简介：摘要目的探讨线粒体Ca2＋浓度在高浓度氧致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡中的作用。方法取对数生长期的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞，采用随机数字表法分为3组(n＝6)：对照组(C组)、高浓度氧组(H组)和高浓度氧＋钌红组(HR组)。C组置于常规培养箱(5%CO2-95%空气)中培养4 h；HR组加入线粒体钙单向转运体抑制剂钌红2 μmol/L，然后H组和HR组置于高浓度氧密闭箱(90%O2-5%CO2-5%空气)中培养4 h。通过倒置相差显微镜观察细胞形态学；采用流式细胞术测定细胞凋亡率；采用多功能酶标仪检测线粒体内Ca2＋荧光强度，并计算Ca2＋浓度。结果与C组比较，H组细胞凋亡率和线粒体Ca2＋浓度升高，HR组线粒体Ca2＋浓度降低(P<0.05)，细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。与H组比较，HR组细胞凋亡率和线粒体Ca2＋浓度降低(P<0.05)。H组细胞呈现早期凋亡形态学表现(细胞皱缩呈球形、透亮度降低、与周围细胞脱离)，HR组较H组明显改善。结论线粒体Ca2＋浓度升高参与了高浓度氧致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡。

简介：摘要目的评价线粒体钙稳态在高氧诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)损伤中的作用。方法选取大鼠AECⅡ细胞株(RLE-6TN)，采用随机数字表法将细胞分为3组(n＝18)：常氧组(C组)常规培养箱中培养4 h；高氧组(H组)培养箱90%O2孵育4 h；高氧+钌红(HR组)先在培养瓶中加入2 μmol/L钌红溶液，随后处理同H组。处理结束后，采用线粒体Ca2+特异性荧光探针Rhod-2-AM测定线粒体Ca2+浓度，采用荧光探针DCFH-DA测定ROS水平，并观察细胞形态及线粒体超微结构。结果与C组比较，H组和HR组线粒体Ca2+浓度和ROS水平升高(P<0.05)；与H组比较，HR组线粒体Ca2+浓度和ROS水平降低(P<0.05)。与C组相比，H组细胞体积缩小，形态皱缩呈圆形，细胞排列疏松，线粒体双层膜结构断裂、线粒体嵴碎片；HR组细胞形态较H组显著改善，细胞线粒体双层膜结构轻微破坏，线粒体嵴结构正常。结论线粒体钙稳态失衡参与了高氧诱发大鼠AECⅡ损伤的病理生理过程。