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  • 简介:构建小鼠脂素受体2(mAdipoR2)基因cDNA克隆,并进行序列及基因结构分析,为进一步研究小鼠AdipoR2表达和生物学活性奠定基础.用RT-PCR方法扩增mAdipoR2基因cDNA,获得片段连接至pGEM-T载体,转化JM109大肠杆菌,经酶切鉴定后,进行序列测定.利用因特网生物信息学资源分析mAdipoR2基因序列.结果成功地构建了mAdipoR2基因cDNA克隆,其序列与GenBank登录序列一致.通过与小鼠基因组序列比对,分析了mAdipoR2基因结构,其编码序列由7个外显子组成,编码1个含7个跨膜区膜蛋白,但该受体不属于G蛋白偶联受体家族(GPCRs).mAdipoR2与人及大鼠蛋白同源性分别为91%和95%.

  • 标签: 小鼠 脂联素 受体2 基因克隆 序列分析 基因结构
  • 简介:目的:建立无线粒体DNA(mtDNA)的人肺腺癌ρ^0A549细胞。方法:在含50ng/mL溴化乙锭(EB)、100μg/mL丙酮酸钠和50μg/mL尿嘧啶核苷RPMI1640细胞培养基中传代培养A549细胞;用低剂量EB连续诱导培养35d后,采用光镜观察、TaqMan探针法实时荧光定量PCR(qPCR)和Western印迹鉴定无mtDNAρ^0A549细胞;采用MTT法测定ρ^0A549细胞增殖曲线。结果:倒置显微镜下野生型ρ^+A549细胞为多角形,ρ^0A549细胞形态呈拉长枝状;qPCR结果显示,低剂量EB诱导35dρ^0A549细胞中无mtDNA存在。Western印迹结果显示,ρ^+A549细胞中能表达核基因编码线粒体蛋白SDHA和ATP5A,也能表达线粒体基因组编码蛋白MT-COXI和MT-ATP6;ρ^0A549细胞中无MT-COXI和MT-ATP6蛋白表达,但核基因编码SDHA和ATP5A蛋白能够正常表达。MTT结果显示,与ρ^+A549细胞相比,ρ^0A549细胞生长速度明显减慢,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:构建和鉴定了无mtDNA的人肺腺癌ρ^0A549细胞,为后续探讨mtDNA缺失或突变与人肺腺癌发生之间关系奠定了实验基础。

  • 标签: 线粒体DNA 缺失 肺腺癌 A549细胞系
  • 简介:目的:观察不同运动强度下糖尿病大鼠血清脂影响,并初步探讨血清脂素与血清胰岛素关系。方法:将SD大鼠分为5组:正常对照组(CON组)、糖尿病非运动组(DM0组)、糖尿病小强度运动组(DM1组)、糖尿病中等强度运动组(DM2组)和糖尿病大强度运动组(DM3组),每组6只。采用高糖高脂饮食饲养4周后一次性腹腔注射链脲佐菌素(Streptozotocin)制备糖尿病大鼠模型。6周跑台运动前后检测大鼠尾静脉空腹血清胰岛素(FINS)、血清脂素(ADIPO)水平。结果:小强度FINS和APIDO无明显变化,中强度FINS和APIDO明显升高,大强度运动组FINS和APIDO明显升高。脂素与胰岛素水平相关性分析:DM1组无明显相关性,DM2组和DM3组有正相关性。结论:不同运动强度下糖尿病大鼠血清脂素水平不一致,而且胰岛素水平与脂素水平存在一定变化关系。

  • 标签: 不同负荷 运动 糖尿病 脂联素 胰岛素
  • 简介:目的:丹参酮Ⅱ-A是丹参一种重要成分。研究丹参酮Ⅱ-A抗炎症机制。方法:以小鼠腹腔巨噬细胞RAW264.7作为药物刺激靶细胞,使用不同浓度分析纯丹参酮Ⅱ-A对RAW264.7细胞进行刺激,在细胞被刺激24、48h后,使用MTT比色法和半定量RT-PCR法对刺激后细胞进行检测。结果:通过MTT比色法检测,发现丹参酮Ⅱ-A抑制炎症细胞增殖,初步计算出丹参酮Ⅱ-A半抑制浓度(IC50)为43.2μmol/L;在半定量RT-PCR实验中发现,在发生炎症后,丹参酮Ⅱ-A通过抑制磷脂酶A2来减轻炎症。结论:在炎症发生后,丹参酮Ⅱ-A通过抑制磷脂酶A2来达到其抗炎症作用。

  • 标签: 丹参酮Ⅱ-A MTT比色法 半定量RT-PCR 磷脂酶A2
  • 简介:免疫斑点法(ELISPOT)是一项具有较高敏感性和特异性细胞免疫学检测技术,目前常用于疫苗开发中评价疫苗诱发细胞免疫效应。我们就ELISPOT技术原理、具体实验操作、技术优势,及其在新发传染病疫苗研究中应用等进行综述。

  • 标签: 酶联免疫斑点法 新发传染病 疫苗
  • 简介:现代林业对于社会可持续发展,保持生态环境有着极为重要价值与意义,成为当今社会发展中十分重要方面。尤其是近几年来,随着我国经济社会不断发展,环境问题日益突出,林业建设与发展引起了国家和社会广泛重视。

  • 标签: 现代林业 生态环境 可持续发展 环境保护
  • 简介:母体胚胎亮氨酸拉链激酶(MELK)是蔗糖非发酵1/AMP活化蛋白激酶(Snfl/AMPK)家族中一个独特成员,是一种周期依赖性激酶。与家族其他成员不同,MELK并不参与代谢应激状态下细胞生存调控,而更多参与细胞周期、细胞增殖、肿瘤生成和细胞凋亡等过程。MELK在人体多种肿瘤中表达升高,与肿瘤预后密切相关。MELK在肿瘤干细胞中被异常激活,使肿瘤细胞获得生长、侵袭、迁移等能力,因此,MELK可以作为肿瘤治疗重要靶点。我们就MELK基因生物学功能、作用机制及其在肿瘤研究中进展做简要综述。

  • 标签: 母体胚胎亮氨酸拉链激酶 细胞周期 胚胎发育 肿瘤形成 靶向治疗
  • 简介:蓝靛果忍冬又名蓝靛果、黑瞎子果、山茄子等,果实出汁率高,是制作饮料极好原料,被誉为“饮料之王”.经深入研究发现蓝靛果中含有丰富Vp活性物质,如花青甙、芸香甙,儿茶酸等,具有很高药用价值.蓝靛果不但有较高抗氧化性、抗肿瘤作用,还可以治疗胃溃疡、预防心脑血管疾病等.

  • 标签: 蓝靛果忍冬 花色苷 类黄酮 抗肿瘤
  • 简介:讨论速生桉施肥原因、现状和连续几代营林过程中林木生长变化,结合农田几十年来用肥和土壤理化性质和生化性质变化情况,提出开发利用有机肥、减少化肥在林地上使用,既提高木材生产能力,又维护桉树林区生态安全新思路。

  • 标签: 桉树 化肥 有机肥 速生 土壤
  • 简介:基于表观遗传性药物能够让癌症治疗进入新时代吗?我们接下来要提到生物公司名叫Epizyme,该公司创立于2007年一个加州夏日,当时正值全球最大生命科学投资公司之一MPMCapital举办年会。这家位于剑桥地区公司主要研发表观遗传学相关药物和疗法。每年,

  • 标签: 表观遗传学 生命科学 遗传性 MPM 药物 生物
  • 简介:目的:经慢病毒载体介导,制备转人α血红蛋白稳定蛋白基因(ahsp)β654地中海贫血小鼠。方法:用巢式PCR从人血DNA中获得人ahsp基因,构建含有人ahsp基因慢病毒载体,制备假病毒,通过卵周隙显微注射手段将其导入β654地贫小鼠受精卵,经移植至假孕母鼠输卵管,最终孕育出转人ahsp基因β654地贫小鼠;分析小鼠体内外源ahsp基因表达情况及其遗传稳定性。结果:共获得了8只人ahsp阳性小鼠,转基因阳性率为32%(8/25),其中3只同时具有β654突变基因;人ahsp基因在小鼠体内表达水平维持在小鼠自身ahsp表达量1%左右,且可稳定遗传至子代。结论:制备了转人ahsp基因小鼠,并可遗传至子代,为在个体水平上研究α血红蛋白稳定蛋白与β地贫之间关系提供了工具。

  • 标签: α血红蛋白稳定蛋白基因 β654地中海贫血 慢病毒载体 转基因小鼠
  • 简介:通过盆栽实验研究污泥湿式氧化处理后对小麦种子萌发情况及幼苗生长生理生化指标和对重金属吸收影响。结果表明施用湿式氧化处理后污泥,能够显著促进小麦种子萌发和幼苗生长,且小麦中重金属Cu、Zn含量均未超过国家食品卫生标准范围内。

  • 标签: 污泥湿式氧化 小麦 种苗实验 重金属
  • 简介:利用O-超家族芋螺毒素具有保守信号肽编码序列特性,采用RACE方法,对线纹芋螺O-超家族芋螺毒素cDNA进行克隆、序列测定,并经化学合成,获得一种新型高活性芋螺多肽毒素SO3。该肽含25个氨基酸残基,其序列为CKAAGKPCSRIAYNCCTGSCRSGKC-NH2,有三对二硫键。对其进行了正确折叠及活性筛选。结果表明,该肽折叠主峰对小鼠脑内给药100ng,可明显观察到小鼠颤抖现象,对小鼠有明显镇痛作用,而非正确折叠则无反应。

  • 标签: O-超家族芋螺毒素 线纹芋螺 SO3 折叠 活性
  • 简介:海洋微生物多糖主要是从海水、海泥和海藻中细菌中分离出来多糖,大多是微生物胞外多糖。海洋微生物资源丰富多样,由于其生存环境所限,微生物物种之间竞争十分激烈,多数微生物通过代谢产生了一些小分子有机化合物,此活性物质便可提炼出结构迥异、作用独特活性多糖。本文综述了海洋微生物多糖药用功能,对海洋微生物多糖药用价值进行了系统分析。

  • 标签: 海洋微生物 多糖 免疫调节 作用机制 药用价值
  • 简介:颗粒剂灌装是制药生产中关键一环内容,设计和采取科学合理灌装方式可以更好地提高制药生产水平和效率.本文就对于制药生产中颗粒剂灌装相关问题进行了分析与探讨.

  • 标签: 制药生产 颗粒剂 灌装方式
  • 简介:基因克隆一般分为定位克隆和表型克隆。表型克隆进展较快,主要有消减杂交、代表性差异分析法、mRNA差异显示、DNA转染法及抑制消减杂交法。抑制消减杂交法是1996年报道一种表型克隆新方法,是目前寻找差异表达基因较有效方法,较过去方法有许多先进之外。本文对此方法原理及应用作一详细介绍,并与其他方法作简单比较。

  • 标签: 抑制消减杂交 表型克隆 定位克隆
  • 简介:目的探讨创伤病人急救护理措施。方法对本院急救护理措施进行总结。根据创伤救治原则,首先正确评估患者伤况同时,将护理人员合理分工,分别紧急施行止血、建立静脉通路以及严密观察病情等措施。结果治愈102例,治愈率89.47%;好转6例,好转率2.63%;伤残4例,伤残率4.38%;死亡2例,死亡率1.75%。结论护理合理分工能为抢救争取时间,提高抢救成功率。

  • 标签: 创伤 急救 护理体会
  • 简介:来自生物谷报道称:2010年两会期间,政协委员在关于“低碳”提案,据粗略统计约占10%。而关注“低碳”问题,换言之也就是关注民生问题。这对正处于高速发展之中,同时国力不断强大中国来说,完全是情理之中事情。

  • 标签: 转基因 战争 政协委员 低碳 生物
  • 简介:以探讨高职医学专科大学生心理健康状况为目的,对580名在校学生进行症状自评量表(SCL-90)、青少年心理价值取向研究。结果表明,医学专科大学生SCL-90总分高于全国常模,也高于非医学专业学生,心理障碍检出率为43.63%;家庭经济、学业成绩、就业去向为影响其心理健康主要因素。因此,医学专科大学生心理健康水平要引起心理健康工作者重视。

  • 标签: 医专学生 心理健康 健康教育 健康状况
  • 简介:目的:探讨尼古丁在诱导小鼠肺泡巨噬细胞自噬及肺炎发生中作用。方法:通过碘化丙啶(PI)/Hoch.est33258染色法检测尼古丁诱导巨噬细胞MH-S死亡;通过Western印迹和电子透射显微镜检测尼古丁诱导MH-S细胞自噬发生;采用中性红摄取实验检测尼古丁处理后巨噬细胞吞噬能力;通过攻毒实验检测尼古丁诱导肺炎。结果:不同浓度尼古丁作用下PI染色死细胞呈上升趋势;LC3BⅡ蛋白表达具有尼古丁剂量依赖性,并且1μmol/L尼古丁能够增强LPS预刺激MH-S细胞自噬发生。电子透射显微镜结果显示在1μmol/L尼古丁作用下,细胞内自噬体数量增加;MH-S中性红摄取能力与尼古丁浓度剂量呈负相关性;尼古丁能够诱导小鼠发生肺炎,并降低小鼠体重。结论:尼古丁能够增强肺泡巨噬细胞自噬水平,并且可以诱导肺炎发生,有助于进一步研究吸烟与肺炎关系。

  • 标签: 尼古丁 巨噬细胞 细胞自噬 肺炎模型