学科分类
/ 24
479 个结果
  • 简介:按GB3102.8-93《物理化学和分子物理学和单位》书写。原子改为相对原子质量,分子改为相对分子质量。如:“分子为585KD”,应改为“相对分子质量为585×10^3”。

  • 标签: 真菌学 相对分子质量 著录 名称 杂志 中国
  • 简介:按GB3102.8-93《物理化学和分子物理学和单位》书写。原子改为相对原子质量,分子改为相对分子质量。如:“分子为585KD”,应改为“相对分子质量为585×10^3”。

  • 标签: 真菌学 相对分子质量 著录 名称 杂志 中国
  • 简介:目的实时荧光定量PCR测定马尔尼菲篮状菌病组织样本中马尔尼菲篮状菌方法收集马尔尼菲篮状菌病患者皮肤病理切片、淋巴结活检组织,提取总DNA,采用实时荧光定量PCR技术检测样本中马尔尼菲篮状菌载。结果皮肤病理切片、淋巴结活检组织中马尔尼菲篮状菌载阳性。病理切片平均菌载3.01×104copies(1.07×104~7.26×104copies),淋巴结活检组织中马尔尼菲篮状菌载4.68×105copies。结论荧光定量PCR高效检测皮肤病理切片、淋巴结活检组织中马尔尼菲篮状菌载,对马尔尼菲篮状菌病诊断有一定价值。

  • 标签: 马尔尼菲篮状菌病 实时荧光定量PCR 分子诊断 病理切片 淋巴结活检组织
  • 简介:近年来,随着抗生素、免疫抑制剂和激素等广泛应用,真菌感染有不断上升趋势,真菌已成为医院感染常见病原菌之一。由于不同病原菌对抗真菌药物敏感性不同,能否准确诊断病原菌直接影响药物选择。及时准确地检测真菌感染以及确定菌种,在临床治疗中尤为重要。该文对真菌感染检测方法研究进展作一综述。

  • 标签: 真菌感染 病原菌 检测方法
  • 简介:以白桦240个家系胸径、树高、材积和纤维素含量数据为依据,采用马氏距离计算家系间距离、10%取样比例和优先取样法,研究了最短距离法、最长距离法、中间距离法、重心法、类平均法、加权配对算术平均法、可变法和离差平方和聚类法建构核心种质与原种质遗传参数、性状相关性及分布格局。结果表明,最短距离法构建白桦初级核心种质均值差异百分率、极差符合率、方差差异百分率和极差符合率分别为0、100%、75%和143%,4个性状相关性显著、相关系数均超过0.5,保持了原种质资源空间分布格局,是构建白桦核心种质最佳方法

  • 标签: 白桦 原种质 核心种质 聚类方法
  • 简介:以田间幼嫩叶片为试材,建立枣RNA改良CTAB提取法,改良之处包括利用巯基乙醇和PVP联合去除多酚、CTAB与异硫酸氰胍联合促进RNA释放及加入糖原提高产率等。改良CTAB法提取液组成:2%CTAB,4mol/L异硫酸氰胍,100mmol/LTris-HCl(pH8.0),20mmol/LEDTA(pH8.0),2%PVP,4%β-巯基乙醇,250μg/ml糖原。进而采用Trizol试剂法、改良CTAB法、改进SDS-酚法、热硼酸法和异硫氰酸胍法5种方法分别对枣组培苗、幼叶、幼嫩枝皮、根皮和枣果5种器官和组织进行了总RNA提取。结果表明,组培苗RNA提取以Trizol试剂法为最佳,田间幼叶和成熟果实宜采用改良CTAB法,幼嫩枝皮和根皮宜采用改良CTAB法或改进SDS-酚法;本研究建立改良CTAB法可作为枣不同器官和组织RNA提取通用方法;根据季节可从不同器官和组织中获得高质量RNA;枣组织RNA含量相差较大,以幼嫩叶片含量最高,其次为组培苗、枝皮、枣果和根皮。

  • 标签: 器官 组织 总RNA提取
  • 简介:细胞壁作为真菌中特殊和必须细胞结构,相对于哺乳动物细胞膜更加坚硬,难以用简单方法使其充分破碎。因此,达到理想破壁效果是白念珠菌研究中关键步骤之一。在提取白念珠菌RNA、DNA和蛋白质等细胞组分过程中,为获得足量和稳定实验样品。该文对多种白念珠菌破壁方法作一综述,以便为白念珠菌相关研究提供适用、高效破壁方案。

  • 标签: 白念珠菌 细胞壁 破碎
  • 简介:穗粒数是决定小麦产量三因素之一,因此通过远缘杂交创造多粒新种质,对于拓宽小麦育种遗传基础和促进育种水平持续提高具有重要意义。本研究以通过多年多点鉴定证明具有多粒特性(粒数/穗〉80)31份普通小麦一冰草(Agropyroncristatum,2n=4x=28,PPPP)衍生后代为材料,通过田间接种白粉病生理,J、种E09进行抗病性鉴定、采用SDS—PAGE方法进行高分子麦谷蛋白亚基(HMW—GS)组成分析以及株高、有效分蘖等农艺性状调查,发现26份材料表现抗白粉病,12份材料具有优质高分子麦谷蛋白亚基组合,亚基组成为(2*,7+8,5+10)或(1,7+8,5+10)。其中,8份材料穗粒数大于80粒、株高小于75cm、抗白粉病且具有优质高分子麦谷蛋白亚基组合,这为未来培育兼具高产、优质、抗白粉病小麦新品种提供了重要物质基础。此外,对多粒、抗白粉病和优质亚基可能来源进行了讨论。

  • 标签: 小麦-冰草 创新种质 多粒 抗白粉病 高分子量麦谷蛋白亚基(HMW—GS)
  • 简介:目的建立基于TaqMan探针技术皮炎外瓶霉荧光定量PCR检测方法.方法通过对皮炎外瓶霉ITS区域基因组序列(GenBank:JN675373.1)进行分析,设计合成特异性引物和荧光标记探针,优化荧光定量PCR反应条件.以临床标本中分离皮炎外瓶霉为阳性菌株,及其他种类真菌和细菌作为阴性对照菌株,从特异性、敏感性及重复性方面对该方法检测效果进行评价.结果该研究设计引物和探针扩增皮炎外瓶霉特异性序列.临床分离得到皮炎外瓶霉在反应中有明显扩增曲线,而甄氏外瓶霉、棘状外瓶霉、烟曲霉、白色念珠菌、新生隐球菌、马内菲青霉等20株菌在CT值≤38范围内均未有扩增;利用基因重组构建标准品完成了标准曲线绘制,在1.0×103~1.0×107拷贝数(Cp)内具有良好线性关系(R2=1.000),最低可检出量为10Cp/μL.结论成功建立了荧光定量PCR检测皮炎外瓶霉方法,该法特异度强、敏感度高、重复性好,将有助于临床皮炎外瓶霉感染早期诊断和针对性治疗.

  • 标签: 皮炎外瓶霉 核糖体基因 荧光定量聚合酶链反应
  • 简介:用5.500g/L盐水溶液对3~5叶期高粱幼苗进行处理,用幼苗相对成活率对568份高粱种质进行分级,结果显示:5%种质具有3级以上耐盐性。此法可以用来进行大量种质苗期耐盐筛选。根据植株在不同舍盐盐碱地上生长性状差异,对成株期高粱进行耐盐鉴定,利用处理间性状差异及各性状与穗重和秆重相关性构建一个耐盐指数来评价材料对盐碱耐性,从而对18个高粱品种和品系进行了分级,以适合于盐碱地推广品种筛选。

  • 标签: 高粱种质 耐盐评价 筛选 分级
  • 简介:目的DNA是进行分子生物学研究重要基础。在本研究中,我们建立了2种简单快速抽提基因组DNA方法并可用作PCR扩增模板。通过比较4种不同DNA抽提方法以确定哪种更适合进行下一步基因分析。方法这4种方法是:玻璃珠法,酶法,3%SDS法和氯化苄法。玻璃珠法是用玻璃珠在混漩器上剧烈振荡破碎细胞壁;3%SDS法是将细胞在含10mmol/LDTT3%SDS溶液中加热,然后用5mmol/LKAc和异丙醇抽提,DNA产量通过A260测定。结果3%SDS溶解法、经典酶法、玻璃珠法和氯化苄法DNA产量分别为0.4154±0.0367、0.8484±0.0756、1.2636±0.2040、0.4070±0.0339(g/L×10^8CFU/mL)。结论玻璃珠法是最敏感、重复性好、简单、费用合理抽提方法

  • 标签: 新生隐球菌 DNA抽提 方法
  • 简介:目的探索一种新真菌DNA提取方法,该方法操作简便,提取效率高,耗时较短,应用范围广.方法将酶消化和Chelex-100提取DNA方法联合起来,配制一种新DNA提取试剂.通过真菌ITS4和ITS5通用引物进行PCR,对新DNA提取试剂同市售Takaralysisbuffer在DNA提取方面的效能进行评价,同时对DNA浓度和纯度进行测定.结果实验所用34株真菌,自配试剂成功提取出32株真菌DNA;Takaralysisbuffer成功提出27株真菌DNA.对于两种方法都没能提出DNA2株真菌,经液氮研磨破壁后,自制试剂均成功提取;而Takaralysisbuffer仅成功提取DNA1株.结论同市售试剂Takaralysisbuffer比较,自配DNA提取液提取DNA质量相对较高,可用于临床常见感染真菌PCR诊断.对于某些真菌,提取DNA之前先进行菌体破壁是必要.

  • 标签: 蛋白酶K 蜗牛酶 Chelex-100 DNA提取
  • 简介:白念珠菌是人体常见机会致病性真菌,可存在于正常人口腔、上呼吸道、肠道及阴道,易在义齿、人工插管如尿道插管、气管插管等植入性设备表面定植并进一步形成生物膜。生物膜形成可保护菌体免受药物杀伤和免疫系统攻击。黏附是生物膜成膜关键,也是白念珠菌致病关键步骤[1]。本实验拟通过结晶紫法与XTT法观察中药厚朴对白念珠菌黏附影响,并对两种检测方法进行评价。

  • 标签: XTT法 结晶紫法 白念珠菌 黏附
  • 简介:念珠菌是最主要致病性真菌之一。随着医学分子生物学发展,有关对念珠菌致病基因及其表达研究越来越广泛,进行这些研究一个关键步骤就是RNA提取。主要由几丁质组成真菌细胞壁厚且坚韧,因此破壁是提取念珠菌RNA关键。

  • 标签: 白念珠菌 RNA提取 破壁
  • 简介:香蕉束顶病毒(BBTV)是香蕉生产中严重病害之一,主要通过感病材料和香蕉交脉蚜等昆虫进行传播,目前尚无有效防治方法。本研究以感染BBTV巴西蕉(MusaAAACavendish)为材料,研究了感染BBTV巴西蕉离体再生和超低温保存技术条件,表明离体茎尖在MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.4mg/L培养基上分化不定芽较好;采用玻璃化法超低温保存技术保存带有BBTV香蕉茎尖,再生后植株BBTV脱除率达到60.6%,而常规茎尖培养对BBTV脱除率仅为26.7%。

  • 标签: 超低温保存 玻璃化法 香蕉束顶病毒 脱毒
  • 简介:应《中国真菌学杂志》主编温海教授邀请,国际著名医学真菌学研究专家、隐球菌与隐球菌病研究领域先驱和权威、美国国立卫生研究院(NIH)分子微生物学实验室主任K.J.Kwon-Chung教授于2006年6月2日来到上海,在上海长征医院就隐球菌病基础和临床研究进行了专题学术交流。K.J.Kwon-Chung教授是国际知名隐球菌研究专家,在Science,PNAS上均有多篇论文发表,发表SCI论文近200篇。

  • 标签: 美国国立卫生研究院(NIH) 教授 分子微生物学 论文发表 实验室主任 学术交流
  • 简介:以生菜(Lactucasativa)叶片为研究材料,参考拟南芥和水稻双向电泳方法,分析了等点聚焦时间和染色方法等影响双向电泳关键因素,建立适合生菜叶片总蛋白质分离双向电泳方法:采用三氯乙酸-丙酮沉淀法进行总蛋白质提取,用24cm固相pH梯度等电聚焦8000V×8h结合12%SDS-PAGE进行双向电泳分离,银染法和考马斯亮蓝染色法染色都获得了较好结果。应用Image-Master-Elite软件对考马斯亮蓝染色法染色图谱进行分析表明:每张凝胶上都检测到超过1000个蛋白质,不同凝胶之间蛋白质匹配律达到98%,具有较高分辨率和重复性。初步分析了生菜叶片蛋白质等电点、分子分布情况,发现生菜叶片蛋白质等电点以5.0~5.5之间最多而分子主要集中在20~60kD之间。

  • 标签: 生菜 叶片 蛋白质 双向电泳
  • 简介:目的介绍一种从酵母、无绿藻及丝状真菌中提取DNA以用于PCR反应方法方法所用菌种包括临床分离未知菌株和保藏菌株共23株:未知酵母菌(5株)、真皮毛孢子菌(1株)、糠秕马拉色菌(1株)、季也蒙念珠菌(5株)、未知丝状真菌(6株)、无绿藻(1株)、烟曲霉(2株)、拟青霉菌(1株)、茎点霉(1株)。用溶细胞酶(lyticase)结合Biospin真菌基因组DNA提取试剂盒提取基因组DNA,A260/A280检测纯度并计算质量浓度,用真菌通用引物ITS1/ITS4扩增真菌核糖体基因(rDNA)内转录间区ITS基因,经PCR扩增检验所提取DNA质量。结果成功提取所有23株真菌基因组DNA,其纯度及质量浓度满足PCR反应要求。结论用溶细胞酶结合Biospin真菌基因组DNA提取试剂盒从酵母菌、无绿藻及丝状真菌提取DNA可用于PCR反应。

  • 标签: DNA提取 真菌 DNA提取试剂盒 溶细胞酶
  • 简介:近年来,随着真菌感染患者急剧增加,真菌病已经成为一个重要公共卫生问题。对医学真菌流行病学、致病机理、耐药机理以及防治策略研究尤为重要,而所有研究基础都建立在对医学真菌进行有效保藏。医学真菌保藏方法很多,包括传代法、蒸馏水法、冷冻干燥保藏法等,保藏方法选择因实验室条件、菌种和研究要求不同而不同。本文对目前常用几种医学真菌菌种保藏方法优缺点及其应用等做了综述。

  • 标签: 医学真菌 菌种保藏 冷冻保藏法 冷冻干燥保藏法
  • 简介:绿豆是我国主要食用豆类之一。由尖镰孢引起绿豆枯萎病是一种严重土传病害,病原菌从根部侵入,引起植株矮化,叶片黄化、枯萎,根茎部维管束变褐,严重时导致植株死亡。防治枯萎病最经济、有效方法是培育利用抗病品种。本研究在控制条件下以具有不同抗性表型绿豆品种为材料,分别对接种方法、植株生育期、接种体浓度、接种体处理时间及接种后植株培养温度等影响绿豆抗性表型因素进行比较研究,以期建立一个快速、准确和高效绿豆枯萎病抗性鉴定方法,为抗病资源筛选和抗病育种提供技术支持。结果表明,绿豆枯萎病苗期抗性鉴定最适宜接种方法为剪根浸根法,最适宜接种体浓度为10^5~10^6孢子/mL,接种最佳植株生育期为2叶期,最短有效接种体浸根时间为2min,最适宜发病温度为25℃,接种后14d调查病情。

  • 标签: 绿豆 枯萎病 尖镰孢 抗性鉴定