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57 个结果
  • 简介:目的探讨扁桃酸代谢新生隐球菌毒力作用影响。方法采用套叠PCR方法,构建扁桃酸消旋酶、扁桃酸脱氢酶及过氧化氢铜胺氧化酶基因重组片段,利用基因枪将重组片段转入新生隐球菌JEC21,应用PCR筛选、DNA测序等方法阳性克隆子进行筛选与鉴定。体外观察并检测突变菌株多种应激条件应答反应。结果成功构建了新生隐球菌JEC21扁桃酸消旋酶、扁桃酸脱氢酶及过氧化氢铜胺氧化酶基因缺陷菌株(mreΔ,lmdΔ,pcaoΔ),发现缺陷菌株mreΔ对于毒力功能影响不大,pcaoΔ、lmdΔ在高温、高渗、氧化应激等方面毒力减退,而黑色素分泌增加。结论扁桃酸代谢参与介导新生隐球菌毒力作用调控,但其具体机制有待于进一步研究探讨。

  • 标签: 新生隐球菌 扁桃酸 应激应答
  • 简介:大白菜突变体获得是种质创新有效途径,也是开展功能基因组研究材料基础。本研究选取自交亲和、易进行小孢子培养大白菜自交系‘A03’作为构建突变体库野生型材料。分析EMS种子处理M1、m^2种子幼苗活力及生理特性影响,确定适宜诱变方案并构建突变体库,并针对突变体库m^2群体结球期、收获期生殖生长阶段表型性状变异进行了分析。结果表明,以浓度0.4%EMS浸泡种子16h,以及连续两代种子进行诱变处理,均可以构建大白菜突变体库。突变体库m^2群体植株在结球期、收获期生殖生长阶段表型变异丰富,变异频率分别为21.65%、22.40%25.65%。

  • 标签: 大白菜 EMS 突变体库 诱变育种
  • 简介:目的建立烟曲霉与人支气管上皮细胞共培养模型,观察不同感染时间人支气管上皮细胞生理特性变化规律,探讨烟曲霉人支气管上皮细胞作用机制。方法用烟曲霉在体外感染人支气管上皮细胞,观察人支气管上皮细胞细胞形态改变,用流式细胞仪测支气管上皮细胞凋亡率及用real-timePCR测人支气管上皮细胞凋亡基因表达。结果随烟曲霉作用于人支气管上皮细胞时间延长,人支气管上皮细胞生物学形态发生改变,其回缩、变圆量逐渐增加,凋亡率亦逐渐增加,凋亡基因BaK表达明显上调。结论烟曲霉与人支气管上皮细胞共培养可以影响人支气管上皮细胞形态,诱导细胞凋亡、影响凋亡基因表达。共培养模型可进一步用于烟曲霉致病机制研究。

  • 标签: 支气管上皮细胞 烟曲霉 凋亡 凋亡基因
  • 简介:目的探讨烟曲霉硫氧还蛋白还原酶(thioredoxinreductase,TR)侵袭性曲霉病(invasiveaspergillosis,IA)免疫保护作用。方法C57BL/6小鼠随机分为免疫组对照组,免疫组小鼠用重组TR免疫2次。感染烟曲霉前用环磷酰胺地塞米松全部小鼠进行免疫抑制处理,通过气道穿刺法向气管内注入烟曲霉孢子悬液,建立IA疾病模型。观察两组小鼠存活率、局部器官真菌载量、肺组织病理变化、肺泡灌洗液细胞分类计数,评估TR蛋白免疫保护作用。结果存活率:免疫组小鼠7d存活率为64.7%,对照组为0。肺组织匀浆烟曲霉CFU中位数:存活小鼠为0,死亡小鼠为44(P25,P75为21,70)(P〈0.01)。组织病理学检观察:死亡小鼠肺肿胀出血、肺泡间隔增宽、大量炎症细胞聚集、组织灶状坏死,并有大量烟曲霉菌丝存在,而存活小鼠肺组织损伤程度轻,且组织间无菌丝。肺泡灌洗液涂片染色细胞计数显示:存活小鼠单个核细胞约占84.2%,中性粒细胞仅占15.8%;死亡小鼠单个核细胞占33.6%,中性粒细胞约占66.4%。结论烟曲霉重组蛋白TR能诱导小鼠产生抵抗IA免疫保护力,是一个有潜力保护性抗原。

  • 标签: 烟曲霉 硫氧还蛋白还原酶 免疫保护作用
  • 简介:针对作物种质数据量大、多维带来挖掘效率偏低问题,通过探讨云计算技术及其解决方案,提出了一种基于Hadoop农作物种质资源数据挖掘平台,详述了平台各功能模块并给出了具体开发方案。通过改进经典Apriori算法并在平台上其进行效率测试,验证了平台有效性、可行性。

  • 标签: 种质资源 云计算 HADOOP APRIORI算法
  • 简介:目的探讨白头翁汤正丁醇提取物(ButylalcoholextractofBaiTouWengdecoction,BAEB)对分离自外阴阴道念珠菌病(vulvovaginalcandidiasis,VVC)白念珠菌临床分离株(以下简称VVC临床株)生物膜形成影响。方法采用微量稀释法测定BAEB对白念珠菌最低抑菌浓度(MinimalInhibitoryConcentration,MIC);甲基四氮盐(XTT)还原法测定BAEB对白念珠菌生物膜代谢活性影响,Time-kill法检测BAEB对白念珠菌活菌数影响;结晶紫染色法测定BAEB对白念珠菌生物膜生物量(Biomass)影响;扫描电镜(SEM)观察BAEB对白念珠菌生物膜形态结构影响;激光共聚焦显微镜(CLSM)检测BAEB对白念珠菌生物膜荧光信号强度影响;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测生物膜相关基因UME6、PES1HSP90转录水平变化。结果BAEB12株白念珠菌MIC在64~256μg/mL之间,对白念珠菌生物膜SMIC80(抑制80%生物膜形成最低药物浓度)为1024μg/mL或以上;Time-Kill曲线显示在12h之后,512、1024μg/mL浓度BAEB对白念珠菌均具良好杀伤作用;结晶紫染色法表明512、1024μg/mLBAEB能够减少其生物膜生物量;SEM观察到1024μg/mLBAEB能够有效抑制白念珠菌在不同黏附介质上生物膜完整度;CLSM显示512、1024μg/mLBAEB可以明显降低生物膜荧光信号强度;qRT-PCR检测显示在256、512、1024μg/mLBAEB作用下,UME6转录水平分别下调了72%、71%、77%,在512、1024μg/mLBAEB下HSP90转录水平上调了2.233.31倍,而PES1未有明显变化。结论BAEB可以抑制白念珠菌VVC临床株体外生物膜形成。

  • 标签: 白头翁汤正丁醇提取物 白念珠菌 外阴阴道念珠菌病 生物膜
  • 简介:目的通过体外研究热灭活阿萨希毛孢子菌(Trichosporonasahii,T.asahii)孢子健康人外周血单核源树突状细胞(dendriticcells,DCs)表型功能影响,探讨DCs在T.asahii感染中可能发挥作用。方法体外诱导培养正常人外周血DCs,与不同浓度热灭活T.asahii孢子进行孵育,DCs与T.asahii浓度比分别为1∶1、1∶51∶10,RPMI-1640及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激组分别作为空白对照及阳性对照,在显微镜下观察各组DCs形态变化;瑞氏-姬姆萨染色观察实验组DCsT.asahii吞噬情况并计算吞噬率;流式细胞术检测各组DCs表面共刺激分子表达情况。结果诱导孵育过程中DCs形态发生明显改变;24h时实验组部分DCs内可观察到不止一个被吞噬T.asahii孢子,吞噬率组间差异有统计学意义(P〈0.05);与空白对照组相比,实验组DCs形态发生明显改变,且表面共刺激分子CD80、CD86、CD83表达水平明显升高(P〈0.05),但升高水平低于LPS刺激组,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论人外周血DCs吞噬热灭活T.asahii孢子后,形态发生改变,表面分子表达水平升高,DCs进一步成熟。

  • 标签: 阿萨希毛孢子菌 树突状细胞 表面分子
  • 简介:为了揭示云南薏苡种质资源多样性,发掘薏苡资源中有益基因,利用主成分分析聚类分析,收集65个薏苡种质资源13个农艺性状进行多样性评价。结果表明,云南薏苡资源存在丰富遗传多样性,其中栽培种分枝数分蘖数遗传变异系数分别达到57.4%47.5%,野生种百粒重遗传变异系数达到60.4%。应用主成分分析将云南薏苡13个性状简化为7个主成分,其累积贡献率为85.67%,以叶片宽因子贡献率最高,为49%。采用系统聚类分析,将65份供试材料在遗传距离16.21水平上聚为5个大类,可区分为株高较矮叶片较短型、株高较高叶片较长型以及3个特殊型。

  • 标签: 云南薏苡 主成分分析 聚类分析 遗传多样性
  • 简介:以抗旱玉米自交系旱21为材料,克隆获得玉米分子伴侣基因ZmBiP1,通过荧光定量PCR技术研究ZmBiP1基因表达模式,并将ZmBiP1基因转入拟南芥中研究其功能。荧光定量PCR结果表明,ZmBiP1基因在玉米自交系旱21不同组织器官中均有表达,且在子房中表达量最高。ZmBiP1基因受甘露醇胁迫诱导上调表达,受盐胁迫诱导下调表达。转基因拟南芥功能验证结果表明,过表达ZmBiP1基因导致拟南芥在种子萌发时期甘露醇胁迫耐受能力减弱。这些结果表明ZmBiP1基因可能是逆境反应信号传递途径负调节因子。

  • 标签: 玉米 分子伴侣 ZmBiP1 拟南芥 逆境胁迫
  • 简介:通过EMS(Ethylmethylsulfonate,甲基磺酸乙酯)诱变豫谷1号获得一个遗传稳定谷子小穗突变体si-sp1,该突变体突出表现为穗部变小,同时伴随有株高降低、单码小花数减少根系变小等表现型变异。与野生型豫谷1号相比,突变体穗长株高分别降低了37.8%9.0%,单穗粒重单码小花数分别降低了40.3%31.7%,但千粒重增加了20.2%。遗传分析表明,si-sp1突变性状由1隐性基因控制。以si-sp1为母本、辽谷1号为父本构建F2定位群体隐性单株,将突变基因定位在8号染色体上CAAS8003与SSR1038间约11.02M距离内,为下一步精细定位并分离该基因奠定了基础。

  • 标签: 谷子 小穗 遗传分析 基因定位
  • 简介:本研究采用高通量测序技术淀粉积累高峰期锥栗种仁进行转录组测序分析,得到Unigene进行功能注释、分类及代谢通路分析,并进一步通过实时定量PCR方法分析了7个与淀粉蔗糖代谢相关酶基因在锥栗种仁发育过程中表达特征。结果显示:denovo组装后共获得53629条Unigene序列,序列平均长度为746bp;通过与其他核酸、蛋白质数据Blast搜索比对,共26739条Unigene序列获得基因注释,占All-Unigene49.86%;与COG数据库比对后将其注释14413条Unigene序列划分成25类;GO功能注释33926条Unigene基因共分成细胞组分、分子功能生物过程3大类58个分支;与KEGG数据库比对结果注释5277条Unigene序列划分为116条代谢通路;7个与淀粉蔗糖代谢相关酶基因表达量变化趋势中,CH.29636(淀粉合成酶,SS),CH.11971(淀粉分支酶,SBE)两个基因随着种仁发育呈现逐渐上升趋势,而其余5个基因(CH.31302、CH.33690、CH.19238、CH.30128、CH.13088)表达量随着种仁发育呈先上升后下降趋势,该结果与锥栗种仁发育期淀粉蔗糖变化规律一致。这些信息为锥栗果实品质形成相关功能基因研究提供了重要依据。

  • 标签: 锥栗 RNA-SEQ 种仁 实时荧光定量PCR 淀粉 蔗糖
  • 简介:调查研究了首次引进13个美国酿酒葡萄品种在北京地区栽培后植物学性状、果实品质抗寒及抗霜霉病能力,并与传统欧亚种酿酒葡萄及砧木品种进行了比较与分析,总结了它们之间植物学性状与抗逆性差异。本试验选出了在抗寒及抗霜霉病方面表现优良美国酿酒葡萄品种,为这些品种在我国实际栽培推广提供科学依据。

  • 标签: 美国酿酒葡萄 植物学性状 果实品质 抗寒性 抗病性
  • 简介:紫云英属于异花授粉植物,品种内个体基因型杂合,品种鉴定难度大。本研究以紫云英闽紫系列3个审定品种为材料,采用SSR标记进行取样策略3个品种鉴别能力影响研究。结果表明:(1)固定4引物组合,从5~50进行梯度取样时,品种内扩增位点总数、观测等位基因数趋于增多,但有效等位基因数、Shanon信息指数、遗传多样性指数增大到最大值后趋于下降,其中取样量为30时总体样品出现最大值;随着样品量增加,品种间Nei氏遗传距离以及分子方差分析品种间期望变异系数比例值(PhiPT)均呈减少趋势,但PhiPT值置信度在增大;(2)固定品种样品容量为3050,再加入2能扩增出在品种间形成频率差异标记位点SSR引物,基于这6SSR引物可以将参试3个紫云英品种有效区分,品种间期望变异系数比例值(PhiPT)提高且差异置信度为极显著。主成分分析进一步表明:3个参试品种30个样品与50个样品散布状况基本一致。紫云英取样策略研究表明:为提高参试品种鉴别能力,样品取样量以30株为宜,即达到较佳鉴别效果又降低分析成本。

  • 标签: 紫云英 品种 取样策略 SSR分析 异花授粉
  • 简介:青海高原地区作物种质资源是指青海境内以及周边生态类似地区内分布资源。根据近10多年来该地区作物种质资源调查、收集及研究工作基础,分析了本地作物种质资源保护与利用现状,认为本地区资源保护及利用工作已取得了一定成果,有了较好基础工作积累,研究团队力量得以加强完善,资源保护与利用意识不断得以强化,但资源保护利用与现今飞速发展农业产业化、以及突破性种质创新和利用要求仍然相去甚远,特别表现在对库存资源精准评价鉴定方面,难以为育种工作提供有效服务与支持。借助于国家种质复份库平台优势现代生物学技术手段,发挥高原特异资源优势,引进借助外来优异资源进行种质创制、及具有高原特色生态农业种质资源研究,以期为高原农业可持续发展提供支撑,应作为今后本地资源研究方向。

  • 标签: 青海高原 种质资源保护利用 现状与对策
  • 简介:目的评价氟曲马唑足癣分离病原菌体外抗菌活性,并与联苯苄唑相比。方法采用CLSI推荐M-38A2(皮肤癣菌)M27-A3(酵母菌)微量液基稀释法病原菌进行体外药物敏感性测定。结果氟曲马唑对红色毛癣菌最小抑菌浓度(MIC)范围为0.031~2μg/mL,MIC50为0.5μg/mL,MIC90为1μg/mL,GM值为0.637μg/mL;联苯苄唑分别为0.031~16μg/mL,0.25μg/mL,2μg/mL,0.634μg/mL;两药对红色毛癣菌MICGM值比较差异无统计学意义(P=0.974)。氟曲马唑趾(指)间毛癣菌MIC范围为0.031~1μg/mL,MIC50为0.031μg/mL,MIC90为0.5μg/mL,GM值为0.17μg/mL;联苯苄唑分别为0.125~16μg/mL,1μg/mL,2μg/mL,1.886μg/mL;两药趾(指)间毛癣菌MICGM值比较差异具有统计学意义(P=0.001)。尽管酵母菌菌株数偏少,但研究结果显示两药念珠菌属毛孢子菌属MICGM值比较差异具有统计学意义(P=0.000P=0.031)。结论氟曲马唑对红色毛癣菌抗菌活性与联苯苄唑相似,但对趾(指)间毛癣菌、念珠菌属毛孢子菌属抗菌活性明显优于联苯苄唑。

  • 标签: 氟曲马唑 联苯苄唑 皮肤癣菌 酵母菌 体外抗菌活性
  • 简介:十字花科植物抽薹开花是植株由营养生长向生殖生长转变关键时期,其相关性状涉及作物繁殖产品器官形成,它们大都是由多基因控制数量性状,并受到环境信号内源因素多路径调控。本文从十字花科蔬菜作物抽薹开花性状分子标记分子调控机理两方面进行综述,并就研究中存在问题发展方向进行了探讨,以期为全面阐明十字花科蔬菜抽薹开花机制提供综合信息新线索,为蔬菜作物抽薹开花遗传改良高产优质栽培提供理论依据。

  • 标签: 十字花科 抽薹 开花 分子标记 调控机制
  • 简介:为研究雄性不育相关基因TA1TA2在BNSYS小麦温敏雄性不育系732A花粉发育时期表达特点,探讨这2个育性相关基因与温敏雄性不育小麦育性转换联系,本研究利用荧光实时定量PCR方法,在BNSYS型不育系732A花药发育四分体期、单核期、二核期三核期定量检测基因TA1TA2mRNA表达水平。结果表明:(1)在732ABNS花粉发育四分体时期至二核期,基因TA1相对表达量上调,在三核期相对表达量下降;(2)基因TA2相对表达量在BNS花粉发育四分体时期至二核期逐渐下降,三核期上升;在732A花粉发育4个时期中相对表达量变化刚好相反;(3)在BNS732A花粉发育二核期,基因TA1TA2均表现极值,推测二核期可能为BNSYS型小麦温敏雄性不育系花粉发育最敏感时期;(4)在不育系BNS732A花粉发育过程中,基因TA1相对表达量变化幅度比TA2高。推测TA1不育系BNS732A花粉败育影响程度强于TA2;(5)基因TA1TA2相对表达量在BNS花粉发育时期表达趋势相反,推测其BNS花粉败育影响表现为拮抗作用,且2个基因不连锁;在732A花粉发育时期表达趋势相同,推测其不育系732A花粉败育影响表现为协同作用

  • 标签: 小麦 TA1 TA2 BNS 732A 荧光实时定量PCR
  • 简介:华山医院皮肤科将于2016年4月11~14日举办"真菌病诊断检测技术新进展"学习班,学习班展示常见少见真菌病临床及真菌学图片、诊断、治疗及实验室检测新进展,为专科医务人员提供良好学习机会。国家级继续教育项目,I类学分10分。学费600元,资料费100元,食宿统一安排,费用自理。有意向者请填写回执。

  • 标签: 真菌病 华山医院皮肤科 真菌学 实验室检测 延安西路
  • 简介:分子标记由于能够反映DNA水平上遗传变异而成为研究遗传多样性重要方法。本文综述了利用分子标记分析高粱遗传多样性研究进展,并阐述了遗传多样性分析在种质创新中应用方向,提出了利用分子标记分析高粱遗传多样性研究中尚需进一步加强研究内容。

  • 标签: 高粱 分子标记 遗传多样性 种质创新
  • 简介:大豆遗传转化一直是植物基因工程领域难点之一,受体品种农杆菌敏感程度以及不同农杆菌菌株靶组织侵染能力是影响转化效率主要因素。本研究利用GUS组织瞬时表达技术,比较了4个农杆菌菌株靶组织子叶节侵染能力差异,同时利用筛选到侵染能力最强菌株评估了33个不同受体基因型农杆菌敏感性。结果表明,超毒农杆菌菌株Ag10靶组织侵染能力最强,优于其他3个菌株;地方与野生大豆种质在农杆菌侵染后GUS平均瞬时表达效率显著高于选育品种。此外,通过鉴定筛选出6个农杆菌敏感性较高受体材料,其农杆菌敏感性优于前人报道敏感材料Peking,为大豆高效遗传转化体系建立新型转化受体开发提供了参考。

  • 标签: 大豆 农杆菌 敏感性 GUS染色