炎性小体NLRP3、ASC、cas-pase-1p20蛋白均显著上调（P<0.05），活化的炎症细胞因子IL-1β、IL-18表达增加（P<0.05），提示HR后NLRP3炎性小体活化，细胞焦亡增加。结论H9C2心肌细胞在HR损伤过程中自噬被抑制，细胞焦亡及凋亡增加。

简介：摘要目的了解贵州省H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus，AIV)的流行与遗传变异情况，为AIV的防控提供依据。方法统计2018年10月—2019年3月贵州省活禽市场外环境AIV检出情况，对选取的H9N2亚型AIV进行基因组的提取、血凝素(hemagglutinin, HA)基因的RT-PCR扩增与测序，并对获得的HA基因序列进行同源性、遗传进化和关键位点变异分析。结果贵州省活禽市场外环境AIV检出率为52.2%，H9N2占阳性的83.7%。H9N2亚型AIV HA基因的核苷酸和氨基酸同源性分别为91.6%～100.0%和91.0%～100.0%，均属于Y280亚系，G57基因型；与致病性相关的裂解位点序列均为PSRSSRGLF和LSRSSRGLF，符合低致病性AIV的分子特征；与宿主特异性相关的受体结合关键位点存在H191N、E198T/A和Q234L三个位点的突变，具有人样受体结合特征；与毒力相关的糖基化位点均具有7个，其中因突变218位点均存在一个糖基化位点缺失，313位点均存在一个增加。与人感染毒株相比关键位点未发生重要突变。结论贵州省活禽市场外环境AIV检出率较高，污染较严重，且以H9N2为优势流行亚型；H9N2亚型AIV均属于Y280亚系，G57基因型，为低致病性AIV，毒株遗传差异在增大，关键氨基酸位点存在变异，具有感染人的风险，故应加强监测该病毒的分子遗传变异情况。

简介：摘要角膜新生血管(CNV)是一种病理性的血管生成，可以导致严重的角膜损伤。CNV被广泛证明与角膜炎症密切相关，其主要由角膜内的血管生成因子和抗血管生成因子的平衡失调诱发。研究发现，基质金属蛋白酶(MMPs)在CNV的形成中发挥着双重作用，一方面通过细胞外基质(ECM)的降解，为内皮细胞迁移提供空间；另一方面通过调节促血管形成因子和抗血管形成因子之间的平衡，影响CNV的生成。其中，MMP-2和MMP-9被认为是CNV形成过程中影响广泛的作用因子，它们通过血管内皮生长因子(VEGF)、Shh、Notch、Thrombin和PI3k/Akt等信号通路调节CNV的生成。就近年MMP-2和MMP-9以及相关因子在CNV调节机制中的作用研究进展进行综述。