简介:摘要目的构建细粒棘球蚴pET30a-EgG1Y162-2原核表达重组质粒,诱导表达EgG1Y162-2重组蛋白,为研制细粒棘球蚴疫苗提供研究基础。方法以细粒棘球蚴cDNA为模板,利用PCR法合成EgG1Y162-2目的基因,经限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后连接到原核表达载体pET30a中,构建pET30a-EgG1Y162-2重组质粒;将重组质粒转化至大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达大量蛋白,采用亲和层析方法纯化重组蛋白;经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析蛋白纯化水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法鉴定表达产物。结果成功构建pET30a-EgG1Y162-2重组质粒,诱导表达后菌体上清液和洗脱液均在相对分子质量约15 × 103处出现EgG1Y162-2蛋白目的条带,且200 mmol/L咪唑洗脱的蛋白抗原成分较纯。Western blot结果显示,纯化后带有His标签的EgG1Y162-2重组蛋白能被抗His单克隆抗体识别。结论成功构建了细粒棘球蚴pET30a-EgG1Y162-2原核表达重组质粒,诱导表达了EgG1Y162-2重组蛋白,为进一步开展抗细粒棘球蚴疫苗的研究奠定基础。
简介:摘要:思维导图是一个很好的工具,旨在激发学生对学习的兴趣并与新课程改革的概念保持一致。而且,在进行教学过程中,小学语文教师正确地使用思维导图的特征和好处可以调动学生的参与热情,帮助学生阐明思想,改善学生认知结构并促进知识差异和转移,并且教师只需花费一半的协作和沟通就完成教学任务。因此,教师应认真探索如何更有效地将思维导图应用到小学语文教学中。
简介:摘要目的对真菌感染呼吸系统疾病的致病因素进行分析。方法对我院2011年1月至2013年1月间的123例真菌感染呼吸系统疾病患者进行回顾性分析,对真菌感染呼吸系统疾病的致病因素进行探讨。结果肺炎的真菌感染占有比例为10.6%、慢性阻塞性肺疾病急性为33.3%、肺肿瘤为23.6%、支气管扩张并感染为10.6%、间质性肺病8.0%、支气管哮喘5.9%、其他疾病为8.0%;年龄超过60岁的患者比例为65.8%,60岁以下患者比例为34.2%;病程超过半年的患者比例为74.8%,病程在半年以下的患者比例为25.2%;使用抗生素超过半个月的患者比例为81.3%,使用抗生素未超过半个月的患者比例为18.7%。以上各组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论真菌感染呼吸系统疾病的发作与年龄、抗生素使用、患者病程以及病种类型都存在着一定的关系,在患者治疗的过程中一定要规范用药,从而保证患者得到有效的治疗。