简介：摘要目的通过建立大鼠肾移植模型，探讨蛋白激酶C-β(PKC-β)抑制剂对大鼠移植肾的影响并观察磁共振成像(MRI)在移植物中的相应变化。方法建立大鼠肾移植模型，将其采用随机数字表法分为3组，同质移植对照组、异质移植对照组和PKC-β抑制剂治疗组，每组10对。术后24 h先行MRI检查，然后处死大鼠取标本。术后第1天取静脉血用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中白细胞介素18(IL-18)、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)；术后第5天取静脉血检测各组血清肌酐(SCr)及尿素(BUN)；肾组织做苏木精-伊红(HE)染色，过碘酸雪夫(PAS)染色；IHC检测肾损伤分子1(KIM-1)。组间比较采用单因素方差分析。结果MRI显示术后24h大鼠移植肾在异质移植PKC-β抑制剂治疗组表观扩散系数(ADC)及T2加权成像分别为[(1.542±0.218)-3 mm2/s、(58.7±4.9) ms]，显著高于异质移植对照组[(1.437±0.198)-3 mm2/s、(54.3±4.7) ms]，而低于同质移植对照组[(1.692±0.235)×10-3 mm2/s、(60.1±5.3) ms]，差异有统计学意义(F＝91.232、39.428，P值均<0.01)；SCr、BUN、KIM-1、IL-18、NGAL在异质移植PKC-β抑制剂治疗组表达水平[(367.429±84.693) μmol/L、(49.629±14.506) mmol/L、(7.704±2.600)、(71.712±21.052) pg/ml、(222.805±131.799) pg/ml]分别高于同质移植对照组[(171.778±89.081) μmol/L、(26.807±12.468) mmol/L、(6.413±2.482)、(49.395±14.535) pg/ml、(157.618±30.439) pg/ml]，但低于异质移植对照组[(529.667±68.661) μmol/L、(70.907±12.075) mmol/L、(9.869±3.758)、(111.838±18.663) pg/ml、(830.787±209.994) pg/ml]，差异有统计学意义(F＝70.782、45.398、51.396、58.113、78.455，P值均<0.01)。结论PKC-β抑制剂可减轻肾移植后移植物的损伤，移植物通过无损伤MRI检测与上述结果呈对应关系。

简介：摘要目的通过制作大鼠肾移植模型，探讨蛋白激酶C-β(PKC-β)抑制剂对大鼠移植炎性反应的影响并观察与磁共振成像(MRI)的对应关系。方法将大鼠肾移植模型随机分为3组：同质移植组、异质移植组和异质移植PKC-β抑制剂组，每组10对。术后24 h行MRI检查，然后处死大鼠，取血标本用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测低氧诱导因子-1(HIF-1)和血红素氧合酶-1(HO-1)的mRNA表达量，取肾脏标本用免疫组织化学检测肾组织中白细胞介素(IL)-4、IL-8、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和单核细胞迁移抑制因子(MIF)的表达。组间比较采用单因素方差分析。结果MRI显示术后24 h大鼠移植肾在异质移植PKC-β抑制剂组冠状位扫描记录动脉自旋标记(ASL)及T1成像分别为[(294.19±42.13) ml/(min×100 g)、(1 951.1±82.9) ms]，显著高于异质移植组[(253.24±25.18) ml/(min×100 g)、(1842.1±79.6) ms]，而低于同质移植组[(331.65±49.44) ml/(min×100 g)、(2 047.6±89.3) ms]，差异有统计学意义(F＝42.323、95.445，P值均<0.01)；血清中的HIF-1和HO-1在异质移植PKC-β抑制剂组水平[(1 245.17±305.96)、(249.72±51.01)]分别高于异质移植组[(947.34±112.65)、(111.71±41.02)]和同质移植组[(1 157.74±224.63)、(147.52±42.22)]，差异有统计学意义(F＝61.252、37.832，P值均<0.01)；而肾组织中的IL-4、IL-8、MCP-1、MIF在异质移植PKC-β抑制剂组表达水平[(45.3±4.3)、(47.2±4.5)，(37.7±3.6)、(31.2±3.0)]分别高于同质移植组[(19.4±2.6)、(19.6±2.5)、(17.4±2.1)、(16.7±2.5)]，但低于异质移植组[(82.5±6.5)、(88.6±6.6)、(77.4±5.6)、(71.2±4.5)]，差异有统计学意义(F＝51.237、59.432、49.375、51.223，P值均<0.01)。结论PKC-β抑制剂通过减轻炎症浸润及产生保护因子来减轻肾移植后移植物损伤，与MRI检测结果呈对应关系。

简介：摘要目的探讨G蛋白偶联受体30(GPR30)抑制TLR4/NF-κB通路减少蛛网膜下腔出血(SAH)后神经元凋亡的作用及其机制。方法采用随机分组的方式将SD雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组n＝24，Sham 2组n＝21)、SAH模型组(SAH组n＝24，SAH 2组n＝21)及SAH模型+G1激动剂组(简称G1组，n＝24)。通过颈内动脉穿刺法进行SAH模型的构建。采用Sugawara评分评价大鼠SAH的严重性。SAH后24 h采用Garcia评分和平衡木试验评分评定神经功能缺损程度。成功建模24 h后，称重脑组织湿重和干重，计算脑组织含水率。绘制伊文思蓝标准曲线，评估血脑屏障通透性。采用免疫荧光染色观察各组小胶质细胞活化情况。采用蛋白质免疫印迹法(WB)检测各组GPR30、TLR4及NF-κB蛋白的表达情况；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组外周血TNF-α、IL-1β和IL-6促炎细胞因子的表达情况；采用TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果与SAH组相比，G1组Sugawara评分降低、平衡木试验评分和Garcia评分升高、脑含水率和伊文思蓝的渗出率均降低(均P<0.05)。随着时间的变化，Sham 2组GPR30表达量无明显变化(P>0.05)，建模后6、12、24、48和72 h，SAH 2组的GPR30表达量均较Sham 2组高，SAH 2组建模24 h的GPR30表达量最高，而后下降(均P<0.05)。Sham组、SAH组与G1组三组间比较，GPR30、TLR4和NF-κB表达量的差异均有统计学意义(均P<0.05)，其中G1组较SAH组TLR4和NF-κB表达量下降(均P<0.05)。免疫荧光染色结果显示，SAH组小胶质细胞数目较Sham组增多，而G1组较SAH组的小胶质细胞减少。ELISA结果显示，SAH组、Sham组与G1组的TNF-α、IL-1β及IL-6的表达差异均有统计学意义(均P<0.05)，其中，与SAH组比较，G1组的TNF-α、IL-1β及IL-6的表达均降低(均P<0.05)。TUNEL法染色结果显示，SAH组的TUNEL阳性细胞数较Sham组增加，而G1组较SAH组的TUNEL阳性细胞数减少。结论GPR30活化后可能通过抑制TLR4/NF-κB通路减少SAH后的神经元凋亡，改善SAH后早期脑损伤，保护神经功能。

简介：摘要目的探讨G蛋白偶联受体30(GPR30)抑制TLR4/NF-κB通路减少蛛网膜下腔出血(SAH)后神经元凋亡的作用及其机制。方法采用随机分组的方式将SD雄性大鼠随机分为假手术组(Sham组n＝24，Sham 2组n＝21)、SAH模型组(SAH组n＝24，SAH 2组n＝21)及SAH模型+G1激动剂组(简称G1组，n＝24)。通过颈内动脉穿刺法进行SAH模型的构建。采用Sugawara评分评价大鼠SAH的严重性。SAH后24 h采用Garcia评分和平衡木试验评分评定神经功能缺损程度。成功建模24 h后，称重脑组织湿重和干重，计算脑组织含水率。绘制伊文思蓝标准曲线，评估血脑屏障通透性。采用免疫荧光染色观察各组小胶质细胞活化情况。采用蛋白质免疫印迹法(WB)检测各组GPR30、TLR4及NF-κB蛋白的表达情况；采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组外周血TNF-α、IL-1β和IL-6促炎细胞因子的表达情况；采用TUNEL法检测神经元凋亡情况。结果与SAH组相比，G1组Sugawara评分降低、平衡木试验评分和Garcia评分升高、脑含水率和伊文思蓝的渗出率均降低(均P<0.05)。随着时间的变化，Sham 2组GPR30表达量无明显变化(P>0.05)，建模后6、12、24、48和72 h，SAH 2组的GPR30表达量均较Sham 2组高，SAH 2组建模24 h的GPR30表达量最高，而后下降(均P<0.05)。Sham组、SAH组与G1组三组间比较，GPR30、TLR4和NF-κB表达量的差异均有统计学意义(均P<0.05)，其中G1组较SAH组TLR4和NF-κB表达量下降(均P<0.05)。免疫荧光染色结果显示，SAH组小胶质细胞数目较Sham组增多，而G1组较SAH组的小胶质细胞减少。ELISA结果显示，SAH组、Sham组与G1组的TNF-α、IL-1β及IL-6的表达差异均有统计学意义(均P<0.05)，其中，与SAH组比较，G1组的TNF-α、IL-1β及IL-6的表达均降低(均P<0.05)。TUNEL法染色结果显示，SAH组的TUNEL阳性细胞数较Sham组增加，而G1组较SAH组的TUNEL阳性细胞数减少。结论GPR30活化后可能通过抑制TLR4/NF-κB通路减少SAH后的神经元凋亡，改善SAH后早期脑损伤，保护神经功能。

简介：摘要目的观察柚皮苷对蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤的影响，探讨其治疗SAH的机制。方法采用血管内穿刺法诱导大鼠SAH模型，将24只大鼠以随机数法分为4组，分别为假手术组、SAH组、SAH+柚皮苷40 mg/kg、SAH+柚皮苷80 mg/kg，每组6只。SAH模型24 h后检测SAH评分、神经功能评分、脑水肿、伊文思蓝渗出率。酶联免疫吸附实验(ELISA)检测氧化应激相关因子。蛋白质印迹法(Western blot)检测凋亡相关蛋白表达变化。染色检测凋亡的变化。采用方差分析(One way-ANOVA)，组间比较采用SNK法。结果柚皮苷(80 mg/kg)组神经功能评分高于SAH组(13.17±1.36比9.49±1.06，F＝72.774，P<0.05)。柚皮苷(80 mg/kg)组SAH评分、脑含水量、伊文思蓝渗出量低于SAH组[4.33±0.85比13.56±1.87，F＝40.432，P<0.05；(82.12±4.75)%比(83.85±3.78)%，F＝69.345，P<0.05；(1.23±0.43) μg/g比(2.39±0.57) μg/g，F＝27.661，P<0.05]。Nar-80组MDA低于SAH组[(5.95±0.36) nmol/mg比(17.44±5.38) nmol/mg，F＝74.593，P<0.05]。Nar-80组SOD、CAT、GSH-Px高于SAH组[(13.45±1.08) U/mg比(5.12±0.93) U/mg，F＝30.666，P<0.05；(103.23±7.92) U/mg比(47.00±4.87) U/mg，F＝80.658，P<0.05；(3.69±0.47) U/mg比(2.01±0.10) U/mg，F＝60.578，P<0.05]。染色结果显示柚皮苷减少凋亡细胞阳性数目(P<0.05)。结论柚皮苷能够显著抑制SAH后氧化应激和细胞凋亡的发生，改善SAH后的早期脑损伤。

简介：摘要动脉瘤性蛛网膜下腔出血(aSAH)是一种严重的急性出血性脑血管病，其预后极其不良。近年来关于蛛网膜下腔出血病理生理过程的研究主要集中在早期脑损伤，研究结果显示核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在蛛网膜下腔出血后的早期脑损伤过程中被激活，参与氧化应激反应、促进脑组织炎性反应、损伤血脑屏障并促进神经元、血管内皮等细胞死亡，最终造成神经功能损伤。本文将综述NLRP3炎性小体在动脉瘤性蛛网膜下腔出血中的作用及其机制。