简介：摘要目的探讨东北岩高兰提取物二氢查耳酮类化合物对上皮性卵巢癌细胞抗肿瘤作用，并初步探讨其作用机制。方法选取2019年1月至2020年9月于聊城市人民医院行妇科手术治疗的上皮性卵巢癌患者10例新鲜肿瘤组织，检测上皮性卵巢癌组织中的Bcl-2、Beclin-1基因表达情况，培养上皮性卵巢癌细胞SKOV3、A2780、OVCAR3及正常卵巢细胞IOSE80，将不同浓度的东北岩高兰提取物与细胞共培养，采用CCK-8（cell counting kit-8）法测定细胞活性，流式细胞术检测细胞凋亡，采用实时荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）及Western blot检测药物反应后细胞中Bcl-2、Beclin-1 mRNA及蛋白表达情况。使用统计软件SPSS 22.0、GraphPad Prism进行统计学分析，单因素方差分析进行细胞IC50值测定，GraphPad Prism进行作图分析，计量资料组间比较采用独立样本t检验。结果Bcl-2在上皮性卵巢癌组织中相对表达量为（0.759±0.110），Beclin-1表达量为（0.537±0.150），正常卵巢组织中分别为（0.294±0.160）、（1.612±0.130），相比正常卵巢组织，上皮性卵巢癌组织Bcl-2表达明显升高、Beclin-1表达显著降低（均P<0.01）。东北岩高兰提取物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ对上皮性卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3、A2780增殖抑制作用显著，细胞凋亡率明显升高（P<0.01），呈剂量-时间依赖性，按抑制作用排序为：提取物Ⅴ>Ⅳ>Ⅱ>Ⅲ，岩高兰提取物Ⅰ对于肿瘤细胞无增殖抑制作用。经东北岩高兰提取物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ处理的上皮性卵巢癌细胞SKOV3、A2780、OVCAR3组Bcl-2 mRNA相对表达量降低（P<0.01），Beclin-1 mRNA相对表达量升高（P<0.01）。经东北岩高兰提取物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ处理的上皮性卵巢癌细胞SKOV3中Beclin-1蛋白表达显著升高（P<0.01），Bcl-2蛋白表达明显减少（P<0.01）。结论东北岩高兰提取物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ对上皮性卵巢癌细胞SKOV3、A2780、OVCAR3增殖有显著抑制作用，细胞凋亡率明显升高，说明东北岩高兰提取物对于卵巢癌有抗肿瘤特性；经提取物处理后，肿瘤细胞Beclin-1 mRNA及蛋白相对表达量显著升高，Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量明显降低，提示东北岩高兰提取物可能通过调节自噬基因的表达来诱导细凋亡。

简介：摘要目的对忧遁草中的黄酮苷成分进行分离与纯化，研究其对上皮性卵巢癌的抗肿瘤作用，为开发其药用价值提供理论依据。方法研究时间：2019年10月至2022年3月。通过大孔吸附树脂结合半制备型高效液相色谱对忧遁草中的黄酮苷进行分离纯化，核磁共振波谱鉴定化合物的结构；采用CCK-8（cell counting kit-8）法测定忧遁草黄酮苷提取物对上皮性卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3、A2780细胞活性的影响，流式细胞学技术检测细胞凋亡情况；采用荧光定量聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）技术检测忧遁草黄酮苷提取物对上皮性卵巢癌细胞中Beclin-1、Bcl-2 mRNA表达的影响；采用蛋白印迹（Western blot）技术检测其对上皮性卵巢癌细胞中Beclin-1、Bcl-2蛋白表达的影响。使用统计软件SPSS 22.0、GraphPad Prism对实验结果进行统计学分析，单因素方差分析进行细胞半抑制浓度（IC50）值的测定，采用t检验。结果自忧遁草中分离纯化得到3种黄酮苷化合物，分别为肥皂草苷、夏佛塔苷和牡荆苷；CCK-8实验结果显示，牡荆苷对上皮性卵巢癌细胞具有明显增殖抑制作用（P<0.05），对上皮性卵巢癌细胞SKOV3、OVCAR3、A2780的半抑制浓度IC50值分别为33.777 μg/μl、34.114 μg/μl、31.968 μg/μl。荧光定量PCR检测结果表明，和空白组相比，经牡荆苷处理后，上皮性卵巢癌细胞SKOV3、A2780、OVCAR 3组Beclin-1 mRNA相对表达量增加，Bcl-2 mRNA相对表达量降低，差异均有统计学意义（均P<0.01）。以上皮性卵巢癌细胞SKOV3为研究对象，细胞凋亡检测结果显示，随着牡荆苷浓度的增加，其对上皮性卵巢癌细胞SKOV3的生长抑制作用越显著（P<0.01）；Western bolt结果显示，经牡荆苷处理后，上皮性卵巢癌细胞SKOV3中Beclin-1蛋白表达显著升高（P<0.01），Bcl-2蛋白表达明显减少（P<0.01）。结论牡荆苷可以抑制上皮性卵巢癌细胞的增殖，并诱导其凋亡，具有明显的抗肿瘤作用，可能是通过调节Bcl-2与Beclin-1的交互作用发挥抗癌活性，控制肿瘤细胞自噬水平，促进自噬基因依赖性细胞死亡。